犬源牛犬细小病毒和犬圆环病毒二联PCR检测方法的建立及应用

本研究旨在建立可同时检测犬源牛犬细小病毒(CBoV)和犬圆环病毒(CCV)的二联PCR检测方法,并对两种病毒病当前的流行情况进行监测和调查.分别将已发表的CBoV和CCV基因组序列进行同源性比对,选择高同源区段,应用Primer Primier 5计算机软件设计并合成了2对特异性扩增引物,目的片段大小分别为170 bp...     

丹麦的水貂养殖业现状

通过对丹麦水貂养殖业的历史、规模与经济效益以及饲养管理、繁殖、销售、人员培训和动物福利等进行阐述,指出了其目前存在的主要问题,并对未来的发展方向进行了展望。     

吊蔓栽培对保护地西葫芦产量产值的影响

利用西葫芦具有蔓性的特性，采取吊蔓栽培，单株坐果率提高，增加单株产量；定植密度加大，群体增产；株体受光均匀，商品性好；通风透光，降低发病指数。     

检测水貂肠道呼肠孤病毒的血凝—血凝抑制试验

水貂流行性腹泻又叫水貂流行性卡他性胃肠炎(ECG),主要是由冠状病毒和呼肠孤病毒协同引起的.由于本病病原复杂,确诊时须对各种病原逐一进行检测.用于检测本病冠状病毒的特异性方法已见报道,本研究建立了检测呼肠孤病毒的血凝—血凝抑制试验.     

水貂肠道冠状病毒的分离鉴定

通过试验,筛选出对水貂肠道冠状病毒敏感的貂肺传代细胞系(ML),经胰酶处理后,从6份病貂粪样中分离获得2株冠状病毒.培养时所用的犊牛血清也作了一定处理.该病毒粒子经电镜观察,多呈不规整的圆形,直径80～160nm,有囊膜,外周有花瓣样突起,经鉴定为RNA病毒.对乙醚敏感.37℃12h可失去感染性.该病毒在pH3条件下室温3h仍保持一定活力.该病毒接种健貂可引起部分貂出现轻度腹泻.     

从流行性长他性胃肠炎病貂粪便中发现类冠状病毒粒子

<正> 作者对多次暴发于美国的水貂流行性卡他性胃肠炎(ECG)进行了研究,在病貂肠内容物中,用负性相差电子显微镜发现有类冠状病毒粒子。总的说来,该病多发生在4个月龄及其以上的水貂,患貂食欲缺乏,呈现粘液性腹泻,病程2～6天或更长,死亡率低于5％,但如果混合感染阿留申病及细菌感染,死亡率则会增加。本病发生似乎有基因型的特异性,因为黑色水貂最流行。     

水貂生长激素cDNA的克隆与序列分析

从水貂脑垂体中分离提取总RNA，经过RT—PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA。PCR产物经凝胶回收纯化，克隆到栽体pGEM—T，然后转化感受态细胞DH5α。在含X—gal、IPTG的LB(Amp^ )平板上筛选阳性克隆，提取质粒作限制性酶切鉴定后，对目的片段进行测序。结果表明，RT—PCR扩增出的2个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp，用DNAsis2．5软件进行分析表明，此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA100％相同。前体肽编码区由651bp组成，编码216个氨基酸，包括长度为29个氨基酸的信号肽；成熟肽的开放阅读框全长564bp，编码187个氨基酸，分子量约为21kDa。通过Blast比对，分析了与人、马、牛、猪、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠生长激素核苷酸序列的同源性。     

抗菌肽Shiva-1基因的人工合成与克隆

参照抗菌肽Ｓｈｉｖａ－１的氮基酸序列，兼顾鱼类、昆虫和大肠杆菌偏爱的密码子，设计了Ｓｈｉｖａ－１基因序列，加上适宜基因工程操作的酶切位点，人工合成了２条分别为９２ｂｐ和９１ｂｐ的寡聚核苷酸片段。经互补链延伸反应、ＥｃｏＲＩ酶切，将完整的Ｓｈｉｖａ－１基因反向克隆至ｐＵＣ１８载体，经ＰＣＲ检测和序列分析证明，已正确克隆了抗菌肽Ｓｈｉｖａ－１基因。