表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白基因的新城疫病毒感染性克隆的构建及病毒拯救

应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。     

基于高光谱数据的互花米草营养成分反演

  目的  粗蛋白、粗纤维和粗脂肪含量是决定草本质量的指标之一，研究以江苏大丰麋鹿国家级自然保护区（核心三区）内的互花米草为对象，结合高光谱数据和实测数据，找到光谱数据与互花米草营养成分的关系，建立相应的营养成分估测模型。  方法  在2018年3、5、7和10月，利用ASD Field Spec Pro FR2500高光谱仪采集互花米草叶片的光谱数据，同时采集互花米草叶片，测定其粗蛋白、粗纤维和粗脂肪含量，对原始反射率及其一阶导数和互花米草粗蛋白、粗纤维和粗脂肪含量实测值之间进行相关性分析，在350 ~ 1 364 nm和1 411 ~ 1 799 nm的范围内选取与互花米草各营养成分含量的相关系数绝对值大于0.7的波段，同时构建选定的8个植被指数，进行建模分析，筛选出最优模型。  结果  粗蛋白的估测模型以673 nm和1 740 nm处的光谱一阶反射率的多元线性估测最优（R2 = 0.917，RMSEP = 1.344）；粗纤维的估测模型以1 738 nm处的光谱一阶反射率的线性估测最优（R2为0.741，RMSEP为1.708）；粗脂肪含量的估测模型以1 734 nm和880 nm处的光谱一阶反射率的多元线性估测最优（R2 = 0.737，RMSEP = 0.343）。  结论  在构建的估测模型中，粗蛋白和粗纤维的估测模型对互花米草粗蛋白和粗纤维含量的估测结果极好，粗脂肪含量的估测模型可以对互花米草粗脂肪含量做出很好的预测。研究结果为评估互花米草营养质量提供参考和技术依据。      

绵羊毛囊及其角蛋白研究进展

毛囊是毛纤维的生长基础,决定毛纤维的性状,角蛋白是毛囊组成的重要成分之一。近年来,对毛囊生长发育和角蛋白基因的挖掘等取得了一定的进展。文章回顾了绵羊角蛋白基因的发现,已经与人类角蛋白基因相当,但在数量和分类上存在差异;笔者介绍了绵羊毛囊的形态学结构,简述了毛囊角蛋白基因的表达定位和影响毛纤维性状的角蛋白,并分析了毛囊中的蛋白质组学技术的应用对毛囊生长发育和毛纤维性状的重要作用,以期为绵羊毛囊生长发育和羊毛性状的分子选育提供新的研究思路。     

布顿大麦TB1基因的克隆及内生真菌对其表达量的影响

分蘖生长在茎基部不伸长的节间，有不定根，能独立于主茎存活，禾本科作物布顿大麦主要通过分蘖来提高产量；内生真菌和基因均能调控布顿大麦分蘖，为了探究内生真菌对宿主植物分蘖相关基因TB1的影响，本研究利用RT-PCR法对布顿大麦TB1基因进行克隆并测序，采用生物信息学方法对该基因的序列结果进行分析，用SYBR Green荧光染料法对新疆温宿县和青海柴达木盆地带内生真菌（E+）和不带内生真菌（E-）的布顿大麦TB1基因进行q-PCR相对表达量分析。结果显示，克隆的TB1基因蛋白质编码区（CDS）全长为804 bp，编码267个氨基酸残基；TB1基因无启动子和PolyA位点；经亚细胞定位，TB1蛋白预计在液泡，TB1蛋白无跨膜结构域、无信号肽、不属于跨膜蛋白、存在于TCP家族；推测TB1蛋白为不稳定蛋白质。布顿大麦TB1基因与大麦亚种的TB1同源性最高，为96.72%，且与大麦亚种的TB1处于同一支系。温宿县和柴达木盆地布顿大麦根、茎、叶中TB1基因表达量趋势一致，内生真菌显著降低了植株分蘖发生部位茎基部的TB1基因表达量，表明内生真菌侵染影响了宿主TB1基因表达进而调控宿主植物分蘖。研究结果为...     

铜麦6号苗期耐高铵与耐盐特性的鉴定及TaGS基因的表达模式分析

为鉴定小麦品种铜麦6号的耐高铵及耐盐特性，对铜麦6号、中国春及抗逆性较强的烟农19、三抗10号、矮优王、烟农21、山农25的发芽势和发芽率进行测定，发现铜麦6号的耐铵指数位列第一，耐盐指数位列第二。以中国春为对照品种，在高铵、高盐及其双重胁迫处理下，测定其苗期的叶片鲜重、根鲜重、主根和第一叶叶片长度以及根冠比，发现高铵、高盐及其双重胁迫处理7 d后，铜麦6号的上述指标均不同程度高于中国春(除铜麦6号的根冠比在高盐处理1 d后低于中国春外),说明铜麦6号具有较强的耐高铵和耐高盐特性。进一步采用qRT-PCR检测小麦苗期谷氨酰胺合成酶TaGS基因家族成员(根中TaGS1;1、TaGS1;2和TaGS1;3基因以及叶片中TaGS2基因)的表达模式，发现高铵、高盐及其双重处理均可诱导铜麦6号苗期TaGS基因上调表达，且高盐处理下上调表达更明显，其中除高铵与高盐双重处理7 d后的TaGS1;2基因以及高铵和高盐处理1 d后的TaGS2基因在铜麦6号中的表达量低于中国春外，其他三种处理不同时间点铜麦6号中这两个基因的相对表达量均不同程度高于中国春。这些结果说明，铜麦6号苗期TaGS基因家族与其耐高...     

就业为导向的实验动物技术专业课程体系建设

当前,我国正处于从经济大国向经济强国、人力资源大国向人力资源强国迈进的关键时期。教育部《关于推进高等职业教育改革创新引领职业教育科学发展的若干意见》（教职成[2011]12号）指出＂高等职业教育必须准确把握定位和发展方向,自觉承担起服务经济发展方式转变和现代产业体系建设的时代责任,主动适应区域经济社会发展需要,培养数量充足、结构合理的高端技能型专门人才＂。     

教育孩子的12种好方法（上）

一、给孩子随性玩耍的时间 美国儿童教育学者汤姆斯、阿姆斯壮指出，自由玩耍比有计划性的活动，对学龄前的孩子来说更为健康有益。父母要避免将孩子的时间塞满各种活动，所有的孩子都需要有一些无所事事，随性玩耍的时间。     

从即墨市农业机械化现状看农业机械化的发展

我国农业机械化的发展在经历多次波动后，到２０世纪９０年代初期，随着改革开放的不断深入，人们的生活水平的不断提高，农民手中有钱了，对农业机械的投入不断加大，机械化水平也不断提高。山东省即墨市２０００年农业机械总动力达到８０万千瓦，配套机械达到３．５２万台，拖拉机达到２．５８万台，农用运输车达到１．０４万台，小麦联合收割机达到１４００台，玉米播种机达到１８７０台，农业机械总值达到５．１７亿元，机耕率达到９０％，小麦机播率达到９５％、机收率达到９２％，玉米机播率达到６５％。在小麦生产过程基本实现机械化…     

尖椒种果采收成熟度及后熟作用对种子,幼苗的影响

尖椒种果的成熟度,影响种子的发芽表现。一般认为,果皮全红期就是采种适期。刘敏的试验否定了这个观点,认为暗红期(种果全红后8天)才是采种适期。然而,暗红期采收势必会影响上层果的成热,从而降低种子产量。此外,从红果中选采暗红果也不十分方便。有研究认为,辣椒种果后热3天种子活力和发芽率就明显增加。本文试图研究尖椒种果后熟作用的潜力,为尖椒采种工作提供参考。