基于稻纵卷叶螟触角转录组的羧酸酯酶类气味降解基因CXE66鉴定及其表达谱

为了解稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis气味降解机制,利用稻纵卷叶螟基因组和触角转录组鉴定羧酸酯酶（carboxylesterase,CXE）基因,同时采用同源比对和系统发育进化树对其进行分类,进一步克隆获得稻纵卷叶螟CXE66的全长序列,并采用实时荧光定量PCR分析该基因在各组织中的表达情况。结果显示,共鉴定出触角特异性表达的45个CXE基因,其中新发现29个CXE,分属于CXE八个亚族。触角组织中高表达的CXE66基因开放阅读框长1 605 bp,编码534个氨基酸,且具有典型CXE结构特征,其在稻纵卷叶螟触角、头、胸、腹、足和翅中均有表达,且在触角中表达量最高。表明45个CXE基因可能参与稻纵卷叶螟的气味降解和性信息素降解、有毒物质代谢、蜕皮发育和神经发育等生理生化过程,其中CXE66可能参与酯类植物挥发物的降解。     

枸杞木虱各虫期对三唑磷的敏感性及其与羧酸酯酶活力关系的研究

用浸渍法和药膜法分别测定了枸杞木虱若虫和成虫对三唑磷的敏感性，并测定了枸杞木虱各虫期羧酸酯酶的活性及三唑磷对其羧酸酯酶的抑制率。枸杞木虱各虫期对三唑磷的LC50随着龄期的增加而增加，各龄期的羧酸酯酶活性也随着龄期的增加而增加。三唑磷对各虫期羧酸酯酶的抑制率除3龄以外，也随着龄期的增加而增加，3龄期的抑制中浓度IC50较其他虫期为高。枸杞木虱羧酸酯酶活性越高，对农药的敏感性越低。     

杀虫剂处理对甜菜夜蛾幼虫体内酶活性的影响

研究了乙酰甲胺膦、毒丝本、快灵、氯氰菊酯和抑太保等几种常用杀虫剂对甜菜夜蛾幼虫体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响，并对不同龄期甜菜夜蛾幼虫酶活性差异进行比较。研究结果表明，用毒丝本(1000mg／L)、乙酰甲胺磷(3000mg／L)、快灵(1200mg／L)、抑太保(50mg／L)、氯氰菊酯(1000mg／L)浸渍处理的菜叶饲喂甜菜夜蛾2龄幼虫后，幼虫体内的羧酸酯酶活性均受到不同程度的明显抑制，抑制率分别为94．69％、93．12％、71．90％、60．56％和61．83％；不同药剂处理对乙酰胆碱酯酶活性的影响存在较大的差异，毒丝本、乙酰甲胺膦和快灵对甜菜夜蛾幼虫体内乙酰胆碱酯酶活性抑制率分别为84．37％、81．30％和71．19％，显著高于抑太保和氯氰菊酯的抑制率(分别为21．79％和25．46％)。甜菜夜蛾幼虫随着龄期的增大，羧酸酯酶酶比活力逐渐增大，但乙酰胆碱酯酶酶比活力的差异不明显。     

马铃薯桃蚜对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性及其体内羧酸酯酶活性研究

为明确内蒙古马铃薯主要种植区马铃薯桃蚜的抗药性水平及抗性形成机制,采用室内生物测定方法,检测了内蒙古呼和浩特市及呼和浩特武川县马铃薯桃蚜田间种群(分别简称为呼市种群和武川种群)和室内饲养未接触任何药剂的马铃薯桃蚜敏感种群对7种拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性,并对供试各种群桃蚜的羧酸酯酶(CarE)活性进行了研究。结果表明:相对于敏感种群,呼市种群和武川种群对氯氰菊酯均产生了高水平抗性(抗性倍数为74.11和549.4);呼市种群对联苯菊酯产生了中等水平抗性(16.03倍),对氰戊菊酯、高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯仍保持敏感(1.00~4.00倍);武川种群对溴氰菊酯(10.14倍)、甲氰菊酯(26.46倍)和联苯菊酯(33.74倍)处于中等抗性水平,对高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和高效氯氟氰菊酯仍较为敏感(50值分别为0.54、1.07和0.93 nmol/L。三唑磷分别与高效氯氰菊酯和溴氰菊酯联用可显著增强其毒力,表明三唑磷与这两种拟除虫菊酯类药剂复配在武川和呼市马铃薯桃蚜防治中具有很好的应用潜力。     

抗联苯菊酯枸杞蚜虫羧酸酯酶活性及4种常用杀虫剂对酶的抑制作用

采用玻璃管药膜法,测定了联苯菊酯对中国内蒙古地区枸杞蚜虫的毒力,同时研究了不同抗性水平枸杞蚜虫羧酸酯酶（CarE）的活性,比较了敏感种群Ⅰ和高抗性种群Ⅴ的Km和Vmax值,以及毒死蜱、三唑磷、灭多威及氧乐果4种常用杀虫剂对联苯菊酯不同抗性水平枸杞蚜虫CarE的抑制作用。结果表明:与实验室饲养的敏感种群Ⅰ（LC50值为0.057 mg/L）相比,不同地区枸杞蚜虫对联苯菊酯均产生了一定程度的抗性,其中种群Ⅴ的LC50值为4.344 mg/L,抗性倍数达76.2,已达到高抗性水平。随着对联苯菊酯抗性水平的提高,枸杞蚜虫CarE的比活力逐渐增大,高抗性种群Ⅴ的比活力[0.533 μmol/（min·mg）]是敏感种群Ⅰ[0.287 μmol/（min·mg）]的1.9倍。进一步比较敏感种群Ⅰ和高抗性种群Ⅴ的Km和Vmax值,发现Km值几乎无变化,但高抗种群Ⅴ的Vmax值是敏感种群Ⅰ的2.08倍。4种杀虫剂对不同抗性水平枸杞蚜虫CarE的抑制作用不同,但均随着试虫抗性水平的升高,抑制中浓度（I50）值增大。表明羧酸酯酶在枸杞蚜虫对联苯菊酯的抗性中具有重要作用。     

Bt棉对棉叶螨发生的影响及与次生代谢物质的关系

 为明确Bt棉对棉叶螨发生的影响及其与棉株次生代谢物质的关系,以4个Bt棉品种为材料,以不携带Bt基因的常规棉为对照,在大田和温室中调查了棉叶螨的发生趋势,室内观察了棉叶螨的发育历期,测定了不同品种棉花叶片的棉酚和单宁含量,以及取食不同棉花品种的棉叶螨羧酸酯酶的比活力。结果表明,棉叶螨在4个Bt棉品种上的发生显著重于非Bt棉中棉所12,取食4个Bt棉品种的棉叶螨发育历期均明显短于取食中棉所12的棉叶螨的发育历期。4个抗虫棉品种间棉酚和单宁含量虽有差异,但均显著低于中棉所12,而取食中棉所12的棉叶螨的羧酸酯酶比活力也显著低于4个Bt棉品种。Bt棉本身次生代谢物质含量的改变可能影响了棉叶螨的发生。     

Genomics-based approaches to screening carboxylesterase-like genes potentially involved in malathion resistance in oriental migratory locust (Locusta migratoria manilensis)

BACKGROUND: Previous studies have indicated that increased caboxylesterase (CarE) activity is a major mechanism of malathion resistance in field populations of the oriental migratory locust, Locusta migratoria manilensis (Meyen), in China. The aim of the present study was to screen CarE‐like genes from a large locust expressed sequence tag (EST) database and to assess their potential roles in malathion resistance. RESULTS: Twenty‐five ESTs derived from different CarE‐like genes in the locust EST database were identified, and 12 candidate genes with significantly increased expressions, ranging from 2.6‐ to 11.6‐fold in a field‐derived resistant (FR) colony of the locust, were found. These candidate genes were constitutively expressed in all nymph and adult stages, and most of them were predominantly expressed in the gastric caeca and the midgut. Among the 12 genes, two representative genes (LmCarE9 and LmCarE25) were chosen for RNAi followed by malathion bioassay. The nymph mortalities increased from 34.3 to 65.2 and 54.2% respectively after LmCarE9 and LmcarE25 were silenced. These results indicated significant roles of these CarE‐like genes in conferring malathion resistance in the locust. CONCLUSION: Multiple CarE‐like genes were involved in malathion resistance in the locust. As validated by RNAi followed by malathion bioassay, LmCarE9 and LmcarE25 played a significant role in conferring malathion resistance. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

气调对3种储粮害虫超氧物歧化酶和羧酸酯酶活性的影响

对４种浓度的ＣＯ２和Ｏ２组配气体筛选１１代的杂拟谷盗，玉米象和谷蠹成虫，测定其超氧物歧化酶和羧酯酶活性。结果表明，玉米象和谷蠹成虫，测定其超氧物歧化酶和羧酸酶活性。结果表明，玉米象和谷蠹两种酶的活性比对照都有提高，说明两种仓虫抗气性形成与这两种酶活性的提高有关。杂拟谷盗两种酶的活性都有所降低，说明该种仓虫可能存在其他增强抗性的机制。低氧对两种酶活性的影响较大。