重组植酸酶appA-2QN在毕赤酵母中的高效表达

对来源于大肠杆菌的植酸酶基因app A进行突变获得植酸酶基因突变体app A-2QN,利用酵母表达系统在摇瓶培养条件下表达后,该植酸酶突变体显示出良好的热稳定性。为提高该植酸酶的表达量,降低植酸酶的生产成本,对表达该酶的重组酵母菌GS115/app A-2QN进行了高密度发酵研究,通过控制发酵过程中碳源(甘油)的添加使得菌体生长达到一定密度,从而实现高效表达。在诱导蛋白质表达阶段,发酵液中甲醇的含量影响植酸酶的表达量,利用变色酸分光光度法对甲醇含量进行了检测分析。结果表明,在5 L发酵罐中进行高密度发酵147 h后,菌体浓度OD600nm达到313,通过将甲醇浓度控制在2.5%左右,经过诱导102 h后,蛋白达到了较高的表达量,为7.06 g/L,酶活性(发酵效价)为2.03×105U/m L。结果表明,通过高密度发酵提高了产植酸酶app A-2QN的酵母工程菌的细胞生长密度和蛋白质表达量,揭示该重组酵母菌株具有良好的表达稳定性。     

一种适于SSR-PCR的棉花基因组DNA提取法

本文是一种适合于棉花这样高含酚类植物进行DNA提取的方法,提取程序中增加了DIECA、PVP40等对棉花酚类物质氧化有抑制作用的试剂,简化并改进了本实验室常用的棉花总DNA提取方法的步骤,使棉花总DNA能够快速高质量提取,避免了以往的棉花总DNA提取过程中棉酚的氧化对DNA提取质量的影响,提取的DNA能很好地进行SSR-PCR分析.本法提取的棉花总DNA呈乳白、疏松的丝状、干后为透明状,能很好的溶解在TE或ddH2O中.用本方法提取的棉花总DNA作为模板用JESPR系列SSR标记对其进行SSR-PCR扩增,可以扩增出清晰的条带.     

Sf9细胞PHB2蛋白的原核表达及其抗血清的制备

为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以...     

基于GIS和RS的土地利用与土壤侵蚀关系研究——以冀北地区为例

 冀北地区土壤侵蚀以水蚀和风蚀为主,根据水利部颁布的《土壤侵蚀分类分级标准》(1997),参考有关学者提出的土壤风蚀强度分级指标,构建研究区土壤侵蚀强度的分级指标。运用GIS和RS技术,提取土地利用、坡度、植被覆盖度、土壤质地等信息,通过GIS空间叠加分析,得出冀北地区土壤侵蚀强度分级图,详细研究土壤侵蚀强度的空间分布特征;进一步与土地利用图叠加,分析不同土壤侵蚀强度下的土地利用特征和不同土地利用类型的土壤侵蚀状况。     

长沙市桃花岭景区林相改造探析

针对桃花岭景区林相单一、季相变化不明显、空间利用不充分、群落结构简单、缺乏防护林,存在安全隐患等林相现状,提出2种林相改造模式:①人流集散处的植物配置改造:入口区以桃花为主题,搭配其他春季开花植物营造春天花海景观;园路两侧采用乔灌草多种搭配方式组合,营造富于变化的植物景观;溪流、水库周边种植耐水湿、观赏性高的乡土树种、开花或观叶地被植物及蕨类植物;服务用房区应结合建筑物东南西北不同的面进行植物配置.②山体林相改造:洪寺庵水库周边山体增种或补种秋色叶树种;腊八寺周边山体增种或补种耐水湿且观赏价值高的植物;临城市道路周围山体增种或补种当地常绿阔叶林的建群树种和秋色叶树种.最后对长沙市桃花岭景区的发展前景进行了展望.     

山东省农村可持续发展问题辨析及对策

农业是国民经济的基础,山东省是我国的农业大省,农村的可持续发展是山东省可持续发展的根本保证。无论是人口增长与耕地面积减少的矛盾,还是农业剩余劳动力过剩与非农产业发展不足共存的现象,抑或是农村社会事业和基础设施发展不足的现实,以及农村人口文化教育水平低、环境意识差的难题,甚至复杂的农村环境污染问题,都是山东省农村可持续发展中面临的非持续性因素。在对山东省农村可持续发展问题的清醒的认识和充分的估计的基础上,本文探讨了促进山东省农村可持续发展的主要措施。     

畜禽保种群体遗传多样性的模拟

 【目的】基于微卫星标记特点,采用计算机模拟技术,探讨畜禽保种群遗传多样性的变化过程。【方法】选择30个均匀分布于基因组、具有4—10个等位基因的标记位点,位点间无相互作用;模拟产生的畜禽保种群公母比例为1﹕5、随机交配、各家系随机等量留种、群体规模保持世代恒定,世代间无重叠,群体有效大小分别为Ne=10、20、50、100和200,保种繁殖50个世代,1 000次重复。采用多态性位点数（num-p）、平均等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ae）、观测基因杂合度（Ho）、期望杂合度（He）、稀有等位基因数（RA）、缺乏丰富位点数（NRP）作为遗传多样性度量指标。【结果】保种群体的遗传多样性总体趋势随保种世代而逐渐降低,不同群体规模遗传多样性的降低速度差异显著,相比基础群,Ne值越大,num-p、Na、Ae、Ho、He和 RA的下降速率越慢,且当Ne=100和200时,num-p基本维持50个世代不变,RA则分别增加0.86%和2.49倍;而Ne值越大,NRP的增加速率越慢。【结论】遗传漂变导致了群体内遗传多样性的丢失。小群体中遗传漂变导致的遗传多样性丢失速度比大群体更高,发生在闭锁群体水平上的有效群体规模的减少将加快基因漂变速度,从而降低保种群体内的遗传多样性。     

不同类型林分枯落物持水功能研究

文章以冀北山区典型的针叶林、阔叶林、针阔混交林3种不同林分类型为研究对象,对不同林分类型林下枯落物层的水文效应进行研究,结果表明:(1)对枯落物的持水过程测定,不同类型林分总体趋势基本一致,枯落物的持水量随着浸泡时间的延长而增大,在最初的2h内吸水速度最大,到4h后开始下降,吸水速度明显变缓。(2)冀北山区3种不同林分类型林下枯落物储量范围是21.34²6.54t/hm2,其大小顺序为针叶林>针阔混交林>阔叶林;最大持水量范围是54.19t/hm226.54t/hm2,其大小顺序为针叶林>针阔混交林>阔叶林;最大持水量范围是54.19t/hm2⁵9.18t/hm2,其大小顺序为阔叶林>针阔混交林>针叶林;最大持水率在200.89%59.18t/hm2,其大小顺序为阔叶林>针阔混交林>针叶林;最大持水率在200.89%²87.955%之间,其顺序为阔叶林>针阔混交林>针叶林。     

外植体采集时期与冷藏处理对马尾松愈伤组织诱导的影响

马尾松(Pinus massoniana)无性繁殖困难,研究常采用体细胞胚胎发生和器官发生的方式繁殖,外植体采集时期是实验成功的关键.本实验采用2011年10月至2012年10月期间(每周或每两周采集1次)采集的马尾松枝梢顶端分生组织为外植体,并将外植体置于4cC冰箱冷藏做不同冷藏时间处理(4 ～ 114天).处理后的外植体接种在添加不同激素浓度的改良GD培养基中,24 ～ 25℃条件下暗培养.实验结果表明:冷藏时间对马尾松愈伤组织诱导没有显著影响;2012年3月中旬至4月底采集的马尾松外植体,愈伤组织诱导率最高达89.8％,其平均诱导率达到80％以上;外植体经流水冲洗2～3h、75％的酒精处理20 ～30 s、0.1％的升汞处理9～ 10 min并去除鳞片和针叶,能有效降低外植体污染率;外植体经流水冲洗2～3h、去除鳞片和针叶后切成长约0.2 ～0.5 cm的薄片后接种,能大大降低培养过程中外植体的褐化率.     

论科研档案在史志编纂中的应用

科研档案是在科研活动过程中直接积累的各类具有保存价值的科研成果和有关科研方面的文件,它具有为实际研究提供理论依据和参考价值以及作为史料的保存价值。笔者通过科研档案的特点分析,阐述了其重要史料价值及在史志编撰中的具体应用价值。