果树原生质体培养及细胞融合的研究进展

本文综述了近年来世界各国果树原生质体培养和细胞融合的研究进展。指出以叶片、愈伤组织、悬浮细胞作为分离原生质体的材料较适宜。列举了分离原生质体的条件和已培养成完整植株的若干树种的培养步骤和条件,概述了原生质体的培养方法及关系到培养能否成功的一些因素。最后,介绍了引人注目的柑桔体细胞杂交和细胞质杂种的研究动态。     

枇杷属植物基因组DNA提取方法的改进及其应用

以枇杷属的普通枇杷和多种野生枇杷的叶片为材料,对枇杷的DNA提取进行了研究。针对枇杷富含多酚类 等次生物质的特点对枇杷DNA的提取步骤进行了改良处理:采用CTAB-蛋白酶K法加重复抽提,去除枇杷材料中 的相关次生物质,获得了高质量的DNA。所提取的DNA完全能满足PCR、RAPD、AFLP等一些分子生物学实验要 求。     

韧皮部特异启动子驱动密码子优化的抗菌肽D基因的植物表达载体构建

根据177个GenBank中登录的柑橘编码蛋白密码子用法的分析结果,优化并重新设计和合成了含柑橘偏爱密码子、对柑橘黄龙病有杀灭作用的柞蚕抗菌肽D基因(命名为CAPD),克隆入pUC19克隆载体并经测序验证后,获得了含新抗病基因的重组质粒pUC19-CAPD。用限制性内切酶BamHI和SacI双酶切pUC19-CAPD克隆载体和pBI121植物表达载体的质粒DNA,回收pUC19-CAPD克隆载体中的CAPD基因小片段和pBI121植物表达载体中去掉GUS报告基因的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由CaMV35S组成型启动子(35SP)驱动CAPD目的基因的新植物表达载体(命名为pHZ05);用限制性内切酶BamHI和HindIII双酶切含笋瓜韧皮部特异启动子(PSP)的pUCm-PSP克隆载体和pHZ05植物表达载体的质粒DNA,分别回收pUCm-PSP克隆载体中的PSP小片段和pHZ05植物表达载体中去掉CAPD目的基因上游35SP的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由PSP驱动CAPD目的基因的新植物表达载体(命名为pHZ06)。利用细胞感受态法直接将2个由不同启动子驱动的含CAPD目的基因的新重组植物表达载体分别导入根癌农杆菌LBA4404、GV3101、EHA105和发根农杆菌Ri15834等4个农杆菌菌株中,为利用农杆菌介导的遗传转化技术培育抵抗由韧皮部传导的毁灭性和检疫性病害柑橘黄龙病的新种质奠定了基础。     

部分西班牙枇杷品种的引种表现

1西班牙和我国枇杷生产及品种的比较西班牙是20世纪90年代中后期崛起的枇杷生产大国,据2006年4月第二届国际枇杷会议统计,其栽培面积为3 023 hm2,年产量4·33万t;超过日本的2 050 hm2和0·924万t,位居世界第二[1-4]。据最新资料统计,我国2005年总面积为11·827万hm2,总产量为45·36万t,虽远远超过各国,但西班牙枇杷的单位面积产量及出口量仍居世界第一,分别为14·23 t·hm-2及总产量的50%。而3~5年前,其出口量为总产量的80%,随着近年来意大利和葡萄牙枇杷产量的提高,西班牙的出口量才有所下降[3]。西班牙现有枇杷品种近40个,其中近10个是20…     

5个黄皮品种实生苗倍性鉴定

酸解去壁及低渗处理后,对根尖细胞进行压片,对从城黄皮、岐山屈督黄皮、甜黄皮、鸡心黄皮和郁南无核黄皮等5个品种的实生苗进行倍性鉴定,结果显示,它们均为二倍体,2n=2x=18,未发现随体、多倍和混倍现象。     

杧果主要品种遗传多态性的AFLP标记研究

 采用扩增片段长度多态性AFLP标记对国内外31个杧果主要品种进行分类与亲缘关系研究。结果表明: 筛选出的14对引物组合在31份杧果种质中共扩增出了1 761条带, 其中多态性带的比例为97%。平均每对引物产生125.8条带和121.6条多态性带, 总的多态性带率为97%; 基于AFLP标记, 以0.48的相似系数为阈值, 所有供试　果材料被分为7大组群, 第一组群内以0.52为阈值, 又可分为6组。与形态标记相比, 基于AFLP标记的杧果分类体系更能反映杧果品种间的亲缘关系。     

粤引强德勒柚的引种选育及主要栽培技术

试验结果表明:粤引强德勒柚树形呈圆头型,树势强健,成枝力强,枝梢紧凑,与酸柚、红皮山桔嫁接表现亲和;果实大小适中,单果平均重1079.3 g,圆球形,果皮黄绿色,果肉绛红色,可溶性固形物含量10.50%,可滴定酸含量0.48%,维生素C含量0.48mg/mL,总糖7.99%,固酸比16.98,肉质脆嫩化渣、甜酸可口,单果平均种子数97粒。成熟期在8月中下旬,特早熟,但耐贮藏较差。     

植物离体培养技术在果树育种研究上的应用

本文综述胚胎培养、花药培养、胚乳培养、原生质体培养及其融合,利用培养物获得突变体和超低温保存培养物等植物离体培养技术在果树育种研究上的应用进展,并讨论一些与上述内容有关的问题。     

枇杷胚胎发生的观察

采用石蜡切片法、超薄切片法和胚囊酶法分离技术。观察了“梅花霞”等枇杷品种的胚胎发生.枇杷柱头的中央有传递细胞,胚珠的外珠被细胞和内珠被细胞结构明显不同.胚囊属蓼型胚囊,胚囊内有典型的卵器。受精卵发育为原胚,经历球形、心形、鱼雷形期后,成为成熟胚,核型胚乳于心形胚时形成细胞壁,文中还就一些胚胎学问题作了简要的讨论.     

3个也门铁品种高效离体繁殖体系的建立

以3个也门铁(Dracaena fragrans)品种(金心也门铁、金边也门铁和普通也门铁)茎段为材料,研究了植物生长调节物质、基本培养种类、AgNO3、栽培基质等因素对其离体再生的影响.结果表明:茎段在MS 3.0 mg/L BA 0.3 mg/L IAA 2.0 mg/L AD上,腋芽萌发生长的同时也部分启动腋芽基部周围茎段组织的分化;在MS 3.0 mg/L BA 0.3 mg/L IAA上培养1代,每外植体平均分化出长1 mm以上的不定芽5～6个.不定芽在MS 1.0 mg/L BA 0.1 mg/L IAA 3.0 mg/L AgNO3上的增殖率在390%以上.将高度1.2 cm以上的不定芽转至MS 0.05 mg/L BA 0.05 mg/L IAA 1.0?上壮苗培养1代,芽的高度和粗度增加1.5倍以上,平均株高约3.5 cm.将高度3 cm以上的不定芽转入1/2MS 0.5mg/L IBA上诱导生根,最后将幼苗移至等质量的椰糠、泥炭土、珍珠岩上生长45 d,3个品种苗高分别在15,16,10 cm以上.由此建立的也门铁离体繁殖体系,通过2年多的生产实践检验,其启动率、不定芽分化率、生根率、移栽成活率均能稳定在98%以上.3个品种在启动、不定芽分化、增殖、生根、移栽等过程中表现出相似的规律,尤其以金心也门铁和普通也门铁比较接近,但金边也门铁分化率较高而苗生长势差.避免脱分化形成愈伤组织以及减少或阻止愈伤组织再分化是减少金心也门铁和金边也门铁这类嵌合体品种发生变异的关键之一.