昆明犬IGF-1基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织表达研究

试验旨在系统研究昆明犬胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）基因的结构和功能，揭示该基因的组织表达规律，为探讨工作犬体型及生长发育性状提供基本数据。以昆明犬为试验材料，运用分子克隆技术扩增IGF-1基因CDS区，应用生物信息学方法进行序列同源性比对并构建系统进化树；获得对应的氨基酸序列并分析蛋白理化特性及蛋白亚细胞结构、亲疏水性和磷酸化位点，利用SOPMA和SWISS-MODEL软件预测蛋白二级结构并构建蛋白质三级结构模型；同时利用实时荧光定量方法检测该基因在昆明犬各组织的表达情况。结果显示，昆明犬IGF-1基因CDS区长462 bp，编码153个氨基酸，其核苷酸序列与家犬的同源性较高（100%），与小鼠和鸡的同源性较低（82.6%和81.2%）。IGF-1蛋白分子质量和理论等电点分别为16.97 ku和9.36，属亲水性分泌型蛋白，无跨膜结构，存在信号肽区域（第1-48位氨基酸）；亚细胞定位分析表明，IGF-1蛋白主要分布于细胞核（56.5%）及线粒体（17.4%）中；磷酸化位点分析发现，IGF-1蛋白存在15个磷酸化位点；该蛋白的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。组织表达显示，IGF-1基因在昆明犬不同组织中均有表达，尤其在脾脏、肝脏及肾脏中呈现高表达。本试验结果为今后深入研究IGF-1基因功能提供了理论参考，并为深入探讨IGF-1基因对昆明犬生长发育性状研究提供一定的基础资料。     

犬胆绞痛的诊疗体会

近年来犬胆绞痛病例较多,但许多临床兽医不熟悉该病证,经常出现漏诊或误诊情况,影响诊疗效果,导致医疗纠纷。为了提高犬胆绞痛诊断治疗水平,本文对犬胆绞痛的发病原因、临床症状、诊断、治疗方法进行了阐述,重点介绍了犬胆绞痛诊疗中容易出现的问题及注意事项。     

体细胞克隆技术在乌金猪遗传资源保护上的应用

旨在通过猪体细胞克隆技术,生产乌金猪火毛系,并分析生长发育能力及繁殖性能,为该技术在地方优良猪种保种上的应用提供理论依据。本研究采集了符合乌金猪种质特征的3头公猪和12头母猪的耳组织样品。公猪年龄分别为3、6、11月龄,母猪年龄差距较大,最小的2月龄,最大的10岁。其中3头母猪和1头3月龄公猪已被去势,10岁母猪已无繁殖能力。结果,成功建立了15头乌金猪的耳组织成纤维细胞系,分别选择1头3月龄乌金猪（♂）和10岁乌金猪（♀）的成纤维细胞进行体细胞核移植,经胚胎移植入16头代孕母猪,共获得25头克隆猪,克隆猪生长发育正常,性成熟后进行自然交配共获得39头F1代活仔。本研究通过体细胞克隆技术成功克隆了乌金猪,具备正常的生长发育性能和繁殖性能,为地方猪种的保护研究提供了新的途径。     

流式细胞仪精子分离技术在工作犬繁育中的应用展望

动物的性别控制是指通过人为作用使雌性动物按照人们的意愿繁殖出所需性别后代的一门生物技术,该技术具有巨大的利用价值。在人类领域,性别控制最重要的意义在于帮助具有性连锁遗传病的患者选择后代性别,避免遗传病的发生;在畜牧生产中,动物的许多重要经济性状都与性别密切相关,通过控制后代的性别,可充分发挥受性别限制的生产性状(如泌乳)和受性别影响的生产性状(如生长速度、肉质等)的优势,使肉用家畜多产公畜、乳用家畜多产母畜,满足畜牧生产需要,获得最大的经济效益。同时,优质种公畜精子的分离,不但能够提高家畜繁殖效率,也能够减少家畜性连锁遗传病的传播。另外,在品种繁育方面,精子分离技术可为育种     

犬人工授精不同输精部位对母犬繁殖性能的影响

以公安部昆明警犬基地的警用种犬作为研究对象,应用自主设计和组装的犬用内窥镜输精枪人工授精系统,进行不同输精部位人工授精试验,并从输精受孕率、精液利用率、窝均产仔数等方面进行比较分析.结果显示:子宫角深部输精的母犬受孕率为65.0％,显著高于子宫颈部输精的52.5％和阴道内输精的30.0％,低于对照组(自然交配)的77.5％.表明采用犬用内窥镜输精枪人工授精系统从子宫角深部输精效果最佳,能使优良犬种的冷冻精液得到广泛应用,并能显著提升优良犬种的繁殖率,具有较高的推广和应用价值.     

犬体型大小相关基因的研究进展

犬作为人类最早驯化的家养动物,在人类发展史和现代生活中扮演着非常重要的角色,如伴侣、看护、导盲、军警用犬等。人工选择过程使得家犬产生了极大的表型多样性,其中体型性状是犬最显著的表型性状之一,属高遗传力性状。本文综述了犬体型性状相关基因IGF1、IGF1R、GHR1、GHR2、SMAD2、STC2、HMGA2、IGSF1、ACSL4及IRS4的研究进展,为未来工作犬体型遗传改良育种提供重要的靶点和依据,为进一步阐明人类及其他家养动物在体型上的遗传变异提供参考。