细胞信号肽酶复合体亚基1与牛病毒性腹泻病毒复制的相关性分析

旨在探明信号肽酶复合体亚基1(signal peptidase complex subunit 1,SPCS1)影响牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制的作用。使用Benchling和CHOPCHOP等平台设计靶向SPCS1基因的sgRNA,克隆至慢病毒载体lentiCRISPR v2,连同包装质粒pSPAX2和pMD2.G转染至人胚肾细胞HEK-293T中,包装慢病毒并感染MDBK细胞,用嘌呤霉素筛选5代后获得敲低SPCS1蛋白后稳定表达的细胞,用Western blot检测SPCS1蛋白表达的情况;使用荧光定量PCR和免疫荧光分析检测BVDV感染SPCS1蛋白敲低细胞不同时间后5'非翻译区(untranslated region,UTR)mRNA的水平和双链RNA(double-stranded,dsRNA)积累,利用倒置显微镜观察BVDV致细胞病变(cytopathic effect,CPE)情况,根据Reed-Muench方法测定病毒滴度变化情况。结果：Western blot检测SPCS1蛋白表达量明显下降,成功构建SPCS1敲低(knockdown,KD)细胞;BVDV感染SPCS1 KD细胞后与对照Scramble相比,BVDV 5' UTR mRNA水平和dsRNA量均显著性降低(P < 0.01),CPE现象推迟并减弱,子代病毒滴度显著性下降(P < 0.01),最高降低95.8%。SPCS1敲低后显著性影响BVDV复制,为BVDV防控新技术的建立提供理论依据。     

汶川典型植物根-土复合体抗剪强度影响因素评价

为探究不同植物根-土复合体抗剪强度的差异性及各因素对其的影响程度,选取汶川县针叶林、阔叶林、灌丛、草地4种不同植被覆盖区为研究区,通过野外制取16种优势植物根-土复合体和无根裸土原状试样并开展室内快剪试验.分析了汶川县典型植物根系对土体抗剪强度和抗变形能力的增强作用,运用灰色关联法分析影响复合体抗剪强度的因素.结果 表...     

雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法的建立

为充分利用雪龙兼松屠宰场废弃的优秀母牛卵巢,加速雪龙黑牛培育进程,满足高档牛肉市场需求,本文对胚胎生产体外受精3个关键技术环节进行了试验研究,共做了15批次试验,包括卵母细胞体外成熟培养的试验研究,卵母细胞体外受精试验研究以及受精卵体外培养试验研究。结果显示,卵母细胞的成熟率达98.6%,卵裂率为86.5%,囊胚发育率为36.8%。初步建立了一整套雪龙黑牛试管胚胎产业化生产培养方法和技术。     

聚-γ-谷氨酸合成酶复合体A的原核表达及其多克隆抗体的制备

以pgsBCA质粒为模板对已知的pgsA进行PCR扩增,得到长度为1116bp的片段.将获得的PgsA基因连接到pQE-30表达载体,转化大肠埃希茵后用IPTG诱导其表达,经SDS-PAGE和WeSternblot分析,均可见约42 ku目的蛋白带.通过Ni-NTA agarose纯化,荻得较高纯度的重组蛋白,经基因定量仪测定其浓度可达1.5 mg/mL,以其免疫新西兰兔获得免疫血清,Western blot分析证实,该重组蛋白具有良好的反应原性,用间接ELISA检测抗体效价可高达1:12800.结果表明,成功获得了pgsA的多克隆抗体.     

华北土石山区白桦根系分布特征及力学性能研究

以华北土石山区常见乔木白桦根系为研究对象,采用全挖法,从根长、根径、土层深度等方面进行比较,利用Sketchup Pro 8软件建立根系的形态模型;并在实验室进行根系抗拉强度及根土复合体抗剪强度的试验。结果表明,白桦根系垂直分布范围集中在0～60 cm的土层中,对坡面浅层水土保持起着重要作用,用软件模拟出的根系形态较接近实际;根系抗拉力与直径成正比,抗拉强度随直径的增加而减小;白桦根系能明显增强土体的抗剪强度,且根系交叉方式不同,根土复合体的抗剪强度也不同。     

新疆巴州林草复合体及其利用

<正>巴音郭楞蒙古自治州(以下简称巴州),蒙古语音译为"富饶的流域"。地处新疆维吾尔自治区东南部,地域辽阔,资源丰富,历史悠久,交通便捷,旅游资源独特。目前已形成了石油、电力、矿业、建材、煤炭、食品加工为主的工业体系,棉花为主的农业体系,辣椒、西红柿为主的蔬菜体系,天然草原为主的畜牧业体系和香梨、红枣为主的林果业     

竹炭／TiO2复合体改性杨木单板的胶合性能

采用加压浸渍法将负载型光催化材料--竹炭/TiO2复合体渗入杨木单板中,运用正交试验方法对纳米TiO2改性杨木单板的胶合性能进行了研究,探讨涂胶量、热压压力与浸渍压力等因素对材料胶合性能的影响,并结合扫描电镜分析给出了制板的最佳工艺条件:热压压力为1.2 MPa,浸渍压力为1.6 MPa,涂胶量250 g/m2.     

鸡主要组织相容性复合体的研究进展

本文对鸡主要组织相容性复合体的结构,功能,以及其与抗病,生产性能方面的内容进行了综述,并提出了今后的研究展望。     

一商品猪SLA-Ⅰ分子复合体的体外构建

 【目的】研究中国北方杂交商品猪SLA-Ⅰ类分子结构特点，并为进一步的多肽结合等功能研究奠定基础，需要在体外构建正确折叠的SLA-I类分子复合体。【方法】以长白-达兰商品猪为研究材料，克隆SLA-2和β2m。然后采用剪接重叠延伸PCR（splicing overlap extention PCR, SOE PCR）法，将SLA-2的胞外区和β2m的成熟肽部分通过一富含甘氨酸/丝氨酸的Linker(G4S)3连接，形成SLA-2-Linker-β2m全长，并插入原核表达质粒pMAL-p2X，转化E.coli TB1，IPTG诱导表达。表达得到的融合蛋白分别经过Western-blot、纯化及Factor Xa切割，分离纯化单体蛋白。圆二色谱(circular dichroism spectrum, CD)测定蛋白的二级结构。【结果】SDS-PAGE和Western-blot均证实融合蛋白MBP-SLA-Ⅰ大小为84.1 kD。SLA-I单体蛋白大小为41.6 kD。圆二色谱分析单体蛋白和融合蛋白二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲的符合率分别达到了100%、90.6%、88.5%和96.9%。【结论】结果表明重构的SLA-I复合体具有正确的二级结构，可以用于体外多肽结合等研究。     

蚕蛹培育蛹虫草前期技术

<正>蛹虫草,又称北冬虫夏草、北虫草,是昆虫的蛹感染虫草菌后形成的虫与真菌复合体,与天然冬虫夏草有相似的医疗和保健功效。生产蚕蛹虫草只需塑料盒、虫草专用菌种(即专门驯化适合在蚕蛹体上良好生长的菌种)、少量虫草专用营养防污添加剂等即可。现将其主要生