重组溶葡萄球菌酶对大鼠的毒性试验

观察重组溶葡萄球菌酶经口给药对大鼠的急性毒性和长期毒性。急性毒性试验中,大鼠以每千克体重5 000 mg的剂量口服重组溶葡萄球菌,观察中毒症状并测定LD50。长期毒性试验中,大鼠以每天每千克体重口服72,360,1 800 mg重组溶葡萄球菌酶,连续给药180 d,观察给药后45 d、90 d、135 d和180 d时大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理变化。结果表明,重组溶葡萄球菌酶口服对大鼠的LD50大于5 000 mg/kg,长期毒性试验未见明显毒性反应。说明重组溶葡萄球菌酶在规定剂量下使用是安全可靠的。     

养殖场分离的耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌基因突变研究

【目的】探讨从养殖场动物、环境和饲养员分离的大肠杆菌的gyrA 和parC 基因突变特征。【方法】用琼脂稀释法测定环丙沙星和恩诺沙星对菌株的最小抑菌浓度。PCR扩增gyrA 和parC 基因的喹诺酮耐药决定区，扩增的片段长度分别为525 bp和487 bp，PCR产物直接测序。【结果】在63株突变株中，在GyrA 亚基发生的氨基酸替代有Ser83→Leu（62株）和Asp87→Asn（52株）、Asp87→Tyr（2株）、Asp87→His（2株）；ParC 亚基的氨基酸替代有Ser80→Ile（47株）、Ser80→Arg（2株）和Glu84→Val（3株）、Glu84→Lys（4株）、Glu84→Gly（5株）、Glu84→Ala（1株）。环丙沙星对菌株的MIC小于0.125μg·ml-1时，GyrA和ParC亚基均没有任何变异；环丙沙星的MIC为0.125～0.25 μg·ml-1时，GyrA亚基出现单一氨基酸替代；环丙沙星的MIC为0.5～32μg·ml-1时，出现GyrA 83位和87位双替代或者GyrA83和ParC80位双替代；环丙沙星的MIC为4～128μg·ml-1，发生GyrA 双替代和ParC单替代；环丙沙星的MIC在16～128μg·ml-1，发生GyrA双替代和ParC 双替代。【结论】不同来源的耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌GyrA和ParC具有多种氨基酸替代类型，而且GyrA和ParC突变位点的数量与菌株对氟喹诺酮类耐药水平呈正相关。     

雅安地区山羊蠕形螨病的初步调查

山羊蠕形螨（Demodexcaprae）是山羊皮肤内的一种专性寄生虫，在所有山羊饲养区均有感染流行。其感染山羊后，不仅影响山羊生长发育，而且破坏皮肤组织，形成结节和空洞，严重损害皮张质量，降低板皮等级，给制革业和对外贸易造成很大经济损失。雅安地区山地面积多，是四川省的山羊生产基地之一，因此掌握山羊蠕形螨病的感染流行情况，对防治本地区的病羊，提高山羊板皮质量，无疑有极大意义。笔者曾就雅安地区的山羊蠕形螨病进行了初步调查．现将结果报告如下。1调查方法1．1调查对象：雅安地区外贸公司畜产品收购站收购存放的山羊板皮；…     

鸡源粪肠球菌生物膜形成能力与明胶酶E毒力基因相关性研究

为了探讨粪肠球菌明胶酶E(gelE)基因对粪肠球菌生物膜形成能力的影响,试验取鸡源粪肠球菌50株,设计特异性引物,通过PCR扩增粪肠球菌毒力基因gelE;利用96微孔板结晶紫染色法在595 nm波长下测定其OD值,对gelE基因和生物膜进行相关性分析。结果表明:有78%(39/50)的粪肠球菌呈生物膜阳性,22%(11/50)的粪肠球菌呈生物膜阴性;82%(41/50)的粪肠球菌呈gelE基因阳性,18%(9/50)的粪肠球菌呈gelE基因阴性,粪肠球菌毒力基因gelE和生物膜具有一致性。说明粪肠球菌gelE基因能够调控生物膜的形成。     

奶牛乳房炎大肠杆菌的血清型及耐药性调查研究

奶牛乳房炎是微生物感染或理化刺激引起的一种奶牛乳腺炎症，是造成奶牛业损失最严重的疾病之一。全世界约有2．2亿头奶牛，其中约有1／3的奶牛患有各种类型的乳房炎 。引起奶牛乳房炎的主要原因是感染病原微生物，可由多种病原菌共同或单独引起。迄今为止，人们已从奶牛乳房中分离到了130多种微生物，其中以金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌为主，这3种细菌引起的乳房炎占发病率的90％以上 。但各地奶牛乳房炎的病原感染情况不尽相同，因地理环境、卫生条件、饲养方式不同而有差异。现阶段国内外仍主要采用抗生素治疗乳房炎，但由于抗生素的大量使用及滥用，导致细菌耐药性而降低了疗效，而且使奶中抗生素的残留增加。为此，我们对内蒙古呼和浩特地区奶牛乳房炎进行了大肠杆菌的分离、鉴定和药物敏感性试验，并测定了血清型，这对于研制有效的疫苗、筛选敏感药物预防和治疗乳房炎具有重要意义。     

多杀性巴氏杆菌对替米考星耐药性的体外诱导

新药替米考星（Tilmieosin）对巴氏杆菌具有较强的抗菌活性及抗菌后效应，并且具有动物机体吸收快、血药浓度半衰期长、表观分布容积大、组织（尤其是肺组织）药物浓度高等优良的药动学特征，对临床畜禽多杀性巴氏杆菌感染表现出良好疗效‘孔“，已成为防治巴氏杆菌感染的一个重要药物。但随着替米考星的应用，发现多杀性巴氏杆菌菌株对替米考星的敏感性开始下降，     

重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎常见病原菌的体外杀菌试验

从患乳房炎和子宫内膜炎奶牛的奶或子宫黏液中分离菌株,鉴定后选取金黄色葡萄球菌105株、表皮葡萄球菌20株、大肠埃希氏菌20株、链球菌38株(其中停乳链球菌8株,无乳链球菌30株)和牛源多杀巴氏杆菌5株,在体外用重组溶葡萄球菌酶、苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素按照微量肉汤稀释法进行了杀菌试验。结果表明,重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎分离的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌具有良好抑杀效果,对链球菌(包括无乳链球菌和停乳链球菌)和牛源多杀巴氏杆菌具有一定的抑杀效果,对大肠杆菌作用较差;苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素都有一定量的耐药菌株产生,而重组溶葡萄球菌酶对苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素耐药菌株同样具有良好抑杀效果。     

奶牛子宫内膜炎大肠杆菌的分离血清型鉴定及其耐药性测定

子宫内膜炎是奶牛常发的一种生殖系统疾病,不仅影响机体正常的生理功能,而且会导致患牛长期不孕,有的甚至造成终生不孕[1].据调查,我国奶牛子宫内膜炎的平均发病率约为20%,在奶牛不孕症中,由子宫内膜炎所致的不孕奶牛约占60.1%～92.0%[2].奶牛子宫内膜炎主要由分娩或产后子宫感染病原微生物引起,其中以大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌等感染最为常见.临床上多使用抗菌药物治疗奶牛子宫内膜炎,随着病原菌耐药性的不断加重,用药剂量随之增加,这不仅提高了治疗成本,而且增加了乳产品中药物残留的风险.本文对内蒙古地区引起奶牛子宫内膜炎的大肠杆菌进行了分离、血清型鉴定,并测定其对24种抗菌药物的敏感性,旨在探明内蒙古地区奶牛子宫内膜炎大肠杆菌的血清型及耐药水平,为临床防治该病提供科学依据.     

DHPLC对环丙沙星诱导沙门菌靶基因和调控基因的突变筛选

选择11株动物源沙门菌(包括6种血清型)进行环丙沙星耐药性体外诱导.应用变性高效液相色谱(DH-PLC)对11株诱导株不同诱导阶段的靶基因gyrA、gyrB、parC、parE的喹诺酮耐药决定区(QRDR)和mar操纵子基因marO、marR、marA、marB、soxR、soxS及外排泵acrAB的抑制基因acrR(包括启动子区)进行基因突变筛选,并对筛选出的突变基因进行测序确证.结果显示,6种血清型沙门菌在诱导过程中,GyrA突变集中在S83F和/或D87G,marR、soxR、acrR均出现新突变,提示在环丙沙星诱导压力下,因靶基因和调控基因突变使耐药性不断增加.     

牛皮下注射爱普菌素注射剂后组织残留休药期的建立

建立牛肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织中爱普菌素残留的高效液相色谱荧光检测方法（HPLC-FLD）,并用统计学方法计算牛皮下注射爱普菌素后组织残留的休药期。牛组织样品经乙腈提取,过碱性SPE柱。组织样品添加浓度为2～100 ng·g^-1,平均回收率为70.5%～91.2%,变异系数为2.3%～11.5%;方法检测限和定量限分别为1和2 ng·g^-1。18头牛颈部皮下一次性注射爱普菌素注射液（1%）,注射剂量为200μg.kg-1体质量,分别在给药后第1、3、7、14、21、28天各屠宰3头取样,经HPLC-FLD分析。结果表明,皮下单次注射给药后,肌肉中药物残留量（2.1～9.3 ng·g^-1）低于美国规定的残留限量（10 ng·g^-1）;肝脏中药物残留量（29.8～625.1 ng·g^-1）低于美国、欧盟和CAC规定的残留限量（分别为4 800、1 500和2 000 ng·g^-1）;肾脏和脂肪中药物残留量（4.1～112.5ng·g^-1和2.1～96.4 ng·g^-1）都低于欧盟和CAC规定的残留限量（300和250 ng·g^-1）。采用欧盟官方推荐方法对残留浓度-时间数据统计分析,牛肌肉、肝脏、肾脏、脂肪休药期均为0 d。