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11.
梨组织中苹果褪绿叶斑病毒的原位RT-PCR检测 总被引:6,自引:2,他引:6
为了建立梨树苹果褪绿叶斑病毒原位RT-PCR检测技术, 用已知带有苹果褪绿叶斑病毒的库尔勒香梨和无病毒实生苗叶片为材料, 利用D IG标记, 研究了香梨病毒的叶片石蜡切片IS-RT-PCR检测技术。包括AMV逆转录酶、dNTPs、RNasin及互补引物浓度对cDNA合成的影响, 退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2+ 、引物浓度及循环次数对原位PCR效果的影响。结果表明: RNasin的用量大于0.2 U·μL-1时,信号强度随着RNasin量的加大而增强; 只有当dNTPs浓度达1.0 mmol·L-1时才能生成一定量的cDNA;AMV浓度在0.3~0.5 U·μL-1均可进行正常的逆转录, 而且在该范围内产物的量随AMV浓度提高而增多; 引物浓度达到0.9μmol·L-1以上时才能进行有效的逆转录, 并且生成的cDNA的量随引物浓度增大而增加。原位扩增ACLSV的cDNA适合退火温度为56℃。循环20~30次可出现较强的蓝色信号, 引物浓度在0.8~1.2μmol·L-1时显色较好; Taq酶浓度为20 U·mL-1以上, 均显示较深的蓝色; Mg2 +浓度为1.5mmol·L-1就可满足原位PCR所需。获得了苹果褪绿叶斑病毒的原位PCR优化检测体系, 利用建立的优化程序对香梨样品进行了检测验证, 取得了很好效果。 相似文献
12.
13.
“三特”对人工和自然感染肝片形吸虫绵羊的驱杀试验 总被引:1,自引:0,他引:1
“三特”(Closantelumsodium)是柳胺类药物中唯一的一个广谱驱虫药[1-2]。据悉[3]对它在驱灭肝片形吸虫成虫在体内外的试验研究中,证实是一种很强的氧化磷酸化解偶联剂。它对绵羊和牛的吸虫、某些线虫和外寄生虫的活性巳有综述[4],其作用之快,在用药后24~48小时即可杀死其成虫,片吸虫的结构在4~8小时即发生变化,在12~24小时细胞受到严重损害,最终生殖器遭到破坏,同时产生严重的代谢紊乱,线粒体的ATP完全耗尽。但是,采用治疗剂量对宿主肝细胞的线粒体不产生影响。本实验研究“三特”防治人工感染不同周龄绵羊的肝片形吸虫和… 相似文献
14.
15.
梨叶片中苹果褪绿叶斑病毒的引物原位标记检测 总被引:1,自引:0,他引:1
选用带苹果褪绿叶斑病毒的香梨叶片,制备成适合进行原位RT-PCR的石蜡切片。设计特异引物,利用引物原位标记技术对切片组织中的病毒进行了检测研究,结果表明,PRINS-FITC染色法和PRINS-Rhodamine染色法均能获得良好的检测效果,有病毒部位分别显示绿色荧光和红色荧光,而且荧光出现的位置与原位RT-PCR检测的结果一致。由此证明引物原位标记技术可用于果树病毒的原位检测。 相似文献
16.
舟曲县在"长治"工程建设中,针对农村"两工"取消、其他建设项目投资标准较高、工程建设发动群众困难和工程建设进展缓慢、建设质量不高等实际问题,推行了"长治"工程建设项目公示制,采用了事前公示、事后公示,做到了公开、公平、公正,使广大群众对水土保持建设项目有了充分的了解,极大地调动了群众投入水保生态建设的积极性,有效地推动了"长治"工程建设向"高、深、细"方向发展。介绍了推行项目公示制的做法及效果。 相似文献
17.
以芒果基因组DNA为模板,采用正交试验对模板DNA含量、引物浓度、2×Taq PCR Master Mix含量进行3因素5水平正交试验优化。结果表明,相关序列扩增多态性PCR(sequence related amplified polymorphism,SRAPPCR)最佳反应体系为:30 ng模板DNA、0.3μmol/L引物、10μL 2×Taq PCR Master Mix,总体积为25μL。运用该体系对10份芒果种质材料进行验证,证明该体系稳定可靠,并从100对引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的36对引物组合。 相似文献
18.
以粉煤灰、膨润土等制备新型粉煤灰陶粒,考察粉煤灰陶粒对溶液中Cu(Ⅱ)的去除特性并进行吸附等温线拟合.结果表明,粉煤灰陶粒对Cu(Ⅱ)的去除主要为吸附过程,对Cu(Ⅱ)的吸附效果与陶粒用量、温度及振荡速度有关,较大的粉煤灰陶粒用量、适宜的温度及振荡有较好的Cu(Ⅱ)去除效果.当温度为25℃、pH4.5及振荡速度150 r/min时,2.00 g粉煤灰陶粒对50 mL溶液中浓度为100 mg/L的Cu(Ⅱ)去除率为100%,而同等条件下两种普通市售陶粒的Cu(Ⅱ)去除率分别只有14.6%、6.3%.陶粒吸附柱可连续4次对250 mL浓度为100 mg/L的Cu(Ⅱ)去除率达90%以上.25℃时粉煤灰陶粒对Cu(Ⅱ)的最大吸附量为2.78 mg/g,其吸附过程符合Langmuir等温式,以Freundlich吸附等温式拟合则相关性较差. 相似文献
19.
20.
滴灌已成为当前菜农增产增收的一项重要技术,大棚滴灌系统由水源、首部枢纽、输配水管网、灌水器(包括滴灌带、滴灌管、滴头等)及其它附件组成。但在实际使用过程中,灌水器常会发生一些故障从而影响系统正常工作。 相似文献