农杆菌介导ODREB2B基因转化马铃薯的研究

以马铃薯品种黄麻子和中薯3号脱毒微型薯为外植体，利用根癌农杆菌介导法，将来源于诸葛菜的抗逆相关转录因子ODREB2B基因导入马铃薯，并对遗传转化的影响因素进行优化。获得抗性植株黄麻子33株、中薯3号27株，经PCR-Southern杂交分析，两品种分别有16株和14株呈阳性，证明ODREB2B基因已整合到马铃薯基因组中。     

高羊茅耐寒突变体的诱发与鉴定

以高羊茅爱瑞3号品种(Festuca arundinacea Schred.cv.AireaⅢ)为材料,以60Co-r射线照射种子和分化苗.结果表明,在辐射当代选出耐寒突变体ARF001-12、ARG001-17和ARG001-16,经电解质外渗率、自然低温条件下束缚水和叶绿素含量测定,其耐寒性明显优于对照,叶根比小于对照,单株生物量低于对照,可作为新的耐寒种质利用;M0、M1代RAPD分析结果表明,其DNA已发生变异.     

草坪虫害生物防治的研究进展

草坪害虫对草坪的建植危害很大,特别是地下害虫的危害可造成草坪的大面积死亡.鉴于化学防治存在很多不足之处,因而生物防治技术被日益提上议事日程.为此概述了草坪主要害虫种类及其危害,以及近年来利用微生物、植物等杀虫剂对草坪害虫的防治,重点讨论了草坪抗虫基因工程所取得的研究进展.     

马铃薯微型薯外植体遗传转化体系的优化

以马铃薯品种黄麻子为试验材料,通过根癌农杆菌(Agrobacterium)介导法,将来自耐旱物种厚叶旋蒴苣苔的蓝铜蛋白类似基因BeBCP1导入马铃薯,同时对影响遗传转化的因素进行优化.结果表明:高效稳定的遗传转化体系培养基为Ms+zT 4.0mg/L+IAA 1.Omg/L,农杆茵茵液浓度OD600=θ.5,侵染5min,共培养2d,脱茵抗生素选用进口头孢噻肟钠150mg/L.获得35株抗性植株,PCR检测表明其中14株为阳性,其中6株Soutllem杂交呈阳性,证明脚BcBCP1基因已整合到马铃薯的基因组中.利用该体系,分别将抗病、抗虫和抗逆基因转入马铃薯品种东农303和克新13号中,抗性出芽率平均达到119.8%,遗传转化率平均达55.3%.     

一种绿色木霉纤维素内切酶基因的克隆及其定点突变对酶活力的影响

纤维素资源是地球上最丰富的可再生资源,纤维素酶的酶活力和生产成本制约着纤维素的利用.本研究从多年户外放置的朽木(Populus bonatii)中分离出一株真菌G-1,经18S rDNA序列分析鉴定为绿色木霉(Trichoderma viride).从G-1中分离出一种纤维素内切酶基因(endoglucanase,EG;GenBank登录号:HM116999.1).通过重叠引物延伸法对EG进行定点突变,得到一个突变序列EG-mut,将EG和EG-mut分别插入分泌型表达载体pPIC9K,并导入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris),筛选到两个菌株,经刚果红染色和DNS法对酶活性测定,显示其内切酶的活性分别达到20.915 U/mL和24.110 U/mL,酶活力高于本实验中得到的其它重组菌株.结果表明某些定点突变可以揭示影响酶活的重要功能域.     

番茄转果聚糖合酶基因获得抗寒植株

 从枯草芽孢杆菌毖Bacillus subtilis中分离克隆果聚糖合酶(levansucrase)基因sacB,构建置于CaMV35s启动子调控下的表达载体,通过农杆菌介导,将sacB基因导入番茄栽培品种碧娇。Southern杂交证明,目的基因已经整合到番茄基因组中。RT-PCR分析表明,sacB基因在转基因植株中获得转录。在含50mg·ml-1卡那霉素生根培养基中转化植株生根良好。抗冻试验、叶片电导率测定、多糖含量测定的试验结果均表明,果聚糖合酶基因赋予转基因番茄良好的抗寒性状。     

GA_3诱导时间及诱导后不同培养条件对匍匐剪股颖愈伤组织形成的影响

为了使基因工程中剪股颖愈伤组织发挥更好的效果,以冷季型草坪草剪股颖的成熟种子为研究材料,通过改变不同培养基添加物、添加不同质量浓度的2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）等,研究了在不同培养条件下GA3诱导对剪股颖愈伤组织形成的影响。结果表明：不论在何种培养条件下,均以经50 mg.L-1 GA3溶液中浸泡4 d的愈伤组织...     

葡萄糖氧化酶基因对桉树的遗传转化

桉树(Eucalyptus spp.)为桃金娘科(Myrtle family)桉属,以其生长快、适应性强、用途广而被世界上百余个国家和地区广泛引种栽培.由于它是目前世界上重要的木纸浆原材料之一,在我国南方地区正以每年营造8万～10万hm2的速度发展,在我国造纸的木桨生产中有着极其重要的位置.     

Leafy启动子控制下5-烯醇式丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合酶基因(CP4EPSPS)的表达增强芽对草甘膦的抗性

抗草甘膦基因在转基因植物体内持续高效表达,不但增加植物代谢压力,有的甚至改变植物形态造成植物的生长发育畸形。为了减少转基因植株的代谢负担和能源浪费,从拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)基因组中克隆了Leafy组织特异性启动子替代CaMV35S启动子,用其驱动改造后加二磷酸核酮糖羧化酶(rubisco)小亚基引导肽的5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合酶(CP4EPSPS)基因,同时调控报告基因gus的编码区构建植物表达载体p3300-Leafy-gus和p3300-Leafy-CP4EPSPS,嵌合基因经农杆菌(Agrobacterium)介导转化烟草。稳定表达后经GUS组织染色分析表明,Leafy驱动的gus表达仅局限在植物茎尖和幼叶部分,转基因植株成熟的叶片、茎部和根系均未能检测到GUS活性。草甘膦试验分析表明,Leafy驱动的CP4EPSPS的转基因植株幼芽部位有草甘膦抗性。结果表明,Leafy启动子驱动CP4EPSPS表达增强植株芽端对草甘膦的抗性。     

转基因草坪草的研究概况与展望

通过转基因技术在草坪草改良中应用的介绍,得出:采用现代基因工程来改良草坪草有巨大的商业潜力,草坪植物的组织培养和再生系统的建立为DNA的直接转移和农杆菌介导的转化提供了条件;遗传修饰的草坪草改善了其抗旱、抗高(低)温、抗病、抗除草剂和耐践踏的特性;携带异戊烯基转移酶基因的草坪草表现出分蘖力加强,严冬绿期延长;在期望利益的同时,应注意评估转基因草坪的生物安全性问题.