一个水稻小热休克蛋白的异源表达及寡聚特性分析

【目的】在前期研究中,本实验室已克隆了一个水稻小热休克蛋白基因(OsSHSP17.6),并发现该基因的表达明显受到热激和病毒侵染调控,表明该蛋白可能在逆境胁迫过程中起重要作用。本研究的目的在于进一步明确OsSHSP17.6的特性。【方法】在本研究中,进一步将该基因亚克隆至原核表达载体p ET-32a并导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS诱导表达,通过亲和层析的方法纯化了该重组蛋白,进一步用于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析。【结果】异源表达的重组OsSHSP17.6能减轻IPTG对宿主菌的毒害。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting分析显示纯化的重组OsSHSP17.6蛋白在体外能形成同源二聚体和寡聚体。【结论】这些结果支持OsSHSP17.6是一个有功能的分子伴侣蛋白并表明该蛋白可能通过形成同源寡聚体的方式参与逆境胁迫反应,这为进一步明确OsSHSP17.6的功能机制奠定基础。     

玉米淀粉生产工艺水中蛋白的回收利用

在玉米淀粉的生产过程中,采用蛋白回收工艺实现水资源的可持续利用,以提高玉米中蛋白的回收率,提高商品淀粉的质量。     

CIRAD的新软件旨在减少抗生素的使用

正法国--CIRAD的一个研究小组已经开发出一种能识别参与促使细菌感染的蛋白的软件。这种在治疗方法上的创新有很大的潜力,尤其在克服细菌的耐药性问题上。每年新兴的动物和人畜共患病给畜禽养殖场带来了沉重的损失,对人类健康的风险也逐渐加大。为了更有效地控制这种疾病,法国的一个研究小组开发     

ApoB RNA编辑高效蛋白检测体系的构建

[目的]建立一个载脂蛋白B(apoB)RNA编辑蛋白检测体系。[方法]在慢病毒表达质粒载体pCSII-CMV-IRES-Neor中插入apoB RNA编辑保守序列,并在其2端嵌入红色荧光蛋白(DsRed)、绿色荧光蛋白(GFP)表达序列,以此慢病载体转染大鼠肝癌细胞系CBRH-7919获得稳定表达。采用共聚焦显微镜测序方法检测apoB RNA的编辑。[结果]目的指示基因能够在CBRH-7919细胞中稳定表达,表现出指征RNA编辑的多色特征。[结论]试验成功构建了在细胞水平上以颜色变化指示apoB RNA编辑的检测体系,该体系为快速检测以apoB RNA编辑为靶的降胆固醇药物筛选提供了基础。     

秸秆发酵技术在小麦秸秆上的应用

正麦秸发酵就是在麦秸中加入特定的活性微生物菌剂及硫酸铵或尿素等外源无机氮源,然后放入封闭的发酵池中,在厌氧条件下让活性菌株生长,并分解利用秸秆纤维素及外源无机氮源合成菌体蛋白、有机酸等,使秸秆富含粗蛋白,具有酸香味,牛喜食。自2013年7月22日开始,河北农业大学生命科学学院的朱宝成教授及其研发团队在河南省禹州市意达养殖有限公司开展了为期7个月的小麦秸秆微生物发     

对蜜蜂寿命的几点认识

<正>日前,读了几篇有关"卵黄原蛋白"、"胖蜜蜂"等内容的国外译文,笔者对蜜蜂寿命的内涵有了一些新的认识,并与学者S先生一起进行了探讨,整理如下,供参考。一、蜜蜂寿命对蜂群的贡献在养蜂实践中,常见同地的不同蜂场,蜂群春繁时的群势基本相同,但日后繁殖与采集的效果却大不一样,引起这种结果的原因有很多,但其中有一个极易被     

苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV)GP37蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位

苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,CpGV)是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一,为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因(egfp)以N端或C端融合的方式插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleocapsid NPV,AcMNPV)基因组中,获得重组的杆状病毒质粒(bacmid),转染昆虫细胞Sf9,然后进行Western blot检测。结果显示,检测到GP37和EGFP的融合蛋白(vAcEGFPGP37、vAcGP37EGFP)和非融合蛋白(vAcGP37、vAcEGFP)都得到了高效表达;用激光共聚焦显微镜观察蛋白的亚细胞定位情况,融合GP37的EGFP主要聚集在细胞质中,没有融合GP37的EGFP遍布整个细胞,说明CpGV GP37蛋白定位于细胞质中。本实验研究了CpGV GP37蛋白的真核表达,为该蛋白的后续研究提供了条件;而该蛋白的亚细胞定位研究,不仅为CpGV GP37蛋白增效机制的研究提供了基础资料,同时丰富了杆状病毒GP37蛋白的相关理论。     

大豆粕在鲑鳟鱼类饲料中的利用（续）

五．鲑鳟饲料中目前的大豆产品用量 如前所讨论，大豆粕在鳟鱼饲料中的使用已有60年的历史，不过仅使用于鱼苗后的阶段，且用量很少。其它在鲑鳟饲料中曾被评估过的大豆产品包括大豆浓缩蛋白、大豆分离蛋白、全脂大豆与大豆油。溶剂萃脂之去皮大豆粕（48％粗蛋白）在鲑鳟饲料中使用较普遍。     

水产饲料动植物蛋白源替代体系及其与养殖鱼类食性的关系

蛋白源替代是水产饲料领域研究的重要内容之一。本文概述了当今水产饲料动植物蛋白源替代体系的构成和应用,并对其进行详细分类和特点阐述,选取其中具有代表性的蛋白源进行总结,重点揭示水产饲料动植物性蛋白源在不同食性鱼类的研究进展及替代效果差异较大原因,以期为水产饲料配方的科学设计提供理论依据。     

应用猪圆环病毒2型缺失NLS的Cap蛋白建立一种ELISA检测方法

本试验通过诱导重组质粒pCold-SUMO-dCap在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性表达的SUMO-dCap融合蛋白,以SUMO-dCap融合蛋白作为包被抗原,建立了一种检测猪圆环病毒2型抗体的ELISA方法。用该方法与商品化试剂盒对267份猪血清进行平行检测,两种方法的符合率为90.26%,该方法的特异性和灵敏性分别为93.33%、97.16%;与猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪口蹄疫病毒和猪瘟病毒阳性参考血清无交叉反应;批内和批间变异系数分别为1.25%⁶.37%和6.68%6.37%和6.68%¹3.58%。研究结果表明,本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性好、重复性高,为临床上PCV2血清抗体检测和PCV2流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法,为商品化试剂盒开发奠定了良好的基础。