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为了进一步研究棉花体细胞胚胎发生的分子机制,采用RNAi技术,利用棉花生物学国家重点实验室在表达载体p BI121的基础上成功改造的双元表达载体pCRI1210,构建了针对棉花胚性愈伤组织抑制性消减文库中上调表达的4个ESTs干涉载体pCRI210-EST(EST-418、EST-447、EST-496和EST-653)。以从中棉所24中筛选出的体细胞胚胎分化率较高的株系W10的无菌苗下胚轴切段为受体,利用农杆菌介导法转化pCRI1210-EST干涉载体,浸染后的下胚轴切段在愈伤组织诱导培养基上进行分化。利用半定量RT-PCR技术检测愈伤组织的cDNA。结果表明,转化4个ESTs干涉载体后的胚性愈伤组织中均检测到了载体骨架,证明干涉载体均成功整合进了基因组DNA中,而4个ESTs对应的cDNA的表达量均出现不同程度的下调,不同干涉载体转化的下胚轴出愈率呈现上升和下降2种结果。其中转化EST-418干涉载体的下胚轴出愈率与对照相比有所提高,转化EST-447、EST-496和EST-653干涉载体的下胚轴出愈率与对照相比出现不同程度的下降。因此推断,4个ESTs在愈伤组织分化过程中发挥着不同的作用。其中,EST-418在棉花体细胞胚胎发生过程中起抑制作用,而EST-447、EST-496和EST-653国外品种中在棉花体细胞胚胎发生过程中起促进作用,其结果为分离棉花体细胞胚胎发生相关基因提供了技术和理论支撑。 相似文献
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RNA干涉(RNA interference, RNAi)技术具有简单、高效、高通量等特点,越来越受到人们的重视,已逐渐成为基因功能鉴定等生物技术领域的研究热点之一。简要介绍了RNAi的技术特点及其在植物研究中最新的研究成果,并综述了其在棉花研究领域中的应用情况。 相似文献
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NO对延长芒果货架期的影响研究 总被引:1,自引:1,他引:0
为探讨用NO进行芒果保鲜的新方法,以硝普钠(SNP)为NO供体,采用不同浓度的SNP浸泡处理芒果(Mangifera indica L. ‘Tainong No.1’),研究芒果贮藏期间的外在品质和采后生理生化变化。结果表明,10 μmol/L的SNP处理能够有效推迟芒果硬度下降、抑制果实转黄、控制重量损失、提高好果率、降低病害指数、控制可溶性固形物的变化,其货架期延长3~4天。640 μmol/L和1280 μmol/L SNP处理对芒果产生明显的毒害作用,且表现出随浓度的升高毒害加重的趋势。SNP处理能够控制芒果的各种外在和内在指标的变化,但有一定的浓度范围。超过这范围,反而起毒害作用,并且这种毒害作用与浓度成正比。 相似文献
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介绍了一种以陆地棉不育系104-7A的无菌苗下胚轴为试验材料,专门针对棉花线粒体DNA的提取方法。与黄化苗子叶为材料相比,该法大降低了叶绿体DNA污染的几率。由于棉花中含有大量的棉酚和单宁等物质,增加了线粒体DNA提取的难度,因此在试验的过程中有针对性的加入了PVP、BSA和DIECA,简化了试验流程,提高了线粒体DNA的质量和产率。通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳和PCR检测,证明该方法提取的线粒体DNA纯度极高,能够满足后续试验要求,为研究与线粒体基因相关的工作提供了技术支持。 相似文献
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2000年5月10~12日 ,全国林业站培训工作会议在北海召开。国家林业局林业工作站管理总站站长马广仁,副站长林海涛、米海生,广西区林业局副局长张锁及各省、市、自治区负责林业站工作的有关人员共50多人参加了会议。马广仁总站长在报告中特别强调指出 :西部地区由于经济不够发达 ,林业工作任务繁重等原因 ,林业站系统培训工作相对滞后。面对西部大开发的形势,要加大资金投入,加快培训进度。会议期间 ,代表们就林业站人员培训的有关问题展开了热烈的讨论 ,并参观了铁山港区南康林业站及其多种经营项目和基地全国林业站培训工作… 相似文献
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