香橙苹果酸脱氢酶CjMDH基因表达特性及转基因烟草的耐铝分析

为研究柑橘砧木香橙对酸性土壤的适应机理,从‘资阳香橙’根cDNA文库中随机测序克隆了苹果酸脱氢酶基因CjMDH（Genbank Accession No. ABI75147）。该基因cDNA序列长1 368 bp,其开放阅读框为1 239 bp,推测其编码412个氨基酸残基,在编码氨基酸序列中存在苹果酸脱氢酶的NAD结合位点1个和苹果酸结合位点8个,iPSORT分析表明该基因编码氨基酸序列N端存在叶绿体转移肽。同源性分析显示CjMDH与拟南芥、烟草、大豆、豌豆、水稻、苜蓿等植物的MDH一致性约为80%,相似性在85%以上。在与苹果酸脱氢酶功能有关的NAD和苹果酸结合位点处氨基酸残基高度保守,表明这两个区域是MDH重要的功能区。Northern blot和Real Time RT-PCR分析结果表明该基因在香橙根和叶中优势表达,在根中表达量最高,茎中表达最低。将CjMDH基因构建到组成性启动子CaMV35S驱动的载体中,对烟草进行转化。从转基因烟草株系中筛选获得了CjMDH基因高表达的株系3个。将表达量高的转基因株系进行耐铝试验,初步结果表明在烟草中超量表达CjMDH,可以提高植株对铝毒的耐受能力。     

柴胡治疗猪感冒症的临床观察

目的:观察和分析柴胡在猪感冒症治疗中的临床效果.方法:选择猪场需要接受治疗的12例具有感冒症的猪为研究对象.随机分成两组,对照组6例猪给予针疗治疗,实验组则采取散剂疗法进行治疗,观察两组患者的粪便改善、食欲恢复情况、体温调节情况.结果:实验组与对照组的综合治愈率为83.3％,且实验组散剂疗法对猪的肠道、肾、肝功能调节、整复的效果优于对照组针剂治疗方法,而对照组针疗在退烧效果方面具有更快的优点.结论:柴胡在猪感冒症治疗中的效果显著,可以有效缓解猪的病情,值得参考.     

玉米几丁质酶基因导入甘蓝型油菜的研究

以甘蓝型油菜（Brassica napus L.)下胚轴为转化材料,通过根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens)介导将玉米几丁质酶基因（Maize Chitinase gene)导入双低油菜品种D2中,获得了抗卡那霉素（Kanamycin Kan)的再生植株,并对影响遗传转化的一些因素进行了研究。结果表明：适当的预培养对油菜下胚轴的遗传转化是必要的;油菜下胚轴遗传转化过程中的过敏反应可通过一些措施缓解;延迟筛选可提高油菜下胚轴的转化率。对抗性植株进行PCR检测表明：部分抗性植株在多次重复检测中的均显示较强的阳性反应,初步证明外源基因已整合到油菜基因组中。     

农杆菌介导法将FPFJ基因导入油菜的研究初报

将拟南芥早花基因FPFI(flowering promoting factor 1)插入双元高效表达栽体pBI 121中,构建了植物表达载体pBIUbi-FPFI.以"双低"甘蓝型晚熟油菜品种2000F4102,2000F4153的下胚轴为转化受体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素.对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测,其中70%以上的卡那霉素抗性植株表现阳性,初步证明FPFI基因已整合到油菜细胞核基因组中.     

香橙和枳的三价铁螯合还原酶诱导研究

三价铁螯合还原酶是植物吸收铁过程中非常重要的酶。在田间表现耐缺铁的香橙在缺铁胁迫下,三价铁螯合还原酶活性在胁迫4周时即达到最强,增加约20倍;而在田间表现极易缺铁的枳在铁胁迫4周时,三价铁螯合还原酶活性仅增加约3倍。香橙根系在铁胁迫前后分泌质子的能力增显著强于枳。表明三价铁螯合还原酶对香橙忍耐缺铁起着非常重要的作用,并且香橙具有很强的调节微根际环境PH的能力。     

高效液相色谱法分离纯化小皱蝽抗菌肽AMP-1

用昆虫生理盐水浸提小皱蝽成虫,浸提液冻干后,酸提取法制备粗提液,固相萃取（SPE）初分级分离,活性洗脱组分反相高效液相色谱（RP－HPLC）纯化,进一步凝胶渗透色谱（GPS）及反相高效液相反谱（RP－HPLC）纯化,分离得到一抗菌肽,茚三酮反应黄色,命名为AMP－1。在190nm-225nm短波紫外区,AMP－1有紫外吸收。     

棉花中一个钝叶醇14α-脱甲基酶基因同源基因（GhCYP51G1）的克隆、序列特征和表达分析

为研究植物固醇在棉花纤维细胞生长发育中的作用和信号传导机制,通过筛选棉花EST数据库并对目标EST序列进行整合和分析,从陆地棉栽培品种徐州142正在发育的纤维中克隆了植物固醇合成途径的重要酶基因——钝叶醇14α-脱甲基酶基因的同源基因,命名为GhCYP51G1 (GenBank登录号为EU727154)。该基因编码486个氨基酸残基,其分子量和等电点分别为55.2 kD和8.87。推导的氨基酸序列与烟草、马铃薯和葡萄等物种中CYP51家族成员有较高的同源性。而且具有钝叶醇14α-脱甲基酶序列中的典型保守结构域,如多个底物结合位点和血红素结合域。说明该克隆基因是钝叶醇14α-脱甲基酶基因的同源基因。实时定量RT-PCR的结果表明GhCYP51G1基因在快速伸长期的纤维中具有较高的表达水平,而在子叶、雌蕊和雄蕊以及开花后6 d胚珠、开花后0 d和2 d的胚珠纤维中表达水平较低。在开花后8 d的纤维细胞中GhCYP51G1的表达水平最高,这些结果说明该基因在纤维细胞的伸长生长中具有重要作用。同时在纤维生长过程中,由于生长素能够下调GhCYP51G1基因的表达,暗示植物固醇在植物激素,特别是油菜素类固醇物质和生长素的相互作用中具有一定作用。     

大麦β-1,3-葡聚糖酶基因表达载体的构建及其对马铃薯的遗传转化

在获得经大麦白粉病诱导的β－１,３－葡聚糖酶ｃＤＮＡ基因的基础上,构建了该基因的植物表达载体ｐＢｉｎｈ－Ｇｌｕ,采用农杆菌介导的方法将其转化进入马铃薯,获得了经含有卡那霉素的选择培养基筛选的转基植株,通过ＰＣＲ扩增验证,马铃薯基因组中含有大麦的β－１,３－葡聚糖酶ｃＤＮＡ基因。     

金堂黑山羊杂交改良修水黑山羊效果研究

选择40头体况相近的修水黑山羊母羊,分组与金堂黑山羊进行杂交改良,结果显示,杂交一代初生重、1月龄、3月龄和12月龄体重分别提高28.6%、30.1%、32.64%和31.12%,表明金堂黑山羊改良修水黑山羊效果显著,值得推广。     

山羊常见寄生虫病的防治

<正>山羊的主要疫病危害是寄生虫病。2010年3—5月份我县分乡(镇)抽样调查60个专业大户,120头山羊,感染体内寄生虫的比例是100%,其中同时感染2种以上寄生虫的有62%,同时感染3种以上寄生虫的占56%。山羊发生寄生虫病,轻则吃料不长、