沙丁胺醇人工抗原的制备及ic-ELISA方法的建立

以合成沙丁胺醇(SAL)完全抗原为基础获得针对SAL的多克隆抗体,建立检测SAL的间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定基础。为此,分别用混合酸酐法和活化酯法制备SAL-BSA免疫原和SAL-OVA检测原,免疫新西兰大白兔获得SAL多抗血清,建立检测SAL ic-ELISA检测方法。结果显示,成功合成了SAL-BSA和SAL-OVA,其偶联比分别为17∶1和6.4∶1;免疫后兔血清抗体效价为1∶102400,所建立ic-ELISA的半数抑制浓度(IC₅₀)为24.84μg/L,最低检测限(IC₁₀)为0.78μg/L,线性范围IC₂₀~IC₈₀为3.16μg/L~80.1μg/L;精密度(CV)%<10%,回收率在98%~110%之间。特异性鉴定结果显示,SAL多抗血清除与侧链上含有叔丁基官能团的结构类似物具有较强的交叉反应外,不存在与其他同类分子的交叉反应。以上结果表明,成功建立了检测SAL的ic-ELISA检测方法,为进一步开发SAL快速检测试剂盒奠定了基础。     

沙丁胺醇在肉牛血浆及尿液中残留消除规律研究

【目的】研究沙丁胺醇在肉牛血浆、尿液中残留消除规律.【方法】选取3头中国西门塔尔杂交肉牛,连续饲喂沙丁胺醇21d,给药剂量0.45mg/(kg·d),使用UPLC-MS/MS法分别测定给药第1、7、14、21天和停药第3、7、14、28天酶解前、后的血浆和尿液样品中沙丁胺醇质量浓度.【结果】给药期内,酶解前、后血浆中沙丁胺醇质量浓度范围分别为0.23~0.32ng/mL、34.2~42.48ng/mL,停药后迅速消除,分别在停药第3天(未酶解血浆)和停药第14天(酶解后血浆)时低于LOQ(0.2ng/mL),而且酶解后血浆中沙丁胺醇质量浓度显著高于酶解前(P0.01);给药期内,酶解前、后肉牛尿液中沙丁胺醇含量分别在给药第21天(2 444.4ng/mL)和给药第14天(7 863.4ng/mL)达到峰值,随后逐渐消除,停药28d时尿液中沙丁胺醇浓度低于LOQ(0.5ng/mL),而且酶解后尿液中沙丁胺醇质量浓度显著高于酶解前(P0.01).【结论】与血浆相比,尿液中沙丁胺醇质量浓度较高,消除速率较慢,而且酶解样品中的沙丁胺醇质量浓度显著高于未酶解样品.     

3种β2-受体激动剂荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

本研究旨在制备性能优异的克伦特罗（clenbuterol,CLB）、莱克多巴胺（ractopamine,RAC）和沙丁胺醇（salbutamol,SAL）荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0 μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5 μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数（CV）均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。     

基于硼亲和策略的纸基分子印迹膜对沙丁胺醇选择性吸附研究

为探索建立一种从动物源性食品复杂基质中选择性分离富集沙丁胺醇(SAL)的方法，基于硼亲和与定向表面印迹策略，本研究以二氧化硅改性滤纸为基材成功制备了硼亲和纸基分子印迹吸附膜(FSM-BA@MIP)。采用扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶红外光谱(FTIR)和热重量分析(TGA)等多种技术手段进行了表征分析，并系统考察了吸附性能。结果表明，由于硼亲和定向表面印迹机制，所构筑的吸附膜FSM-BA@MIP对SAL具有高度选择性，理论最大吸附容量可达246.31 mg·g^-1，印迹因子为3.2。吸附过程符合准二级动力学模型，以化学吸附为主，吸附等温线符合Freundlich模型，并伴随多层吸附。此外，再生试验结果表明，FSM-BA@MIP循环使用5次后仍能保持较好的吸附性能。对实际样品进行分析，回收率为65.7%～85.9%[平均相对标准偏差(RSD)为8.7%]，最大富集倍数为87。本研究为发展新型食品中兽药残留选择性分离富集材料和策略提供了参考依据。