刺参“参优1号”苗种在不同pH条件下的代谢特征和适应性研究

为研究刺参(Apostichopus japonicus)“参优1号”苗种的适宜pH及耐受范围并解析其对水体的酸碱性适应机制，本研究测定了pH 6.5~10.0条件下该良种苗种的生长、存活、呼吸代谢以及非特异性免疫酶活性的差异。结果显示，在pH 6.5~9.5范围内，30 d实验周期内苗种的存活率均为100%，而在pH 10.0条件下苗种全部死亡。在pH 7.5~8.5范围内，苗种特定生长率(SGR)为正值，且在pH为8.0时SGR最高，达到0.541%/d，而在pH低于7.0和高于9.0时，SGR为负值，苗种为负生长。对不同pH条件下的耗氧率(RO)和排氨率(RN)的测定结果显示，随pH的变化，RO和RN均呈现以pH 8.0为波谷的“V”型变化，在pH 8.0条件下的RO和RN分别为19.07和1.34 μg/(g·h)。不同pH实验组刺参苗种的氧氮比(O/N)均在11左右，O/N随pH变化无显著差异(P>0.05)。pH的升高和降低会引起刺参体腔液中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶的活性显著升高(P<0.05)，在苗种适应pH胁迫过程中，各pH组超氧化物歧化酶活性的峰值一般在第0天出现，而溶菌酶的活性峰值在第10天出现。研究表明，刺参“参优1号”可存活的pH范围为6.5~9.5，适宜生长的pH范围为7.5~8.5，pH变化会导致苗种呼吸代谢和免疫酶活性的改变。本研究结果将为刺参“参优1号”苗种的科学化推广提供依据。     

多重核酸检测技术在动物疫病诊断和食品安全监测领域的研究进展

核酸检测技术是目前动物疫病诊断和食品安全监测的重要手段。多重核酸检测技术可同时检测多种病原,具有通量高、损耗低的优势,在疫病诊断和食品安全监测等领域的应用越来越广泛。目前已研发出多种多重核酸检测技术,包括聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)多病原核酸检测技术、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)多病原核酸检测技术、生物芯片多病原核酸检测技术、高通量测序多病原核酸检测技术等。由于检测原理不同,不同方法之间的检测性能存在较大差异。本文通过概述基于PCR/RT-PCR、LAMP/RT-LAMP、生物芯片、高通量测序建立的多重核酸检测技术,全面分析其在动物疫病诊断和食品安全监测领域中的特点和具体应用策略,以期推进病原检测技术的创新和发展,为动物疫病诊断及食品安全监测提供技术支持。     

添加外源益生菌对大菱鲆育苗生物饵料菌群结构的影响

为评价在大菱鲆育苗生产中添加外源益生菌对生物饵料轮虫和卤虫微生物菌群结构的影响,运用基于illumina HiSeq平台的高通量测序技术对添加益生菌和按照生产流程正常强化的轮虫、卤虫进行了菌群结构的分析和对比。添加外源益生菌的实验组轮虫和卤虫中的菌群物种多样性均明显高于对照组。在轮虫强化过程中,不同时期的对照组样品中菌群结构差异较明显,优势细菌种类变化较大。而添加外源益生菌后的各时期实验组轮虫菌群结构很相似,优势菌群的种类更为丰富,Lactococcus sp.、Pseudoalteromonas sp.和Alteromonas sp.等一直是各实验组中的优势细菌。在卤虫强化过程中,各对照组样品的菌群结构高度相似,优势细菌Cobetia sp.的相对丰度高达54%~65.2%。而在添加益生菌后,各实验组中的菌群结构仍高度相似,但Cobetia sp.的比例下降至4.3%~25.3%,最优势的细菌为Pseudoalteromonas sp.和Alteromonas sp.等几种,菌群结构中的物种均匀度更好。研究表明,在轮虫和卤虫强化过程中添加外源益生菌,能够改变生物饵料的菌群结构,使生物饵料中的细菌种类均匀度更好,并使菌群结构趋于稳定。     

刺参池塘养殖系统中1株副干酪乳杆菌的分离及其生物学特性研究

本研究利用MRS培养基，从山东东营刺参(Apostichopus japonicus)养殖池塘环境中分离到56株乳酸菌。以刺参腐皮综合征2种重要致病菌灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为指示菌，采用牛津杯法测定所分离的乳酸菌对2株致病菌的抑制效果，筛选出1株具有较强抑菌活性的乳酸菌CSND-6，并对该细菌的形态、胞内产物和胞外产物的抑菌活性、生理生化实验、16S rDNA序列分析、菌株生长特性及对刺参安全性进行了研究。结果显示，菌株CSND-6对灿烂弧菌和假交替单胞菌的生长具有较好的抑制作用。其中，胞内产物的抑菌圈分别为17、22 mm，胞外产物的抑菌圈分别为25、31 mm。该菌株对刺参的高浓度浸浴胁迫实验结果表明，所分离的菌株对刺参是安全的。通过生理生化和16S rDNA序列分析表明，CSND-6属于乳杆菌科(Lactobacillaceae)，与副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei JCM1171)的相似性为99.83%。菌株CSND-6在30℃~44℃、pH 为6~8范围内生长较快，24 h后进入对数生长期，28~32 h时达到生长高峰，最高值达2.10×109 CFU/ml。本研究筛选的副干酪乳杆菌属于刺参池塘养殖环境中土著益生菌，对刺参的主要病原菌抑制效果较好，并表现出了较好的生长特性，可为养殖池塘刺参疾病的生态防控和乳酸菌开发提供参考。