5株鸡源新城疫病毒F基因特性分析

为调查山西省鸡源新城疫病毒(NDV)的流行现状,2012—2013年从山西省部分地区的发病鸡群分离、鉴定出5株NDV,并对这5株NDV的分子生物学特性进行了研究。对各分离株F基因序列的分析表明:其中的4株病毒在基因型分类上属于基因Ⅱ亚型,并与标准弱毒疫苗La Sota株高度同源,为99.2%⁹9.4%。氨基酸序列同源性为100%,且裂解位点氨基酸序列为112G-R-Q-G-R-L117,符合弱毒株裂解位点特征。另一分离毒株在基因型分类上与JS/5/01/Go同属基因Ⅶd亚型,两者基因序列同源性为95.6%,氨基酸序列同源性为97.5%。其裂解位点氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,为强毒株裂解位点特征。     

苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV)GP37蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位

苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,CpGV)是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一,为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因(egfp)以N端或C端融合的方式插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleocapsid NPV,AcMNPV)基因组中,获得重组的杆状病毒质粒(bacmid),转染昆虫细胞Sf9,然后进行Western blot检测。结果显示,检测到GP37和EGFP的融合蛋白(vAcEGFPGP37、vAcGP37EGFP)和非融合蛋白(vAcGP37、vAcEGFP)都得到了高效表达;用激光共聚焦显微镜观察蛋白的亚细胞定位情况,融合GP37的EGFP主要聚集在细胞质中,没有融合GP37的EGFP遍布整个细胞,说明CpGV GP37蛋白定位于细胞质中。本实验研究了CpGV GP37蛋白的真核表达,为该蛋白的后续研究提供了条件;而该蛋白的亚细胞定位研究,不仅为CpGV GP37蛋白增效机制的研究提供了基础资料,同时丰富了杆状病毒GP37蛋白的相关理论。     

要闻

专家：浙江杭州H7N9病例呈散发状 未来发病率将增加 自1月5日浙江今年出现首例人感染H7N9禽流感病例以来，累计16日已有12例。杭州市卫生局曾组织相关专家对疫情进行研判，专家认为当前处于禽流感高发季节，浙江省内不少农贸市场禽类已受到病毒污染，     

基于ELISA方法检测不用来源猪流感病抗体水平

本文简介了猪流感病毒的基本情况和猪流感的临诊症状,主要讲述了应用ELISA方法检测猪流感抗体,并对其结果进行分析讨论,最终提出控制对策。     

A型禽偏肺病毒F蛋白的原核表达与抗原性分析

利用大肠杆菌表达A型禽偏肺病毒(aMPV)F融合蛋白,并检测其抗原活性。通过扩增aMPV F融合蛋白的编码基因,与原核表达载体pBCX(pet43.1改造载体)连接构建重组表达载体pBCX/aMPV/A/F,从上清中非变性纯化重组蛋白,并进行Western-blotting分析。结果表明,该融合蛋白相对分子质量为74 kDa,具有与aMPV单克隆抗体良好的结合能力,说明此融合蛋白具有良好的抗原性,可用于抗体检测。     

禽脑脊髓炎病毒YL株的分离鉴定

为弄清陕西杨凌某鸡场种鸡产蛋量突然下降,种蛋孵化率降低,死雏、弱雏增多的原因,通过采集发病鸡脑组织进行SPF鸡胚连续传代、琼脂扩散试验(AGP)、人工感染试验、VP1基因的克隆及序列分析等对病原进行鉴定。结果显示,分离毒YL株与AEV标准阳性血清之间出现特异的沉淀线;在人工感染试验中可见雏鸡有震颤、共济失调等症状,剖检大脑有轻微的水肿和软化;成功克隆出AEV YL株的VP1基因,全长810 bp,编码270个氨基酸残基;与AEV参考毒株VP1基因核苷酸同源性92.0%⁹9.8%,氨基酸同源性为89.3%99.8%,氨基酸同源性为89.3%⁹9.3%;进化树分析表明,YL株与1143株、L2Z株和SX株亲缘关系较近,与VR株、HB株、SD株和NH937株亲缘关系较远。结果表明,分离毒株为禽脑脊髓炎病毒,与AEV已知毒株在进化方面存在一定程度的差异。     

5株传染性囊病病毒超强毒株的分离与鉴定

本研究从浙江余姚、上虞、海南3个疑似发生传染性囊病的鸡场采集病料共20份,通过观察临床症状、病理变化、RT-PCR检测、SPF鸡胚接种、基因测序等试验,证实鸡场送检样品的鸡群发生了传染性囊病,且分离到5株传染性囊病病毒,对VP2基因进行测序分析后,发现具有超强毒株的特征。并与Gen Bank上的已知的强毒OKYM D49706、HK46 AF092943、D78 AF499929、Harbin-1 AF454945的VP2氨基酸序列的同源性在99.22%。说明此次分离的5株病毒与已知病毒存在一定的差异性。为以后的IBDV病毒的研究提供了一定的依据。     

差速离心对J亚群禽白血病病毒分离株SCAU11-H生物学活性影响

为探讨差速离心对J亚群禽白血病分离株SCAU11-H生物学活性的影响,本研究通过实时荧光定量RT-PCR、IFA和ELISA等方法验证差速离心后浓缩病毒的生物学活性。结果显示,在透射电镜下病毒粒子直径为60¹40 nm,由外部的囊膜和内部的电子致密的核心构成,多近似球形,也有一些类似长杆形、鼓锤形的形态;浓缩前后病毒的滴度(TCID50/m L)由原来的1.58×105/m L上升到8.89×1011/m L。浓缩病毒(105TCID50)感染细胞后,病毒复制量在1 d,3 d,5 d逐步增长,ALV-J抗原gp85和p27检测均为阳性。以上结果表明,差速离心极大提高了病毒滴度,且并不影响病毒生物学活性,浓缩后的病毒可用于后续试验研究。     

猪圆环病毒2型(PCV2)感染:临床症状、病理学及实验室诊断(续完)

上期回顾:上一期我们主要介绍了PCV2感染相关的临床特征,包括PCV2亚临床感染和PCV2临床感染等。     

美国研究：日本香菇或对治愈宫颈癌有奇效

最新研究发现,1种日本蘑菇或对杀死引发宫颈癌的病毒有奇特功效。据英国《每日邮报》报道,人类乳头瘤病毒（HPV）是1种十分普遍且感染性很高的病毒,可造成人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,多在宫颈、嘴和咽喉等部位发病。有超过四分之三的女性会在她们的一生中感染这种病毒,严重的甚至会引发宫颈癌。