乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备

为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BamHⅠ与XhoⅠ之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒。该表住融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB／c小鼠,按常规方法进行细胞融合。以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选。结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定。经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为κ链。结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体。     

传染性喉气管炎病毒WG株Us区基因结构分析

根据GenBank中的传染性喉气管炎病毒(ILTV)全序列(NCBT登录号:NC-006623).利用Oligo6.2分析序列并设计6对引物,以ILTV WG株基因组DNA为模板,PCR扩增了长度为13.1 kb的区域,得到了完整的WG株的Us区序列,初步鉴定了WG株的Us区基因结构.将WG株的Us区序列分别与ILTV USDA株、BHV-1、CeHV-1、EHV-1、HSV-1、HSV-2、MDV、PrV、HvT、VZV相比较,ILTV WG株与USDA株同源性为99.2%,而与其他疱疹病毒之间的同源性较低,而且Us区大小也不一致;与已发表的ILTV USDA株Us区基因序列分别比较后发现,两者之间差异较大的基因分别为gJ基因和gD基因.其中,gJ基因在第1983个碱基处比USDA株多出30 bp,DNAStar预测这30 bp可能形成一个独立的抗原表位;gD基因的长度在不同的ILTV毒株之间差别较大,与其他疱疹病毒具有相似的结构特征.     

鸡传染性喉气管炎研究进展

鸡传染性喉气管炎(ILT)是一种由α-疱疹病毒,即鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的急性上呼吸道传染病.     

爆发高致病禽流感疫区的自主活动鸟类 禽流感及新城疫的血清学调查与分析

应用血凝抑制试验（HI），时采自健康的鹰、鸽子、野鸭和鹌鹑中的54份血清血清学检测，分析结果显示。在总共采集的54份血清样品中，抗新城疫病毒（NDV）抗体流行血清型（seroprevalence）与抗H6亚型禽流感病毒（H6）抗体、抗H9亚型禽流感病毒（H9）、抗H5亚型禽流感病毒（H5）抗体阳性率分别为64．8％、75．9％、29．6％。而根据血凝抑制试验检测结果发现。H5亚型禽流感病毒抗体滴度较低，最高位为320，其阳性率为29．6％，推断其可能为新近传入的病毒或新近重组变异出现的新病毒，可能为与该次流感爆发相关的新病毒，这一推断还有待于通过对病毒基因序列的分析而做进一步验证；新城疫病毒在该生态系中的稳定循环．构成了对家禽潜在的威胁，我国目前非典型新城疫的一个主要原因是带毒鸟类的传入。     

伪狂犬病弱毒疫苗与野毒株PCR鉴别诊断方法的建立

目前，在国内用于预防猪伪狂犬病的疫苗主要是基因缺失的弱毒（Ｂａｒｔｈａ－Ｋ６１）为了有效地地区弱毒免疫猪和野毒感染猪，本实验分别建立了一种通用和一种鉴别ＰＣＲ诊断方法，根据已发表的伪狂犬病病毒（ＰｒＶ）ｇＢ，ｇＥ基因的序列，设计并合成了两对引物：ＰＢ１／ＰＢ２和ＰＥ１／ＰＥ２，以疫苗株Ｂａｒｔｈａｋ－６１及野毒株Ｓ，Ｓｕ，Ｆ，Ｌ，Ｙ及闽Ａ（Ｍｉｎ－Ａ）ＤＮＡ为模板进行了ＰＣＲ扩增，结果显示用引物Ｐ     

断乳仔猪多系统衰竭综合征的病原学调查

此试验针对临床具有断乳仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）症状的猪只进行病原调查。2002年3月至2005年3月，在黑龙江省大庆、靠河寨和吉林省公主岭3个地区1～25周龄的猪群中，选择临床出现生长迟缓、停滞，呼吸困难、皮肤苍白和曾经具有此类症状并已死亡的猪只．采集病料共194份，通过聚合酶链反应（PCR）扩增Ⅱ型猪囤环病毒（PCV2）基因组的特异序列片断．扩增产物长度为900bp／470bp，检测病毒。结果发现．PCV2的总阳性率为21．1％（41／194）．不同地区的检测结果不同，2002年，大庆某猪场发病猪中PCV2检测阳性率为5．1％（4／78）．靠河寨某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为11．5％（9／78），2004年．公主岭某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为73．7％（28／38）。结果表明，临床发生PMWS症状的猪只．应用PCR法检测PCV2阳性率差别较大。病原学调查显示，在我国PMWS发生与多种因素相关，不仅仅是PCV2感染．PCV2感染与PMWS密切相关，但并不是出现PMWS症状的猪都发生PCV2感染．在未检测到PCV2的情况下．仍有PMWS发生。     

水疱性口炎病毒糖蛋白基因的克隆和表达

对一株实验室保存多年的水疱性口炎病毒(VSV)的囊膜糖蛋白(VSV_G)基因进行了克隆和测序,并且构建了重组VSV_G真核系统表达载体。结果表明克隆的VSV_G基因全长1536个核苷酸(nt),其编码的G蛋白长为511个氨基酸(aa),氨基酸序列与20个Indiana血清型VSV毒株的同源性在95.4%左右(94.1%～98.0%)。种系发生树分析表明此病毒株属于水疱病毒属的VSV_Indiana血清型。经免疫荧光检测证明构建的重组VSV_G表达质粒pCIVG5和pCRVG6转染23T细胞后能够有效地转录和表达,这为进一步开发利用VSV_G奠定了基础。