嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因的克隆表达

为了研究嗜水气单胞菌重组弹性蛋白酶的酶学性质,试验根据GenBank中的嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因ahyB设计1对含酶切位点的特异引物,以嗜水气单胞菌J-1(AhJ-1)株为模板,经PCR扩增得到不含信号肽的成熟弹性蛋白酶基因片段(787 bp),并与pMD18-T载体连接、测序,再用DNAStar软件分析。结果表明:该基因片段与豚鼠气单胞菌胞外蛋白酶同源性高达95%,与嗜水气单胞菌AG2株弹性蛋白酶ahyB基因同源性为92%,与铜绿假单胞菌LasB基因同源性为82%;将PCR产物连入表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达,出现50 ku的融合表达蛋白,该表达产物纯化复性后表现出酶的活性。     

PRRSV对仔猪免疫力的影响

为了研究PRRSV对仔猪免疫力的影响,试验将13头46日龄的健康仔猪随机分A、B、C 3组,48日龄时A组猪进行滴鼻接种PRRSV LC毒株(TCID50为1×10-5.25/0.1 mL)3 mL/头,B组猪滴鼻接种未接毒正常细胞培养物3 mL/头;50日龄时A组、B组猪免疫猪瘟疫苗4头份,C组猪肌肉注射生理盐水4 mL;免疫后1,7,14,21,28,35天利用ELISA和MTT等方法检测试验组猪猪瘟抗体水平和外周血T淋巴细胞转化率.结果表明,A组猪瘟抗体水平和T淋巴细胞转化率显著低于B组(P<0.05)有极显著的,说明PRRSV对仔猪免疫力有一定的抑制作用.     

蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用

在病毒学领域中,如双向差异凝胶电泳、偶联应用质谱和稳定同位素标记等的蛋白质组学技术正在被广泛应用,可从整体层面上分析组织或细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与翻译后修饰,探索蛋白质的功能及蛋白质之间相互作用与联系,有助于病毒感染及病毒与宿主间的相互作用机制的研究,推动病毒相关疾病诊断和治疗的发展。作者简要论述了近年来蛋白质组学技术在病毒及其感染机制研究中的应用,并对其在病毒学研究中的应用前景作了展望。     

鸡马立克病肺组织肿瘤病变与热休克蛋白表达的相关性分析

为探讨马立克病毒(Marek’s disease virus, MDV)与肿瘤发生、发展的关系,本研究建立了鸡马立克病(Marek’s disease, MD)模型,并利用病理组织学、免疫组织化学、荧光定量PCR、酶联免疫吸附(ELISA)等方法测定了肿瘤相关蛋白热休克蛋白60(heat shock protein 60, HSP60)在鸡肺脏组织内的定位及转录水平和含量的动态变化。结果显示,HSP60在攻毒组鸡肺脏肿瘤细胞的细胞质内强表达,试验周期内攻毒组HSP60 mRNA转录水平极显著高于对照组(P<0.01),总体呈开口向下的抛物线型,即7～28日龄间持续升高,28日龄达到最高值,分别为空白对照组和疫苗对照组的1.39倍和1.44倍,之后降低;HSP60含量7～28日龄攻毒组极显著高于空白对照组(P<0.01),35日龄后两者间差异不显著。该结果为进一步研究HSP60在肿瘤发生过程中的生物学作用奠定了基础。     

结核分枝杆菌菌体蛋白对鸡红细胞免疫功能及淋巴器官发育的影响

将180羽1日龄AA肉鸡随机分为6组,分别设置为结核分枝杆菌菌体蛋白高、中、低剂量组,未破碎全菌体组,菌体蛋白注射组和对照组,每组30羽.对照组仅饲喂基础日粮,试验组分别添加不同剂量的分枝杆菌菌体蛋白.试验鸡于14、21、28、35 d时分别进行剖杀.通过红细胞C3b受体花环和红细胞免疫复合物花环试验及试验鸡免疫器官组织学检查,结果表明:分枝杆菌菌体蛋白能有效增强鸡红细胞免疫功能并能刺激淋巴器官的发育和增殖.     

基于OBE教育理念的动物疫病防控技术课程改革初探

OBE（outcome based education）是一种以学生为本的成果导向教育模式，该研究将OBE引入动物学硕士研究生动物疫病防控技术理论教学中，充分论证课程教学目标，重新组合知识模块，引入相关企业技术讲师进课堂，全面评估教学结果。结果表明，在该教育模式下，学生学习目标更明确，将社会需求与高校人才培养充分融合，取得了良好的教学效果。     

复方中药对SPF鸡血清抗体消长规律的影响

为研究复方中药对SPF鸡血清抗体变化规律的影响,在SPF鸡接种新流二联疫苗后第0,1,2,3,4,5,6,7,8周,用HI方法检测血清抗体,比较饲喂复方中药与不饲喂复方中药SPF鸡血清抗体的变化。结果表明:复方中药能够促进SPF鸡血清抗体的生成,抗体持续时间长,抗体效价平稳上升、变化幅度小;而对照组抗体变化幅度较大。说明复方中药对SPF鸡具有免疫调节作用。     

利巴韦林对猪的毒性观察

猪对利巴韦林特别敏感,尤其是口服,对猪的毒性很大[1].虽然,关于猪利巴韦林中毒的病例时有报道[1-3],但对猪利巴韦林中毒的病理变化及发病机制尚缺乏系统的研究报道.本试验拟通过对生长猪饲喂高剂量(0.1～0.2 g/kg体重)的利巴韦林,使实验猪发生急性利巴韦林中毒,建立猪利巴韦林急性中毒实验动物模型,观察试验猪的发病情况、临床症状,检测组织脏器的病理性损伤及血液指标的变化,探讨利巴韦林中毒的病理变化及发病机制,以便为猪利巴韦林中毒的诊断和防治提供理论依据.     

嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因的克隆表达

为了研究嗜水气单胞菌重组弹性蛋白酶的酶学性质,试验根据GenBank中的嗜水气单胞菌弹性蛋白酶基因ahyB设计1对含酶切位点的特异引物,以嗜水气单胞菌J-1(AhJ-1)株为模板,经PCR扩增得到不含信号肽的成熟弹性蛋白酶基因片段(787 bp),并与pMD18-T载体连接、测序,再用DNAStar软件分析.结果表明:...     

长途运输应激对猪肾脏中HSPs mRNA转录水平及定位影响

利用原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输对猪肾脏中HSP70及HSP90BmRNA转录水平及在组织细胞中定位的影响。经1,2,4,6和10 h的运输应激后,肾组织中HSP70mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10 h时,HSP70mRNA的转录水平升到最高,为对照组的14.2倍;HSP90mRNA的转录水平在应激初期(1~2 h)急剧升高(P<0.01),到运输应激持续到6 h后,升高不再显著。HSPs mRNA在肾组织细胞中的定位无肉眼可见的随着应激时间的延长而发生相应变化。HSP70mRNA和HSP90mRNA在肾小球毛细血管内皮细胞的胞核以及肾小管上皮细胞中呈阳性分布。运输应激可以导致HSPs mRNA转录水平的变化,并且对不同家族的HSPs mRNA转录水平的影响不同;HSP70mRNA的转录水平随着应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,有望成为猪运输应激的判定指标之一。