线粒体分子标记技术在水产养殖行业的应用

分子标记技术的使用在分子层面上对水产动物进行深度剖析,推动了水产行业的发展和创新.对线粒体分子标记技术的种类、构造和它们在水产行业中各个方面的应用方式进行了综述,探讨了线粒体分子标记技术在起源演化、亲缘和亲权关系、遗传距离和遗传多样性等方面的研究,并比较了不同线粒体分子标记技术的区别,讨论了该分子标记技术在未来水产行业中的发展前景.     

家蚕线粒体基因组EcoRⅠ2.0kb片段的克降及序列分析

对家蚕线粒体基因组ＥｃｏＲⅠ２．０ｋｂ片段进行了克隆和序列分析，结果表明该片段包含完整的丝氨酸转移ＲＮＡ基因、ＮＡＤＨ氧化还原酶亚基Ⅰ基因、细胞色素氧化酶ｂ亚基基因的部分序列。与果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）的ｍｔＤＮＡ进行了同源性比较，并根据无脊椎动物线粒体基因组密码子表，推定氨基酸序列。     

采前套袋对黄肉桃货架期果皮超微结构的影响

【目的】探讨黄肉桃采后果皮衰老期间细胞器的变化规律和细胞水平的衰老特征及其与果实耐贮性的相关性,为鲜食黄桃品种的改良和贮运技术的研究提供一定的科学依据和实践指导。【方法】以耐贮性较强的‘沪454’和耐贮性略差‘锦绣’黄桃为试材,利用透射电镜观察货架期间2个黄桃品种果皮细胞壁、有色体、嗜饿颗粒和线粒体的超微结构及其变化规律。【结果】随着贮藏时间的延长和果实的衰老,黄桃果实果皮细胞壁变形,部分降解,结构松散,细胞间隙增大;果皮有色体中嗜饿颗粒数目增多,后期嗜饿颗粒数目减少但体积增大,有色体中片层类囊体膜结构瓦解、变形;嗜饿颗粒数目的增多和个体的增大与果实的耐贮性有密切相关;果皮线粒体结构变得模糊,线粒体变形、拉长,内基数目减少,结构解体出现空洞;果皮中线粒体的衰老进程迟于有色体;‘沪454’黄桃果皮有色体和线粒体较‘锦绣’黄桃稳定。【结论】2个品种黄桃果皮中细胞超微结构及其稳定性与果实耐贮性密切相关。果皮组织细胞的超微结构变化可导致组织细胞功能衰弱和丧失,加速果实的衰老。     

三疣梭子蟹分子生物学研究进展

三疣梭子蟹作为重要的海洋经济动物,在基础生物学方面有较为全面的研究和总结,但在分子生物学方面的研究还处于起步阶段,相关研究主要集中在同工酶谱分析、RAPD分子标记研究和线粒体基因组序列分析等方面.本文对三疣梭子蟹分子生物学,尤其是分子标记技术的应用研究取得的进展情况进行了阐述,探讨了三疣梭子蟹的研究发展方向,为今后更为系统地研究三疣梭子蟹提供理论依据.     

四种菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫线粒体膜流动性的影响

为明确菊酯类杀虫剂对昆虫线粒体膜流动性的影响，以1，6-二苯基-1，3，5-己三烯（1，6-diphenyl-1，3，5-hexatriene，DPH）为荧光探剂，采用荧光偏振法研究了4种菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫Aphis sp.线粒体膜流动性的影响。结果表明，4种菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫线粒体膜流动性均有显著影响，其荧光偏振度显著增大，线粒体膜流动性显著减小。当药剂浓度为100 μmol/L时，对照组枸杞蚜虫线粒体膜的荧光偏振度为0.239，高效氯氰菊酯的影响最大，线粒体膜的荧光偏振度为0.315，联苯菊酯的影响最小，线粒体膜的荧光偏振度为0.287。4种菊酯类杀虫剂对线粒体膜流动性的影响都存在一定的浓度效应，当药剂浓度在0~100 μmol/L范围内，浓度越大影响越大。4种菊酯类杀虫剂在不同温度下对枸杞蚜虫线粒体膜流动性的影响不同，高效氯氰菊酯、联苯菊酯和甲氰菊酯对线粒体膜流动性的影响基本不受温度影响，而氯菊酯在高温条件下产生的影响大，在低温条件下产生的影响小，表现为明显的正温度系数。表明DPH可以作为荧光探剂研究枸杞蚜虫线粒体膜的流动性。     

应用PCR技术检测禽类源性成分

据禽类(鸽子、鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸵鸟、鹧鸪)线粒体DNA 12sRNA基因中的保守序列,用Primer5.0设计针对禽类动物的特异性扩增引物。通过聚合酶链式反应从禽类样品中得到大约200bp的特异条带,而参考物种牛、羊、马、驴、鱼和空白对照则无此条带,说明该引物只对禽类有特异性,能将禽类与牛、羊、马、驴、鱼区分开来。通过测序对扩增产物进行验证,结果表明:禽类组织的PCR产物序列与基因库中检索到的相应序列相吻合。建立了一种检测禽类动物源性成分的PCR方法,该方法检测的灵敏度为0.1%。     

不同地区牦牛心肌、骨骼肌CCO、SDH活性测定

为了进一步从细胞分子水平探讨牦牛高原低氧适应的生物学机制以及为高原疾病的诊疗提供理论依据,试验采用酶联免疫法测定了青海省玛多县、泽库县牦牛的心肌、骨骼肌组织及其线粒体中细胞色素氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果表明:玛多牦牛心肌、骨骼肌线粒体中SDH活性均高于泽库牦牛,玛多、泽库牦牛骨骼肌线粒体中SDH活性差异显著(P<0.05),泽库牦牛心肌、骨骼肌组织SDH活性均高于其线粒体中SDH的活性,且差异极显著(P<0.01);玛多、泽库牦牛心肌、骨骼肌线粒体中CCO活性差异不显著(P>0.05),泽库心肌、骨骼肌组织中CCO活性显著或极显著高于线粒体中CCO的活性(P<0.05或P<0.01)。在高原低氧环境下,随着海拔的升高,牦牛心肌、骨骼肌组织及其线粒体中SDH活性增强,而CCO有氧代谢保持相对稳定的水平,表明牦牛对高原低氧环境具有显著的适应性。     

黄鳝线粒体DNA的提取及其酶切分析

用碱裂解法从黄鳝肝脏组织中提取线粒体DNA,并对提取的线粒体DNA纯度、完整性进行了检测.结果表明,其紫外吸收比值为OD26/280在1.72～1.96之间,纯度较高,琼脂糖凝胶电泳表明提取线粒体的完整性好;用EcoR Ⅰ和HindⅢ对黄鳝线粒体DNA进行酶切,用琼脂糖凝胶电泳检测,均能检测出两套不同的酶切片段,证明黄鳝线粒体DNA存在多态性.     

乌骨鸡、珍珠鸡及其杂交后代线粒体DNA序列分析

骡鸡是乌骨鸡和珍珠鸡直接杂交的后代 ,但在遗传学上仍没有被证实。本实验分析了骡鸡、珍珠鸡和乌骨鸡共 5 9个个体的mtDNAD环部分序列 ,发现在同一对引物扩增时存在长度变异 ,乌骨鸡序列为 5 39bp ,珍珠鸡为4 98bp ,而骡鸡或同于珍珠鸡 ,或同于乌骨鸡。序列分析进一步支持骡鸡是乌骨鸡和珍珠鸡的远缘杂交后代