草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立

为更加快速、灵敏地检测草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV),建立环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。根据GenBank中GCRV HZ08等毒株VP6蛋白基因序列设计引物,以GCRV弱毒疫苗株(GCHV-892)总RNA为模板建立RT-LAMP反应,对扩增产物用限制性内切酶PvuⅡ进行酶切鉴定,所得酶切产物大小符合预期值。随后对LAMP反应体系包括Mg2+、dNTPs、甜菜碱(betaine)和内外引物浓度比进行了优化,并以含VP6蛋白基因的重组质粒(pEASY-VP6)为模板考量了该方法的敏感性,结果显示最低检测限为10copies.μL-1,比RT-PCR检测方法敏感10倍。特异性试验表明与白斑综合征病毒(WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)无交叉反应。应用RT-LAMP方法检测16份疑似出血病草鱼,6份病料获得了阳性扩增,与RT-PCR检测结果一致。     

牛蛙主要病害的防治（下）

五、烂皮病1.病因及症状烂皮病又叫脱皮病,蝌蚪、幼蛙、成蛙均可罹患本病。本病是由于缺乏维生素A而引起病菌感染,患病后的蛙体腔积水,内脏器官出现病变,死亡率高达90%以     

嗜水气单胞菌对氟喹诺酮类药物的敏感性及耐药相关基因分析

为明确嗜水气单胞菌临床分离株对常用氟喹诺酮类药物的敏感性和耐药菌株中gyrA和parC基因的突变情况。试验采用自动化细菌药敏分析仪测定4种常用氟喹诺酮类药物对23株鱼源嗜水气单胞菌的最低抑菌浓度,并依据耐药数目的不同选取9株嗜水气单胞菌,PCR扩增其gyrA及parC基因的喹诺酮抗性决定区(QRDR),直接测序后进行多序列比对分析。结果显示:嗜水气单胞菌对诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星和环丙沙星的耐药率依次为8.7%、30.4%、73.9%和43.5%;序列分析发现gyrA基因编码的第83位氨基酸存在Ser→Ile、Ser→Val的突变,parC基因编码的第87位氨基酸同样存在Ser→Ile的突变。表明临床分离的嗜水气单胞菌对恩诺沙星耐药最为严重,氧氟沙星、环丙沙星次之,对诺氟沙星较为敏感;尽管绝大多数耐药菌株的药物靶位基因QRDR区域有突变发生,但是菌株的耐药性与药物靶位基因QRDR区域有无发生突变并不存在线性关联,提示我们药物靶位的变化并非是氟喹诺酮类耐药菌株唯一的抗性机制。     

河蟹颤抖病和腐壳病的防治

一、颤抖病 1．发生与危害颤抖病又称抖抖病、环腿病等。不沽、较肥、污染较大的水质以及河蟹种质混杂或近亲繁殖．放养密度过大．规格不整齐．河蟹营养摄取不均衡等．易发此病．发病初期．病蟹四肢尚能伸直．以后便肌肉萎缩．步足不能回伸．病蟹站立不稳．翻身困难,口吐泡沫,行动无力不能爬行,连续颤抖．无食欲并停止摄食．不脱壳．体内积水．3-4天后即会死亡。     

河蟹蟹权病和蜕壳障碍病的防治

1．发生与危害 蟹奴病义称臭虫蟹病。其病原是一种专门寄生于河蟹腹部（胸板）或附肢上的寄生虫．长约2～5毫米。厚约1毫米,扁平,圆枣状,绿豆大小,乳白色或半透明。它在形态上高度特化．成虫是已完全失去了甲壳类特征的甲壳类寄生虫。蟹奴寄生于河蟹之后,一部分露在宿主体外．呈囊状．     

特种水产动物病害发生特点

由于特种水产动物的生理特点、生态习性和养殖方式与常规鱼类有较大的区别．因此其疾病的发生有相应的特点,疾病的流行规律也与传统的养殖鱼类有较大的不同。只有正确认识它们疾病的特点,有的放矢,才能有效地预防和治疗它们的疾病。     

小龙虾养殖病害综合防治（上）

<正>一、小龙虾养殖病害常规预防养殖病害是机体、病原、环境相互作用的结果。一旦出现严重的病害,往往是缺乏有效的治疗措施而造成养殖小龙虾的大量死亡。因此,必须做好病害的常规预防工作。1.放苗前的池塘清整每年冬季将池塘中多余的淤泥清出,干塘冻晒,每亩选用80～100千克的生石灰或每立方米100克漂白粉彻底消毒。消毒的主要作用是杀灭细菌、病毒等病原体,     

蛭弧菌对异育银鲫养殖塘水质影响的探讨

<正>随着我国规模化养殖方式愈加密集,渔药的大量使用和滥用,质量管理体制衔接脱节,使养殖水产品在数量增长的同时,规模化水产病害问题日益凸显,给中国的水产养殖业造成了严重的损失~([1])。噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)是一类由Stolp等~([2])于1962年首次发现的、原核生物界惟一一类周质型专性捕食性细菌。蛭弧菌能够裂解多种细菌被认为是自然净化生物因子之一,有希望被用于环境中致病菌的生物防治~([3])。并且有研究表明,     

大鲵野生亲代与人工繁育子二代的随机扩增多态DNA分析(英文)

用15个能稳定扩增的随机引物对大鲵亲代与子二代各7个个体进行RAPD分析,结果表明,大鲵人工繁育子二代与野生亲代群体间具有较高的遗传相似度,其平均值为0.9515,这说明子二代群体在基因型上并没有发生明显的变异。遗传相似性和遗传多样性分析的结果表明,大鲵亲代与子二代的平均遗传距离分别为0.0497和0.0166,Shannon多样性指数分别为0.237和0.078,经t检验差异均极显著(P<0.01),这说明大鲵子二代遗传多样性水平低于亲代,因此必须加强谱系建立与繁育管理。