鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从陕西省榆林市某蛋用种鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡中分离到了1株肾型IBV(定名为YL—04)，并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化、电镜特征等生物学特性鉴定及S1基因5’端的RT—PCR鉴定。结果表明，该分离株经10g／L胰酶处理后的各代病毒尿囊收集液均可凝集鸡红细胞；标准阳性血清可特异性地抑制其凝集性；可复制出与自然发病相同的病例；病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用；透射电镜下可见有近似球形、直径100nm左右的冠状病毒粒子；用RT—PCR方法扩增到1条373bp的目的片段，其核苷酸序列与IBVCQ／01／2004株序列的同源性达98％。     

抗猪瘟病毒NS3(p80)蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定

在大肠杆菌Rosetta（DE3）中表达猪瘟病毒石门株NS3基因部分功能片段,以纯化的重组NS3（p80）蛋白免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0进行融合,经间接ELISA筛选及3次连续克隆化获得了4株可分泌抗NS3单抗的杂交瘤细胞（2G7,2F11,5D2和6F11）,通过小鼠体内诱生法制备腹水,并对杂交瘤细胞和单克隆抗体的特性进行鉴定。结果表明,杂交瘤细胞染色体正常,抗体分泌稳定,单抗效价高,亲和力各不相同,Ig亚类鉴定均为IgGl。Western blot分析证明4株单抗均能与原核表达的NS3蛋白特异性结合,6F11株与真核表达的NS3蛋白有较强的特异性反应。     

干扰和稳定表达GP5对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染早期复制的影响

为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)主要结构蛋白GP5对病毒复制的影响及其机制,利用PiggyBac Transposon载体系统构建表达GP5的重组质粒(pPB-GP5),转染Marc-145细胞通过嘌呤霉素抗性筛选和3次亚克隆,获得稳定表达GP5的Marc-145细胞,在确定GP5表达不影响细胞增殖的基础上,用PRRSV感染筛选的细胞,通过N基因拷贝数、N蛋白表达水平和病毒滴度检测确定GP5表达对病毒复制的影响,并采用ELISA方法检测培养上清中IFN-α、IFN-β、IFN-γ的水平;进一步针对PRRSV ORF5编码区设计合成3对特异性siRNA,转染Marc-145细胞6和12h后以0.1 MOI病毒感染细胞,感染后24h收集细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测GP5mRNA的表达,采用Western blot检测PRRSV N蛋白的表达。结果显示:经RT-PCR、Western blot和IFA检测,确定GP5在Marc-145细胞中获得稳定表达,且不影响细胞增殖,但可以在感染早期促进PRRSV在细胞中的复制,这种促进作用可能是通过下调IFN的表达发挥的;与阴性对照siRNA相比,3对特异性siRNA均能抑制PRRSV复制,其中100nmol·L~(-1)的siRNA GP5-471的抑制效果最好。研究表明GP5在PRRSV复制中发挥着重要作用。     

集约化猪场仔猪黄白痢的综合防治

仔猪黄白痢是由埃希氏菌属(Escherichia)中的一些大肠埃希氏菌(E.coli)条件性致病菌株所引起的细菌性传染病。致病性大肠杆菌通常只有在肠道内环境改变或其他诱激因素的作用下,可以在肠道内大量繁殖,导致下痢。仔猪黄白痢的发生主要由致病性大肠杆菌引起。其中黄痢多发生于7日龄以内仔猪,病猪主要表现为排黄色或黄白色稀粪,黄痢病猪抗过7天以后症状逐渐转化为白痢症状。近年来,豫北地区集约化养猪场     

猪传染性胃肠炎疫苗研究进展

猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性肠道传染病,不同年龄和品种的猪均可感染,严重危害着全世界养猪业的健康发展.疫苗接种是防控本病的关键措施之一.常规疫苗在防控猪传染性胃肠炎中发挥了巨大的作用,但在某种程度上存在不可避免的缺陷,对根除和消灭传染病带来了严重困难.随着分子生物学技术的不断发展,基因...     

“慕课”等在兽医免疫学本科教学中的应用

本文首先解析了兽医免疫学传统教学模式和"慕课-微课-翻转课堂"各自的优势及不足之处,结合兽医免疫学课程的特点,分别阐述了"慕课"、"微课"和"翻转课堂"如何与传统教学模式相结合,以更好地发挥3种教学方式在兽医免疫学本科教学中的作用,不断提升兽医免疫学的教学效果,保障高质量地完成兽医免疫学本科教学工作。     

MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化

将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1细胞进行间接荧光抗体染色以检测M ATSA的分离情况。获得的M ATSA粗提物经超滤浓缩和Sephadex G-75凝胶纯化后,用SDS-PAGE检测纯化的结果。试验结果表明,从M SB 1细胞表面分离到M ATSA,经电泳获得了纯化的M ATSA,其相对分子质量约为35 ku。结果为M ATSA单克隆抗体的制备及其相关的研究奠定了基础。     

中药复方对奶牛隐性乳房炎病原菌的体外抑菌试验

取10头隐性乳房炎患牛乳汁,采用北京亚临床乳房炎快速诊断液(BMT试剂),对泌乳黑白花奶牛的乳汁进行了病原菌分离鉴定,结果共分离出金黄色葡萄球菌、乳房链球菌和大肠杆菌3种病原菌。将蒲公英、王不留行等中药水煎、去渣、浓缩制成相当于2g/mL的生药液,然后稀释为1.5,1.0,0.5g/mL3种质量浓度,用优质定性滤纸制成相应浓度的药敏片进行中药体外抑菌试验,结果表明,该中药对以上3种病原菌均有明显的抑制作用。     

淫羊藿多糖对雏鸡免疫器官及新城疫疫苗免疫效果的影响

疫苗免疫接种是预防和控制传染病的重要措施,而佐剂是疫苗研究的重要组成部分.选择合适的佐剂不仅可以增强疫苗的免疫效果,而且可以提高机体的抵抗力.本研究将50、100、150 g/L等不同浓度的淫羊藿多糖与灭活的鸡新城疫病毒乳化,制备疫苗免疫雏鸡,通过检测抗体效价和免疫器官指数,探讨淫羊藿多糖作为免疫佐剂对鸡免疫功能的影响.结果表明,100 g/L和150 g/L的淫羊藿多糖作为免疫佐剂均可促进抗体的产生,提高脾脏指数,但对法氏囊指数的促进作用不明显.