适合山杏AFLP分析的DNA提取方法研究

以山杏幼叶为材料,比较了4种DNA提取方法。结果表明,处理为100mmol/LTris2HCl（pH8.0）、20mmol/LEDTA（pH8.0）、1.4mmol/LNaCl、2%CTA、10mmol/LNa2S2O5、2%β-巯基乙醇、1%PVP-40、1%Vc的CTAB4方法提取的基因组总DNA质量较高,DNA溶液无色透明,紫外分光光度计测得OD260/OD280为1.8～2.0,无降解现象,RNA去除干净,经AFLP分析条带清晰,多态性好,说明此法提取的DNA能够适应AFLP分析的要求。     

山杏RAPD反应体系条件的优化

以山杏新鲜叶片为材料,研究了山杏RAPD分析过程中的影响因素,包括Taq酶、Mg2+、dNTP、引物、模板DNA浓度、变性时间、循环次数等,建立了适合山杏RAPD反应的PCR体系,即20μL反应体系中含有Taq酶1.0U、Mg2+ 2.0mM,四种dNTP各0.1mM,引物0.5μM,模板DNA50ng。扩增程序为：94℃预变性4mins;94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸1.5mins,10个循环;94℃变性30s,36℃退火40s,72℃延伸60s,30个循环;最后72℃延伸5min     

上海地区桃果实腐烂病原菌分离及鉴定

为明确引起上海地区桃果实腐烂的病原菌种类,于2019年6—7月在奉贤区、浦东新区和金山区等上海桃产区采集桃烂果,进行组织分离、培养,并对病原菌进行形态学分析、柯赫氏法则验证及分子鉴定。结果表明:上海地区引起桃烂果的病原菌有5种,分别是美澳型核果褐腐病菌(Monilinia fructicola)、层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)、白地霉(Galactomyces candidum)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)和灰霉菌(Botrytis cinerea),其中M.fructicola的分离率为75.00%,其次是F.proliferatum(8.33%)和G.candidum(8.33%)。本研究对上海地区桃采前及采后腐烂病害的综合防治具有一定指导意义。     

干旱胁迫下不同中间砧对苹果苗生理特性及MdPIP1-1基因表达的影响

为探讨不同中间砧对‘天红2号’红富士苹果苗抗旱性的影响，以2 a生‘天红2号/黄6/平邑甜茶’、‘天红2号/SH40/平邑甜茶’、‘天红2号/GM256/平邑甜茶’盆栽苗为试材，研究了干旱胁迫下不同中间砧对苹果苗旱害指数、相关生理指标及水通道蛋白基因MdPIP1-1相对表达量的影响。结果表明，随着干旱胁迫时间延长，土壤含水量降低，3种中间砧苗旱害指数、O^-₂产生速率升高，F_v/F_m值降低，SOD、POD活性呈现先升高再降低的趋势，但3个砧穗组合各指标的变化幅度不同。干旱9 d时3个砧穗组合以‘天红2号/GM256/平邑甜茶’的旱害指数最高，为91.67%，其F_v/F_m值与正常供水相比显著下降11.47%；‘天红2号/黄6/平邑甜茶’旱害指数仅为29.55%，F_v/F_m值下降幅度最小。干旱胁迫期间，3种中间砧苗的MdPIP1-1基因表达量均呈现先升高再降低的趋势，黄6中间砧苗的表达量峰值出现在第7 d，GM256和SH40中间砧苗出现在第5 d。综合认为，3个砧穗组合抗旱性强弱依次为‘天红2号/黄6/平邑甜茶’＞‘天红2号/SH40/平邑甜茶’＞‘天红2号/ GM256/平邑甜茶’。     

不同树形对燕红桃树体冠层光照分布及生长结果的影响

以Y字形、三主枝形、四挺身形3种树形燕红桃树为试材，研究了不同树形对树体冠层光照分布、树体结构指标、果实品质及产量情况的影响。结果表明，3种树形的相对光照强度均随树体高度的增加而升高，四挺身形树形冠内相对光照强度在20%以上。3种树形中上部果实产量较高，且果实品质优于中下部，其中四挺身形树形果实品质降低幅度较小。综合分析认为，四挺身形上下限树体健壮，光照分布均匀，果实品质较优，可作为适宜树形进行示范推广。     

不同肉质桃果实成熟过程中细胞壁相关酶活性变化

以软溶质型“霞晖5号”、硬溶质型“保佳红”、硬质型“保佳俊”、不溶质型“金童6号”桃果实为试材，采用果实细胞壁降解相关酶活性测定方法，研究了不同肉质桃果实成熟过程中硬度、呼吸强度、细胞壁降解相关酶活性及基因PG21、PME的表达差异对果实软化的影响，以期阐明不同肉质桃果实成熟过程中细胞壁相关酶活性变化差异。结果表明：软溶质型桃“霞晖5号”果胶甲基酯酶(PME)、纤维素酶(Cx)活性高于其它3种肉质类型的桃果实，多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性高于不溶质型桃“金童6号”和硬质型桃“保佳俊”,表明PG、PME、Cx活性与软溶质型桃“霞晖5号”软化进程密切相关。4种肉质类型的桃果实β-半乳糖苷酶(β-gal)活性差异不显著，表明β-gal不是影响不同肉质类型的桃软化进程的关键因素。4种不同肉质类型的桃果实在成熟发育后期PG21基因相对表达强度整体呈上升趋势，“霞晖5号”和“保佳俊”PME基因相对表达量在整个果实发育后期均呈上升的趋势，酶活性与相关基因表达量变化趋势基本一致。     

桃新品种保佳早蜜的选育

保佳早蜜是从深州蜜桃的实生群体中选育出的具有深州蜜桃香味的优质桃新品种。树姿开张，枝条节间短，萌芽率较高，成枝力较强，花粉量大，可育。果实平均单果重284.8 g，椭圆形，两侧较对称，果顶圆凸，缝合线中深；果实底色黄白色，着红色晕，果肉白色，近核处有红色素。保佳早蜜为硬溶质，黏核品种，风味浓甜，可溶性固形物含量14.4%。果实7月下旬成熟，常温下可贮藏5 d。     

外源褪黑素对养分胁迫下苹果砧木幼苗氮代谢相关酶活性及基因表达的影响

【目的】探究外源褪黑素对养分胁迫下苹果砧木幼苗内源褪黑素合成、氮代谢关键酶活性及氮代谢和氮转运相关基因表达的影响。【方法】水培试验材料为7～8片叶的平邑甜茶(Malus hupehensis Rehd.)幼苗。幼苗在1/2 Hoagland营养液中生长12天，然后分为两组，一组营养液中添加褪黑素(0.1μmol/L)，一组不添加作为对照。第15天时，两组幼苗的营养液浓度又分为1/2和1/20 Hoagland营养液两个养分水平，形成4个处理：1/2 Hoagland营养液(CK)、1/2 Hoagland营养液+0.1μmol/L褪黑素(MCK)、1/20 Hoagland营养液(ST)、1/20Hoagland营养液+0.1μmol/L褪黑素(MST)。第35天时(处理20天)，取平邑甜茶幼苗叶片和根系样品，测定褪黑素含量、氮代谢相关酶活性、褪黑素合成关键酶和氮转运代谢相关基因的相对表达量。【结果】与CK相比，养分胁迫(ST)上调了平邑甜茶幼苗叶片中褪黑素合成相关基因MdTDC、MdT5H、MdAANAT和MdASMT的表达，显著增加了内源褪黑素含量，降低了幼苗叶片及根中的硝酸还原酶...     

‘仓方早生’桃及其早熟芽变不同发育时期果实的转录组分析

【目的】通过对桃品种‘仓方早生’及其早熟芽变不同发育时期的果实进行转录组分析，挖掘参与调控桃果实成熟的关键因子，为深入研究桃果实成熟调控机理提供理论依据。【方法】以桃品种‘仓方早生’及其早熟芽变为试材，每个品种分别选择长势一致的样品树5株，分别于花后30 d（对应‘仓方早生’c1、早熟芽变y1）、45 d（对应c2、y2）、59 d（对应c3、y3）、71 d（对应c4、y4）及89 d（对应c5）对不同发育时期的桃去皮果肉进行取样和转录组测序，并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对筛选的差异表达基因进行定量验证；利用GO和KEGG对‘仓方早生’及其早熟芽变的差异表达基因进行分析；基于差异表达基因构建加权基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis,WGCNA），从中鉴定出与果实成熟密切相关的枢纽模块和枢纽基因。【结果】将处于果实相同发育时期的转录组数据进行比较，得到y1与c1、y2与c2、y3与c4和y4与c5四组对比数据，共筛选出差异表达基因4 395个，其中上调表达基因2 212个，下调表达基因2 183个。其...