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柑橘衰退病、裂皮病和碎叶病的多重RT-PCR检测方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究以广东省农业科学院果树研究所隔离网室内通过嫁接分别感染CTV、CEVd和CTLV的柑橘树皮为实验材料,建立了以oligo(dT)为反转录引物的RT-PCR检测体系,成功检测到在病毒RNA 3'末端带有ploy_(A)加尾的CTV和CTLV。实验过程中,发现不具有ploy_(A)加尾的环状类病毒CEVd,同样可以用oligo(dT)反转录的RT-PCR检测出来,通过测序分析,其同源性在96%以上,并发现在CEVd序列中有一个富含A的区段。在此基础上,进一步研究了同时检测CTV、CEVd和CTLV的多重RT-PCR检测体系,该方法能为这3种病害的检测简化步骤、节省时间、降低成本。 相似文献
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采用直接组织免疫印迹(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)和常规PCR技术,对采自广东梅州新建‘Cocktail’葡萄柚园内表现疑似黄龙病症状的样品进行检测。DTBIA检测发现疑似样品的韧皮部存在特征性紫红色反应,与黄龙病阳性对照反应一致。PCR检测发现枝条、叶片和果实样品中均检测出了黄龙病菌特异性条带,其中果蒂、中柱和种皮内病菌含量较高。进一步测序分析发现,来自‘Cocktail’葡萄柚病样的16Sr DNA和ef Tu基因与NCBI中的柑橘黄龙病菌亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)对应基因的序列相似性均为100%,证实‘Cocktail’葡萄柚感染了柑橘黄龙病菌亚洲菌株。 相似文献
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以6年生砂糖橘(Citrus reticulata Blanco)结果树为对象,研究了幼果期"以梢控梢"保果对其坐果、果实品质等的影响及其综合效益分析。结果表明,与传统的人工抹梢保果方式(CK)相比,在树冠顶部保留适量夏梢生长,可显著抑制树体中下部夏梢的抽生,从而达到高效、节本保果目的。从3个"以梢控梢"保果处理的综合表现可知,按每1 m~2树冠投影面积保留10条夏梢的保果方法,夏季树体夏梢抽生数量比对照下降93.6%,座果率、平均单株产量分别提高6.95%和10.3%,保果成本下降66.1%,且果实品质优良,是砂糖橘高效节本保果的最佳方案。 相似文献
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柑桔细菌性病害黄龙病是全球柑桔业的致命威胁。采用无病苗、砍除罹病树、统防统治柑桔木虱等综合防控措施虽然有效,但在幼年园中落实难。调查表明,导致此现象的主要原因是传统使用的露地小苗一般需要3年才能长大投产,许多果农在此期间不得不外出打工以减轻经济压力。针对此种情况,提出了采用无病容器大苗建园,辅以促生栽培管理措施,使之在定植1年后就投产的栽培技术路线,藉以减低幼树期黄龙病防控压力并减慢发病速度。4年多的实践表明,容器大苗技术非常适合在黄龙病疫区使用,可大幅度提高疫区柑桔种植效益。简介了无病容器大苗技术及其原理,分析了该技术的优势,并对其推广应用前景进行展望。 相似文献
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【目的】广东省龙门县境内南昆山主峰天堂顶海拔1 000 m处有当地称之为‘龙门香橙’的野生柑橘,论文拟从形态学和DNA分子证据上探讨其与已知柑橘资源的异同,为合理利用该资源奠定基础。【方法】实地调查‘龙门香橙’的生长环境,观察记录叶、花、果实的形态特征。分析果实的可溶性固形物、糖、酸和抗坏血酸含量。在电子显微镜下观察花粉的显微特征。对比分析包括‘龙门香橙’在内的24个柑橘资源的AFLP图谱以及10个资源的8个SNP位点的基因型。克隆、测序分析‘龙门香橙’的β-胡萝卜素羟化酶(β-carotene hydroxylase,CHX)基因的2个等位基因,并与其他柑橘材料的CHX基因序列进行比对。【结果】生境调查结果表明‘龙门香橙’非人工种植,是真正的野生柑橘。其果实、种子的形状和单胚等特征与柚类相似,但果实与柚相比明显偏小、出汁率与可食率很低、味苦等性状提示其比较原始。叶片形状、线形翼叶、花丝联合等特征类似宽皮柑橘类,比较进化;但花丝和新叶染有紫红色等性状则比较原始。基于AFLP图谱的聚类分析显示其不与其他研究材料聚类,但介乎橘柚之间。8个SNP分子标记分析结果显示,‘龙门香橙’的3个SNP位点为宽皮柑橘纯合基因型,1个位点为橘柚杂合基因型,其余4个位点为柚子纯合基因型,这种基因型组合不同于其他任何所分析的材料。‘龙门香橙’的CHX基因的核苷酸序列显示其2个等位基因间相互差异较小,且含有其他已知柑橘CHX基因上未发现的SNP。CHX基因序列进化分析结果表明其与其他柑橘的遗传距离较远、差异似达种间水平。【结论】‘龙门香橙’是一个真正的野生柑橘资源。其形态性状兼具原始与进化特征。在DNA分子水平上,‘龙门香橙’与已知柑橘不同,甚为独特。 相似文献
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我国是世界上柚类生产面积最大的同家,产量居第2位,仅次于美国.世界柚类生产面积不断增加.产量保持平衡,2004~2005年由于受到病害和气候的影响,世界柚类生产规模萎缩,2005年的产量比2004年下降近1/5,2006~2007年又逐渐恢复.我国柚类的生产面积和产量逐年稳步上升,而且增长速度逐渐加快.我国的柚类生产主要是满足国内消费市场,出口量非常少,不足全世界的4%,但2000年后我国出口的柚类迅速增加,说明我国柚类产品慢慢得到国际市场的肯定,潜力十分巨大.目前国内对于柚类的研究主要集中在柚的起源、种质资源分析、新品种引进和选育、生物学特性和果实发育规律等领域.研究重点正逐步由栽培生理方面向分子生物学方面转化,研究手段也在不断提高. 相似文献
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以九仙蜜桃的离核和粘核两品系为材料,研究其在室温贮藏过程中果实硬度、果实腐烂率、果皮颜色、果皮中叶绿素和类胡萝卜素含量、果实品质、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶( SOD)、过氧化物酶( POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化.结果表明,在贮藏第12天,离核果实硬度为粘核果实的45.28%;果实腐烂率比粘核高51%;果实中可溶性固形物含量离核和粘核分别增加了35.1%和30.8%;总糖含量离核增加了38.6%,粘核增加了30.0%,而可滴定酸含量整体呈下降趋势.果实中MDA含量离核和粘核分别比贮藏初期增加了60.6%和25.1%,与离核果实相比,粘核果实SOD、POD、CAT活性的高峰期出现较迟,并在贮藏后期保持了较高的活性,从而提高了其耐贮性. 相似文献
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