| 重组植酸酶appA-2QN在毕赤酵母中的高效表达 |
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| 引用本文： | 宋玛丽,王茜,杜军,赵峰梅,梁爱华.重组植酸酶appA-2QN在毕赤酵母中的高效表达[J].华北农学报,2015(2). |
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| 作者姓名： | 宋玛丽 王茜 杜军 赵峰梅 梁爱华 |
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| 作者单位： | 1. 山西大学 生物技术研究所，化学生物学与分子工程教育部重点实验室，山西 太原 030006
2. 山西省生物研究所,山西 太原,030006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31372199；31272100)；山西省回国留学人员科研资助项目 |
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| 摘 要： | 对来源于大肠杆菌的植酸酶基因app A进行突变获得植酸酶基因突变体app A-2QN,利用酵母表达系统在摇瓶培养条件下表达后,该植酸酶突变体显示出良好的热稳定性。为提高该植酸酶的表达量,降低植酸酶的生产成本,对表达该酶的重组酵母菌GS115/app A-2QN进行了高密度发酵研究,通过控制发酵过程中碳源(甘油)的添加使得菌体生长达到一定密度,从而实现高效表达。在诱导蛋白质表达阶段,发酵液中甲醇的含量影响植酸酶的表达量,利用变色酸分光光度法对甲醇含量进行了检测分析。结果表明,在5 L发酵罐中进行高密度发酵147 h后,菌体浓度OD600nm达到313,通过将甲醇浓度控制在2.5%左右,经过诱导102 h后,蛋白达到了较高的表达量,为7.06 g/L,酶活性(发酵效价)为2.03×105U/m L。结果表明,通过高密度发酵提高了产植酸酶app A-2QN的酵母工程菌的细胞生长密度和蛋白质表达量,揭示该重组酵母菌株具有良好的表达稳定性。
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| 关 键 词： | 重组植酸酶 毕赤酵母 高密度发酵 高效表达 |
High Level Expression of a Recombinant Phytase appA-2 QN in Pichia pastoris |
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| SONG Ma-li,WANG Xi,DU Jun,ZHAO Feng-mei,LIANG Ai-hua.High Level Expression of a Recombinant Phytase appA-2 QN in Pichia pastoris[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2015(2). |
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| Authors: | SONG Ma-li WANG Xi DU Jun ZHAO Feng-mei LIANG Ai-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant phytase Pichia pastoris High cell-density fermentation High level expression |
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