禽肉产品中禽流感与新城疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

根据禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各设计1对引物,经优化单项RT-PCR(sRT-PCR)反应体系,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同时检测禽流感、新城疫的极限分别为10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR检测禽流感的敏感性与sRT-PCR一致,mRT-PCR检测新城疫的敏感性较sRT-PCR敏感性下降2个数量级。特异性试验表明,mRT-PCR仅检测到不同亚型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,对其他9种禽病原体和SPF鸡尿囊液均未扩增出片断。mRT-PCR检测39株禽流感H1、H5和H9亚型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,结果与sRT-PCR、HI试验完全一致;mRT-PCR和病原分离法同时检测人工感染鸡的组织脏器,2种方法检测禽流感的符合率为93.8%(30/32),检测新城疫的符合率为95.2%(20/21);采用mRT-PCR和病原分离法同时对35份进口禽产品、32份鸡粪拭子检测,2种方法检测禽流感的符合率为100%(67/67),对新城疫的符合率为97.1%(65/67)。病原分离法的检出率虽高于mRT-PCR,经统计学分析,两者差异不显著。     

鸡病毒性关节炎琼脂扩散抗原制备方法的比较及应用

将呼肠孤病毒U.Conn.S1133株接种鸡胚和鸡胚成纤维细胞,采用PEG6000浓缩鸡胚尿囊液,饱和硫酸铵沉淀尿囊液和细胞上清液三种方法,制备的抗原均具有良好的特异性和敏感性,适于鸡只个体或鸡群检查。三种抗原在检出率上虽无差异,但细胞上清液制备的抗原在效价、沉淀线的清晰度方面优于其它两种抗原。用琼脂扩散试验对免疫后3周、11周、31周的祖代鸡进行抗体检测,检出率分别为100%、95%、90%,抗体效价最高达1:64。进口种鸡177份血样的检出率为49.2%。调查上海地区12个鸡群,阳性群9个,污染率在3.4%—53.7%。表明上海地区有本病污染。     

猪生殖道及呼吸道综合症

本文旨在提供有关猪生殖道和呼吸道综合症方面的综合资料。材料引自1991年11月1日召开的英国兽医协会托拉斯专题讨论会的会议记录。1987年美国首次报道了猪生殖道及呼吸道综合症(PRRS)或猪蓝耳病,随后相继蔓延到加拿大及欧共体各国。在英国本病大多发生于集约化猪场。病原学现已查明本病最可能的病原是荷兰中央兽医研究所分离的莱利斯塔德病毒(Lelystad virus)。大多数康复的母猪含有这种病毒抗体。实验证明给母猪滴鼻可复制本病症状。本病毒是一种有囊膜的RNA病毒,属于对脂溶剂敏感的动脉病毒群。病毒只能用猪肺泡巨噬细胞培养。据报道,美国正在使用一种新的更为稳定的培养系统。     

猪生殖道呼吸道综合征

猪生殖道呼吸道综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome—PRRS)是由病毒引起的猪的一种高度接触性传染病。主要表现为:不同年龄猪厌食、发热,怀孕母猪流产、死产、产木乃伊胎、弱仔,伴有呼吸道症状,有的猪耳尖等末梢部位发绀。八十年代初美国Hzay首先报道本病。因对本病的认识不多,病名仍未统一。美国、加拿大称“猪神秘病”(mystery swine disease)、“神秘繁殖综合征”(mysterious reproductive syndrome)、“猪不育     

猪圆环病毒2型的分离与鉴定

以PCR方法,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征(PMWS)自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出预期长度的猪圆环病毒2型(PCV 2)的DNA片段,测序PCR产物,并对部分序列进行了同源性分析。结果显示,扩增产物与标准毒株的序列同源性均在98%左右,说明扩增产物具有良好的特异性,由此表明分离出的病毒为猪圆环病毒2型。对沪、苏、鲁、浙等地5个猪场进行检测,证实了猪圆环病毒2型的存在。     

猪圆环病毒2型组织培养特性研究

将经鉴定为PCV2阳性无菌处理的组织样品匀浆液接种到无PCV污染的PK15细胞中传代,PCV2病毒组织培养特性是添加D-氨基葡萄糖可有效地促进PCV2病毒的增殖复制,但病毒致细胞不产生病变,不能直接观察。应用PCR方法检测组织细胞培养物中的病毒增殖和增殖滴度,测定了PCV2病毒收获时间,试验表明PCV2病毒在PK15组织培养可连续传代,增殖病毒。