山羊痘弱毒疫苗株TK基因的克隆及序列分析

以提取的山羊痘弱毒疫苗株HLJ—V9 DNA为模板，设计特异性引物并进行PCR扩增，获得了2078bp的DNA片段，并将PCR产物克隆至pGEM—T Easy载体。酶切鉴定、PCR鉴定和测序结果表明，成功获得了TK基因，获得的TK基因内存在一个Kpn Ⅰ酶切位点和编码区的早期转录终止信号TTTTTN（T）T。核苷酸和氨基酸同源性分析表明，弱毒疫苗毒株HLJ—V9 TK基因与参考毒株的同源性在95．5％～100％之间，说明羊痘病毒TK基因具有高度的保守性。     

益生素对广东麻鸡免疫器官指数和生理生化指标的影响

在鸡日粮中加入益生素进行对比饲养试验,试验分为5组。屠宰后测定以下几个指标:肌肉中的蛋白含量,游离脂肪酸含量,肝脏中脂肪酶活力以及免疫器官指数。结果表明,益生素对提高鸡免疫系统发育水平有显著的促进作用,胸腺指数、法氏囊指数差异显著,对肝脏脂肪酶活力和降低肌肉中游离脂肪酸的含量效果显著,而对肌肉的蛋白含量和脾脏指数差异不显著。     

江汉平原白蚁种类调查

白蚁是世界性的重要害虫,对堤坝、建筑物、铁道枕木、桥梁、电杆、车辆船舶、橡胶塑料、文书、织物、农作物和林木均可造成危害.白蚁广泛分布于世界各大洲(南极洲除外),其为害面积约占全球陆地总面积的50%.在我国,东起台湾,西达西藏东南部,南起南海诸岛,北至辽宁,除黑龙江、吉林、内蒙、宁夏、青海和新疆外,全国共26个省、市、自治区都有白蚁分布为害.江汉平原位于长江中游,属于亚热带季风气候.江汉平原城乡房屋建筑、江河堤防及水库堤坝、地下电缆均有不同程度受到白蚁的危害.1998年长江汛期,沿江多处险情均为白蚁危害造成.为了摸清江汉平原境内的白蚁种类,以便更有效地防治白蚁,首次对江汉平原的白蚁种类进行调查.     

“解放钟”枇杷盛果期优质丰产栽培的关键技术

１ 土、肥、水管理１．１　改土　深翻：成年园在采果后和秋季进行全国翻耕,疏松土层。翻耕深度约２０～４０ｃｍ,近树干处浅些,树冠滴水处深些。深翻结合施用有机肥。培客土：夏秋可防旱降温,冬季可保温防寒。客土可就地取材,选用肥土、火烧土以及经处理的垃圾土等,成年树每年株培 ２００～２５０ｋｇ,过多会影响根系生长。１．２　施肥　成年树施肥因树势、土壤肥力而定,１０～１５年生壮年树,一般每年施用氮１０～１３ｋｇ,磷７～１０ｋｇ,钾８～１３ｋｇ。成年结果树年施３～４次肥。花前肥：于吐蕾前施下,以有机肥为主,施…     

虎刺与虎刺梅的差别

虎刺和虎刺梅往往为一些花卉爱好者所混淆。事实上二者除名称近似外,从形态到亲缘关系都是毫不相干的两种植物,其差别十分明显。虎刺又名叶仙人掌,是为数不多的较原始地具有完整根、茎、叶器官的仙人掌植物。原产美洲。幼茎圆柱形,常绿或淡紫,近于藤本。叶互生,叶背淡紫,卵圆形(极似榕树叶),腋芽处着生数个不太明显的白色短软毛,并抽生一根直刺,两侧对生稍弯曲的短刺(约0.5厘米)。老茎不变态,姜黄色,不产生分枝的腋芽形成刺     

内蒙古自治区补充森林植物检疫对象信息数据

掌握了森林植物检疫对象和自治区补充森林植物检疫对象在全自治区的分布状况、以及它们的发生发展变化情况 ,就能为今后科学地制定森检对象的除治方案 ,设立检疫检查站、建立预测预报点和搞好森防工作 ,奠定良好的基础。同时也能为自治区补充森林植物检疫对象的及时修订 ,提供科学的依据     

基于因子分析法的管道外腐蚀因素分析与评价

介绍了因子分析法的概念和数学模型,利用功效系数法对指标数据进行了无量纲化处理;根据KMO统计量和Bartlett球型检验结果,判断样本数据基本适合进行因子分析;利用主成分分析法和SPSS13.0统计分析软件确定了公共因子数和公共因子载荷数。利用因子分析法对某油田埋地集输管道沿线8个管段土壤样本的理化性质检测数据进行了分析,将6个理化性质检测变量综合成2个公共因子。对该管道腐蚀影响程度较强的土壤电化学性质因素依次是氧化还原电位、氯离子含量、硫酸根离子含量和pH值,而对该管道腐蚀影响程度次之的土壤物理性质因素依次是土壤电阻率和含水量。     

含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建

采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMD18-T载体,分别得到重组载体pUC119-P1-2A和pMD18-T-3C;将重组载体pUC119-P1-2A用HindⅢ、BamHⅠ酶切,重组载体pMD18-T-3C用BamHⅠ、NheⅠ酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamHⅠ酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMD18-T-P1-2A-3C.将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C.     

绵羊痘病毒RPO30基因的克隆及序列分析

选择羊痘病毒RNA聚合酶RPO30进行分析,为进行RNAi羊痘病毒研究,进行目的基因的初步筛选。PCR扩增RPO30基因,连入pMD18-T simple 载体并转化DH5a大肠杆菌。经蓝白斑筛选挑选白斑制备质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定。结果成功克隆了RPO30基因,克隆的SSPV RPO30基因ORF为585bp,编码193个氨基酸,阅读框内有一个HindIII酶切位点,测序结果与GenBank数据库中不同痘病毒毒株之间同源性存在着明显区别。进一步经过生物学软件分析表明RPO30蛋白质氨基酸4～12、18～26、50～61、68～92,176-190位之间区域形成活性中心的可能性较大,选择这些区域进行作用可能会造成该基因产物酶的失活,从而高效抑制病毒的复制。     

表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定(英文)

[Objective] This study was to develop a live vector vaccine of goat pox virus of Peste des petits ruminants(PPR). [Method] Using PCR amplification technique, PPR H gene was obtained, then ligated into pGEM-T easy vector; the recombinants were digested by Nhe Ⅰ and Hind Ⅲ, and ligated into pEGFP-N1-P7.5, yielding the recombinant vector pEGFP-N1-P7.5-H; next the expression cassette EGFP-N1-P7.5-H was first released from recombinant vector pEGFP-N1-P7.5-H by double digestion of Hind Ⅲ and Nhe Ⅰ and ligated into pUC119-TK that was digested by Kpn Ⅰ, yielding the transfer vector pUC119-TK-EGFP-P7.5-H. [Result] Identification and double enzyme digestion showed that the transfer vector pUC119-TK-EGFP-P7.5-H was correctly constructed. From the transfer vector transfected BHK-21 cells which infected GTPV AV41, specific fluorescence was observed at 48th h of transfection. [Conclusion] The construction of goat poxvirus live vector laid a foundation for the live vector vaccine of PPR vaccine.