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两种主要甜樱桃病毒RT-PCR检测方法的改进 总被引:5,自引:2,他引:3
李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)和李矮缩病毒(Prune dwarf virus,PDV)是较为常见且危害严重的两种植物病毒,1992年被我国列为进境检疫危险性有害生物,主要危害李属和蔷薇属植物.反转录-聚合酶链式反应检测法(RT-PCR)因操作简便且灵敏度高而备受青睐.利用该方法已分别从北京怀柔[1-2]及大连地区[3]栽培的桃、樱桃中检测到PNRSV和PDV两种病毒.由于PNRSV和PDV同属雀麦花叶病毒科等轴不稳环斑病毒属,且传播方式相似,往往同时发病.已有的RT-PCR检测方法,一次反转录操作仅能检测一种病毒,耗时长、效率低,急需建立新的RT-PCR检测体系.本试验采用随机六聚体引物进行反转录,对RT-PCR检测方法进行了改进. 相似文献
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随着果树集约化栽培的发展,桃树传统的冬季修剪逐渐暴露出诸多弊端。为了增加分枝、更新枝组,多年来桃树传统的冬季修剪一直采用短截的方法,即对所保留的1a生枝条均进行短截。由于枝枝短截,故枝条生长量很大,造成树冠郁闭,光照条件不良,严重影响桃树产量和果实品质。因此,以简化修剪技术,实现桃树早果、丰产、稳定和优质为目的的桃树冬季修剪新方法——长枝修剪技术在果园生产中得到广泛应用。 相似文献
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李矮缩病毒外壳蛋白基因克隆及原核表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为制备李矮缩病毒(Prunus dwarf virus, PDV)抗血清,克隆PDV外壳蛋白(CP)基因,构建原核表达载体,优化蛋白表达条件。以阳性感病甜樱桃叶片为试验材料,提取总RNA,根据PDV CP基因(L28145.1)设计特异引物,RT-PCR方法扩增,克隆、测序,构建原核表达载体pET30a-PDVCP,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达。PDV CP基因(Genbank登录号:JF333587.1)全长657 bp,编码217个氨基酸,与GenBank其他PDV分离物CP基因核苷酸序列的同源性为89.2%~93.9%,推导的氨基酸序列同源性为97%~99%。根据完整CP基因核苷酸序列构建系统进化树显示:12个PDV分离物可分为3组,泰安分离物与巴西、土耳其等分离物属于Ⅰ组。成功构建原核表达载体pET30a-PDVCP,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白。转pET30a-PDVCP载体的大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达分子量约24 kDa的重组蛋白。该重组蛋白在30℃,1.0 mmol/L IPTG、诱导4 h表达量最大。 相似文献
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樱桃病毒A外壳蛋白基因克隆及其原核表达 总被引:1,自引:1,他引:0
为制备樱桃病毒A(Cherry virus A,CVA)抗血清,克隆CVA外壳蛋白基因(CP),构建原核表达载体,优化蛋白表达条件。根据CVA全基因组序列(NC_003689.1)设计特异引物,RT-PCR方法扩增CVA外壳蛋白基因,克隆、测序,构建原核表达载体pET30a-CVACP,转化大肠杆菌BL21(DE3)株系,采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达。序列分析显示,该区段长为603 bp,编码201个氨基酸,与法国分离物PF(HQ267856.1)的同源性为96.8%,与印度分离物JKSPMi-5(FN669548.1)同源性为86.3%。成功构建了原核表达载体pET30a-CVACP,SDS-PAGE电泳分析显示,转pET30a-CVACP载体的BL21(DE3)菌株表达分子量约24 kDa的重组蛋白,该重组蛋白在37℃、1.5 mmol/L IPTG、诱导4 h条件下表达量最大。 相似文献
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猪疥螨病的症状及防治措施 总被引:2,自引:0,他引:2
猪疥螨病,俗称猪疥癣、癞,是由猪疥螨虫寄生在皮肤内而引起的猪最常见的外寄生虫性皮肤病。养猪场几乎都有猪疥螨感染,由于处于持续性的剧痒应激状态,种猪消瘦,商品猪生长缓慢,饲料转化率严重降低,严重者光吃不长,逐渐消瘦,甚至死亡。 相似文献
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苜草素对早期断奶仔猪生产性能及腹泻发生率的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
苜草素是从我国天然牧草紫花苜蓿中通过现代提取工艺技术生产的纯植物成分饲料添加剂。为了探讨苜草素对仔猪生产性能的影响,我们在总结前人实验的基础上,通过在断奶仔猪饲料中添加苜草素,并与金霉素进行比较,为苜草素在饲料中替代抗生素类添加剂,生产绿色猪肉提供理论依据。1试验设计及饲养管理按遗传相似、体重相近、公母各半的原则,选择杜长大三元杂交断奶仔猪72头,随机分为4个处理组,每组18头,其中试验组饲料中添加400毫克/千克(试验1组)、500毫克/千克(试验2组)、600毫克/千克(试验3组)3个水平的苜草素,对照组饲料中添加金霉素150毫克/… 相似文献
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果品生产是庆阳市西峰区农村经济的一个重要支柱产业和农民奔小康的致富之路 ,对本区经济建设有举足轻重的作用。但随着国内外水果市场变化和果品生产形势发展 ,特别是我国加入世贸组织 ,市场对果品需求的数量、质量、规模都发生了巨大变化 ,本区所生产的水果不论从数量或质量上说 ,都不能完全满足市场需求。果品生产方面存在诸多问题 ,影响果业生产的可持续发展。应立足本区实际、分析现状及存在问题 ,提出今后果业发展的对策 相似文献
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2001年10月 1~20日,东北林业大学野生动物资源学院在陕西长青国家级自然保护区举办了“陕西省自然保护区专业证书班”的第二次培训并举行了结业典礼。这是野生动物资源学院进行的“走出校园,推广科教”的有益尝试。此次专业证书班是资源学院与陕西省林业厅动管站、WWF(世界自然基金会)中国办事处的合作项目,旨在为野生动物资源保护最基层的工作人员传授野生动物保护与利用的专业知识,培训人才。 该专业证书班于去年开课,持续一年半。学员来自于陕西牛背梁国家级自然保护区、佛坪国家级自然保护区、长青国家级自然保护区… 相似文献