家畜免疫球蛋白表达谱研究进展

目前,对于家畜的抗病育种工作正由传统育种转向分子育种领域,但对于家畜分子免疫领域,尤其是在免疫系统中起着重要决定性作用的免疫球蛋白基因的结构、类型和表达多样的分子机制相关研究报道较少,本文综述了常见家畜的免疫球蛋白表达谱研究进展。概括来说牛、羊和猪免疫球蛋白重链恒定区均含有编码五种免疫球蛋白的基因,但在猪和羊基因座上的排布情况还未确定。可变区的V、D和J片段数目相对于人和小鼠来说比较有限,其中羊的D片段未知。λ和κ两种轻链在三种动物中的使用状况有所不同:牛和羊偏好使用λ轻链,猪λ∶κ表达比率接近1∶1。     

牛精清蛋白及其作用

牛精清(bovine seminal plasma BSP)蛋白家族共有四种蛋白质,分别为BSP—A1、BSP—A2、BSP—A3、和BSP-30-KDa。BSP结构上由a和b两个功能区组成。a区是肝素结合住点,b区与磷脂胆碱结合。BSP主要由精囊腺和输精管的壶腹部分泌。在雄性生殖道内BSP保证精子的稳定,在雌性生殖道内BSP协同高密度磷脂蛋白、肝素诱导精子获能。     

陕西关中地区31个青贮玉米品种比较试验

本试验比较了31个玉米品种全株青贮的农艺性状和产能,以期筛选出适合在关中地区推广种植的优良青贮品种。结果表明,品种之间的农艺性状和产能均差异显著,其中生长时间最长的107 d,最短的87 d;叶片数最多的16.5片,最少的11.3片;株高最高的281.3 cm,最矮的199.5 cm;青贮产量最高的6.2吨·亩^-1,最低的2.1吨·亩^-1;干物质产量最高的1.8吨·亩^-1,最低的0.6吨·亩^-1。对产量最高的4个品种（‘DB08’、‘DK625’、‘JKQZ932’和‘HY36’）进行营养成分分析发现,除灰分之外,与对照粮饲兼用品种DZ12相比,它们的粗蛋白、粗纤维和粗脂肪含量存在显著性差异（P<0.05）。根据青贮产量和奶牛饲喂价值的需求,本文建议专用青贮玉米‘DB08’和‘DK625’适宜作为全株青贮玉米在关中地区进行大面积推广种植。     

“胚胎移植”模块化教学探索与实践

"胚胎移植"是《动物繁殖学》领域的高新技术之一,也是动物繁殖基础理论在畜牧生产中重要的实践应用。为了更好地完成《动物繁殖学》教学改革,提升广大动物科学专业学生对本课程的认识,本文以"胚胎移植"的模块化教学为例,从模块化教学的基本原则,基本特征,课程观及模块化教学的注意事项等方面对"胚胎移植"教学内容进行了阐述,希望能打破现行的填鸭式教学模式,培养学生的职业能力,促进动物科学专业教学转变,达到最终提高教学质量的目的。     

猪体外受精胚胎、孤雌激活胚胎以及体细胞核移植胚胎的体外培养

【目的】本研究系统比较了体外受精胚（IVFEs）、孤雌激活胚（PAEs）以及体细胞核移植胚（NTEs）的发育率和囊胚质量，同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。【方法】利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs，开展体外培养。【结果】（1）IVFEs、 PAEs 和NTEs的卵裂率分别为72.0％，66.0％和63.5％，各组间没有显著差异(P>0.05)；囊胚形成率分别为11.0％，22.6％和16.9％，也不存在明显不同(P>0.05)；然而，在囊胚质量，即ICM细胞数/总细胞数的比例上， IVFEs和NTEs均优于PAEs（0.448％，0.356％ vs 0.122％，P<0.05）。（2）对PAEs来讲，以PZM-3为基础培养基时囊胚率明显高于以NCSU-23为基础培养基时的处理组（35.4％ vs. 22.6％，P<0.05）；而对NTEs而言， 两种培养基在支持胚胎形成囊胚方面的效果相当（26.6％ vs. 21.1％，P>0.05），虽然PZM-3培养时胚胎卵裂率显著低于NCSU-23培养组（47.5％ vs. 63.5％，P<0.05）。【结论】（1）PAEs的囊胚质量在3种来源的胚胎中最差；（2）对PAEs理想的培养基，当用于NTEs培养时却不一定是最佳的选择。     

乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶载体 及其稳转山羊成纤维细胞系的构建

为改善山羊乳品质,创制乳汁中富含n-3不饱和脂肪酸的奶山羊育种新材料,首先构建了一种山羊乳腺特异性表达载体,以实现n-3不饱和脂肪酸合通路中4种脂肪酸合成酶基因(fat-1,fads2,elovl5和scd-1)的共表达。为初步验证该载体的有效性,通过脂质体法转染小鼠乳腺上皮细胞系C127,经G418筛选收集阳性C127转基因细胞,并对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测。结果表明,4种基因均可在C127细胞转基因中表达。将该多基因共表达载体转染奶山羊成纤维细胞,通过G418筛选获得了稳定转染的细胞系。PCR结果显示,4个目的基因均成功整合到奶山羊成纤维细胞基因组中。总之,本研究成功构建了乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶转基因载体及其山羊转基因细胞系,为创制乳腺特异性表达多不饱和脂肪酸的转基因奶山羊奠定了基础。     

冷冻保护剂和胎牛血清对牛成纤维细胞冷冻效果的影响

以甘油与DMSO为冷冻保护剂,添加5%-20%胎牛血清的DMEM为基础冻存液,对鲁西黄牛皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,结果表明:①同浓度DMSO为冷冻保护剂效果优于同浓度的甘油(P<0.05),但添加50%血清时并不明显(P>0.05),可能与较高血清浓度有关,血清对冻存细胞的影响高于冷冻保护剂的作用。②血清浓度一定时,DMSO和甘油浓度在10%-15%时,冻存效果较好。③当甘油与DMSO浓度一定时,血清浓度越高冷冻保存效果越好。④甘油与DMSO浓度一定时(DMSO浓度5%除外),添加10%和20%血清效果无差异(P>0.05)。因此,在实际应用中,考虑成本等因素,血清浓度达到10%时就已经能达到一般试验要求。     

SHM对山羊免疫球蛋白重链表达多样性的影响研究

山羊是重要家畜之一,目前关于其免疫球蛋白基因座的结构和表达多样性机制研究还较少。以西农萨能奶山羊为对象,通过体外克隆其免疫球蛋白重链重组的可变区并与潜在功能胚系基因比对,探究体细胞高突变在山羊免疫球蛋白重链可变区基因表达中的作用和机制。结果表明:山羊免疫球蛋白重链可变区表达过程中体细胞高突变的主要表现形式为碱基突变,插入/缺失突变较少。碱基替换突变偏好发生在A和G碱基,突变频率以A→G最高,其次为G→A和C→T;碱基发生转换的频率高于颠换,嘌呤碱基替换的数目是嘧啶的2倍左右;多数碱基替换发生在体细胞高突变的第二阶段,碱基改变集中在A:T碱基对上。碱基替换突变在可变区不同区域的替换频数表现为CDR2高于CDR1,FR3高于FR1和FR2。碱基的插入/缺失突变主要发生在CDRs,插入/缺失的碱基数目多为3或者3的倍数。总之,山羊免疫球蛋白重链可变区基因在表达过程中存在较为丰富的碱基突变,体细胞高突变是其重链可变区表达谱多样化的重要机制。