奶牛临床型乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

奶牛乳房炎是造成奶牛业经济损失最严重的疾病之一。临床型乳房炎有严重症状,患病乳腺奶产量明显下降,乳汁异常,如果不妥善处理,会导致乳腺的泌乳机能丧失,造成乳腺萎缩。目前奶牛场对临床型乳房炎的防治,绝大部分仍然应用抗生素,但由于抗生素的长期滥用,致使乳房炎的治疗效果极不理想。为此,笔者从细菌学角度分析了濮阳地区某些奶牛场临床型乳房炎的病原分布情况,对该地区的43例临床型乳房炎患牛进行病原菌的分离与鉴定,同时对所鉴定的菌株     

昆明动物园孔雀源大肠埃希菌毒力基因及耐药基因检测

为研究孔雀源大肠埃希菌毒力基因和耐药基因的流行特征,从昆明动物园采集孔雀粪样,从中分离鉴定大肠埃希菌,并对12种毒力基因及22种耐药基因进行检测。结果表明,从孔雀粪样中共分离鉴定出38株大肠埃希菌,分离菌traT基因携带率为100%;tsh基因携带率最低,为2.63%。未检出氨基糖苷类药物的耐药基因aac(3)-Ia、β-内酰胺类药物的耐药基因OXA、SHV,其余耐药基因均呈阳性,其中磺胺类耐药基因阳性率为7.89%~34.21%,四环素耐药基因阳性率为50%~57.89%,氨基糖苷类耐药基因阳性率为10.53%~50%,氯霉素类耐药基因阳性率为42.11%~71.05%,β-内酰胺类耐药基因阳性率为42.11%~63.16%,喹诺酮类耐药基因阳性率为13.16%~68.42%。研究结果可为孔雀大肠杆菌病的预防提供理论支持和实践借鉴。     

奶牛隐性乳房炎的检测方法

1乳汁病原微生物检查 隐性乳房炎由多种非特定的病原微生物引起,如细菌、真菌、病毒、支原体等。通常主要的病原是链球菌属、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和支原体。链球菌属、金黄色葡萄球菌占病原菌的90%~95%。有些病原菌虽存在于乳房内,但不一定致病。因此,仅仅依据乳汁中有无病原菌进行诊断不可靠,只能根据检出病原菌的种类、数量作出初步的诊断。     

表达Omp1和Omp2的猪大肠埃希菌融合菌株R2的构建

为了构建猪大肠埃希菌融合菌株,在药敏试验和MIC试验的基础上,对猪大肠埃希菌HY2株(O101,Omp1)和GXA1株(O107,Omp2)进行交叉耐药培育.以HY2(O101,Omp1,Amir,Czls)和GXA1(O107,Omp2,Czlr,Amis)为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备两亲本菌株原生质体,通过聚乙二醇(PEG)助融,进行原生质体融合,得到3株双耐药融合菌株.结果表明,猪大肠埃希菌原生质体制备和再生的最适条件是:溶菌酶浓度为200 U/mL,作用时间为25 min.筛选得到3株融合菌株R1、R2、R3,均可凝集两亲本的O抗原,其中,R2凝集性更好更稳定.进一步结合SDS-PAGE分析,显示融合菌株R2能较好的表达两亲本菌株形状,经多次传代仍能够稳定遗传.     

后海、后三里、大肠俞对大鼠便秘及胃肠运动神经递质的影响

后海（GV-1）、后三里（ST-36）、大肠俞（BL-25）是治疗动物便秘的常用穴位,本文旨在明确3个穴位对大鼠便秘的缓解作用及其对胃肠运动相关神经递质的调节作用,比较3个穴位作用途径的异同,探索便秘的优势穴位。选取SPF健康大鼠60只,随机分为6组。除对照A组外,其他5组大鼠每只每天灌服3 mg·（kg·d）^-1洛哌丁胺,建立便秘模型。5 d后,在便秘模型基础上,西药治疗C组灌服莫沙必利1.38 mg·（kg·d）^-1混悬液,D、E、F组分别针刺GV-1、ST-36、BL-25各30 min,连续6 d。检测血清5-羟色胺（5-HT）、生长抑素（SS）、血管活性肠肽（VIP）、P物质（SP）,结肠组织中5-羟色胺3受体（5-HT₃R）mRNA、5-羟色胺4受体（5-HT₄R）mRNA相对表达量及结肠组织结构。结果显示：造模5 d后,模型B组大鼠出现典型便秘症状,血清中5-HT、SS含量显著增加,VIP、SP显著下降,结肠组织5-HT₃R和5-HT₄R mRNA显著降低。西药治疗组和3个穴位组大鼠的便秘症状均显著缓解,首粒粪便时间缩短,粪便含水量增加,粪便长度增加。另外,针刺GV-1使血清中SS含量极显著降低36.34%（P<0.01）,5-HT含量显著下降。针刺双侧ST-36下调血清中5-HT含量23.93%,显著增加结肠组织5-HT₃R、5-HT₄R mRNA相对表达量（P<0.01）。针刺双侧BL-25,血清中VIP、SP含量分别提高27.48%、22.75%,显著降低5-HT含量。另外针刺3个穴位均可增加结肠杯状细胞表达。GV-1、ST-36、BL-25缓解便秘的途径有一定差异,但均能缓解大鼠便秘,改善胃肠道运动,调节胃肠道神经递质的含量,其中GV-1对便秘的改善作用最为显著。     

CD8+T细胞在不同年龄家兔胃肠道的分布规律

探讨不同年龄组家兔胃肠道各段CD8⁺T细胞的分布特征,为进一步研究CD8⁺T细胞的作用奠定形态学基础。采用免疫组织化学技术对不同年龄组(幼年组、青年组、老年组)家兔胃肠道内CD8⁺T细胞进行染色、观察及统计分析。结果显示,家兔的CD8⁺T细胞多呈圆形、椭圆形或呈不规则形。在不同年龄组家兔,胃肠不同部位的分布有如下特点:家兔的CD8⁺T细胞主要分布于胃肠道的固有层中;青年组CD8⁺T细胞的分布数量显著高于幼年组和老年组;各肠段之间CD8⁺T细胞分布的数量差异不显著,但其分布的总量按照小肠、大肠、胃的顺序依次降低。研究结果显示,CD8⁺T细胞在家兔小肠的分布最多,并且其数量随着年龄的增长呈现先上升后下降的趋势,青年家兔胃肠的分布最为丰富。     

鹅大肠埃希菌的分离鉴定及系统进化树分析

为对发病鹅感染致病性大肠埃希菌的临床治疗提供指导并防控致病性大肠埃希菌感染,本研究无菌采集腹泻鹅及病死鹅脾脏、肝脏等组织器官进行病原菌分离培养、染色观察、生化鉴定、致病性试验,对菌株部分基因进行测序、构建遗传进化树并进行药敏试验。结果显示,普通琼脂培养基上生长出灰白色、圆形、凸起、边缘整齐菌落,麦康凯琼脂培养基上长出玫红色、光滑圆润菌落;分离菌株经革兰氏染色,镜下可见革兰氏阴性菌,两端钝圆、大小中等,多呈单个存在的杆状菌;致病性试验表明,该分离菌株对小鼠、雏鹅均有较高致死率;遗传进化树结果显示,分离菌株与患者粪便分离株（GenBank登录号：CP024992.1）同源性最高,达99.5%;体外抑菌试验发现菌株耐药情况较严重,对大多数抗菌药均有较强抗性,仅头孢噻呋对该分离株有较强的抑菌作用,合理用药后病情得到有效控制。本研究为有效防治鹅大肠埃希菌病提供了理论依据,对规模化鹅场防控大肠埃希菌等其他细菌性疾病具有重要价值。     

鸡大肠杆菌病诊断以及防治对策

鸡大肠杆菌病是一种由致病性大肠埃希氏杆菌引起的一种传染病,较为常见。病鸡的特征以精神沉郁、食欲减退、羽毛松乱、产蛋量下降、慢性消瘦及关节发炎等为主,临床表现复杂多样。因此,进一步对鸡大肠杆菌病诊断要点和防治对策进行全面的分析探讨十分必要。     

噬菌体Bp7尾丝蛋白gp37的原核表达与鉴定

为了研究噬菌体尾丝蛋白gp37在识别宿主菌大肠埃希菌K12过程中的作用,PCR扩增获得gp37基因C端1 161bp序列,以EGFP为荧光标签,构建重组表达质粒pET-28a-EGFP-gp37,在大肠埃希菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达重组蛋白EGFP-gp37,亲和层析纯化蛋白。SDS-PAGE及Western blot检测结果表明,重组蛋白EGFP-gp37在大肠埃希菌BL21(DE3)为可溶性表达,表达量占菌体总蛋白量的23%。EGFP-gp37融合蛋白与大肠埃希菌K12相互作用,激光共聚焦显微镜检测结果显示,尾丝蛋白gp37能够吸附到宿主菌K12表面,表明尾丝蛋白gp37参与宿主菌受体的识别和吸附过程。