利用PCR技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)

根据玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartiisubsp.stewartii)ITS基因序列,设计并合成了特异性PCR检测引物,对玉米细菌性枯萎病菌和非玉米细菌性枯萎病菌的标准菌株进行了PCR扩增反应.结果显示,玉米细菌性枯萎病菌的PCR产物出现301 bp的特异性扩增条带,而非玉米细菌性枯萎病菌均未出现扩增条带;其PCR检测的灵敏度为612 pg/μL.因此PCR技术是一种特异、灵敏、快速检测玉米细菌性枯萎病菌的方法.     

鸡新城疫病毒F基因高效真核表达质粒的构建

为进一步研究基因疫苗的免疫机制和基因疫苗的免疫效果 ,应用 DNA重组技术 ,根据载体 pc D-NA4 .0 / His Max的多克隆位点设计引物 ,对含有 NDV保护性抗原基因 F的质粒 PCR扩增。将得到的目的片段插入到载体的启动子下游 ,成功得到含有 NDV F基因的真核表达质粒载体 PC4 F的基因疫苗。     

OIE高健康高性能赛马风险降低策略

为消除赛马临时性国际移动障碍,保障进（出）口国动物卫生状态和赛马健康状态,OIE、FEI和IFHA共同制定了高健康高性能马（HHP）概念。基于《OIE陆生动物卫生法典》生物安全等措施实施HHP风险降低策略,运维一个功能分区,将HHP马和其他马属动物隔离开来,以防止发生疫病国际性传播。在HHP标准条件下,OIE对25种重要马病传播风险进行了定性评估：17种疫病发生传播风险极低,但非洲马瘟、马流感、马传染性贫血、马梨形虫病、马鼻疽和委内瑞拉马脑炎等6种疫病仍有不同程度的传播风险,需要实施特定卫生要求,如实验室检测、治疗、免疫接种等。HHP概念为赛马临时国际移动提供了普遍适用的可行性方案,给发展中国家参与国际赛马运动提供了机遇。我国应加强马属动物疫病监测和疫情报告管理,持续推进马病无疫区（EDFZ）建设和我国HHP马匹认可工作。     

2007年版OIE《陆生动物卫生法典》解读与对策

2007年版OIE《陆生动物卫生法典》简称新版《法典》,在通用定义、动物疫病名录、疫病收入标准、疫情通报规定、地区或区域划分以及禽流感等方面进行了重大修订、补充或细化,在具体的疫病章节(包括口蹄疫、牛海绵状脑病和禽流感等)进行了适当的修正,新增了一些新的附录,如牛和小反刍兽精液、活动物鉴定与溯源通用原则、病原与载体的灭活及动物尸体处理的通用指南,还包括4个动物福利指南、抗生素监测和监控指南.新版《法典》最大的变动是取消了OIE A类和B类疫病名录的分类,修订为OIE疫病名录,新增加了西尼罗热等8种,收录进以前未列入《法典》的其他疫病如Q热等10种,还删除了嗜皮菌病等9种,以其他疫病名录取代了新版《法典》未列的其他动物疫病名录.因此,OIE疫病名录由原来的82种增加到93种.在疫情通报方面,新版由原A类疫病扩大到所有OIE名录疫病.在地区或区域划分方面,新版根据特定的条件,如疫病流行病学、环境因素、生物安全措施进行"地区划分"和"区域划分".在禽流感方面,新版《法典》禽流感的名称从旧版的高致病性禽流感(HPAI)改为通报性禽流感(NAI),内容由原来的4条增加到23条.     

2008年北京奥运会马术比赛（香港）及其检验检疫措施

2008年北京夏季奥运会马术比赛将于2008年8月9日-20日在香港举行。金牌本届的马术赛事共设三项颁发六枚金牌:障碍赛(个人、团体)、盛装舞步赛(个人、团体)、三日赛(个人、团体),届时将有200对骑手和马匹组合参赛。奥运会马术比赛原定在北京乡村赛马场举行,但北京现有条件很难符合奥运会马术比赛的要求,国际奥委会、北京奥组委和国际马联协商后决定将马术比赛改在香港举行。中国运动员首次在盛装舞步、三项赛和场地障碍赛全部三个小项上都获得了参赛席位。参赛马匹隔离时间将由上届的"14+14天"缩减至"7+10天",即在马匹原居地隔离7天,到港后再隔离10天后才允许参赛。     

实时定量PCR技术及其在水生动物研究中的应用

<专刊>= <栏目>=研究论文 <图片>= <表格>= <连载>= <来源>= <中图分类号>=Q7 <主题分类>= <行业分类>= <本刊专题>= <本刊编号>=1005-8737-(2007)07-116-07 <基金项目>=国家质量监督检验检疫总局基础项目(2006IK003). <注释>= <参考     

新城疫病毒分离株的蚀斑纯化及影响蚀斑形成的主要因素

从西北地区1979～1999年发生新城疫的鸡群中分离和收集的15株新城疫病毒(NDV)，经蚀斑纯化，共得到11个克隆毒株；对其进行了蚀斑形成能力的测定，证明蚀斑形成能力与毒力成正比；探讨了温度对蚀斑形成能力的影响，证明NDV蚀斑形成能力在41C比37C强，表现为蚀斑出现早、蚀斑大、蚀斑形成单位(PFU)高，同时在41C时细胞生长状况良好，不易污染，故认为在41C进行NDV的蚀斑纯化值得推荐。     

应用分子生物学方法快速检测根癌土壤杆菌

根据根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）VirC2基因序列,设计并合成了特异性PCR检测引物,对根癌土壤杆菌及感病植物的肿瘤组织进行了PCR扩增反应.结果表明,根癌土壤杆菌及植物肿瘤组织的PCR产物均出现500bp的特异性扩增条带,而非根癌土壤杆菌均未出现扩增条带,证明这对引物具有根癌土壤杆菌鉴定特异性.将分离的根癌土壤杆菌做梯度稀释,测定该检测体系的敏感度.结果表明,此体系可检出105cfu/mL根癌土壤杆菌菌液提取的模板.研究表明,分子生物学方法是一种特异、敏感、快速的根癌土壤杆菌检测方法.     

免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒

为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接“三明治”抗体夹心免疫PCR方法.以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接.充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标.通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1 fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍.