表达大豆GMCHI基因能够提高原核生物对耐低温性

低温是种子萌发过程中常见的自然灾害，在我国北方经常发生，导致种子萌发率较差、降低植株活力等后果。利用cDNA-AFLP技术从低温(4℃)吸胀24 h的抗低温吸胀大豆品种中黄22 (低温吸胀24 h对萌发率无影响的品种)中分离出一个基因片段，命名为GMCHI (GenBank No. EU699765)，通过RACE方法得到全长为387 bp的cDNA序列。在NCBI数据库中的查询表明， GMCHI基因和数据库记录的基因序列同源性较低，因此可以断定GMCHI是在大豆中被发现的新基因。半定量RT-PCR显示GMCHI受ABA和PEG诱导。该基因与PET30A连接后转入原核细胞，经过IPTG诱导，6% SDS-PAGE电泳条带说明，GMCHI在大肠杆菌中能够表达。把诱导表达和非诱导表达的菌落在–20℃下2 h后，移至37℃培养20 d，发现对照的菌落完全死亡，而诱导表达GMCHI的菌落只有部分死亡，并长出新菌落。RT-PCR检测表明新菌落携带GMCHI基因，证明GMCHI基因在大肠杆菌中的表达提高了低温耐性。     

与黄瓜雌性性状连锁的cs-acs1g基因特异片段克隆与鉴定

【目的】快速、准确划分出黄瓜雌性系是蔬菜育种工作者面临的重大任务，为了弥补目前物理方法鉴定的缺陷，本试验开展分子水平上鉴定的研究。【方法】从GenBank中查找到cs-acs1g基因序列，根据该序列设计两对引物，然后从黄瓜（C0208）雌性系材料中克隆2个基因片段，利用PCR扩增方法及田间调查手段相结合，验证cs-acs1g基因的2个片段和雌性系之间的相互关系。【结果】cs-acs1g基因的1 013 bp片段为黄瓜(Cucumis sativus L.)雌性系所特有，非雌性系没有此片段，而cs-acs1g基因的540 bp片段无品种特异性。【结论】利用雌性系特异基因进行植株鉴定可以应用到实践中，是一种简便、快捷的可取方法。     

莲藕根状茎膨大相关基因的挖掘与表达分析

 研究发现，莲藕根状茎干物质、可溶性糖及可溶性蛋白含量随着根状茎发育而逐步增加，尤其在根状茎发育后期含量增加更加明显。在此基础之上，利用转录组测序技术，归纳并分析 86个可能与莲藕根状茎膨大相关基因，分别为35个激素诱导蛋白基因、4个光诱导蛋白（MADS-BOX）基因、11个根状茎贮藏蛋白基因（Patatin）、35个与淀粉代谢相关基因以及1个与根状茎形成相关基因。数字基因差异表达谱研究结果表明，根状茎贮藏蛋白家族基因（Lrplp6、Lrplp9、Lrpfp1、Lrprp、Lrpfp2、Lrplp4、Lrplp5、Lrplp8、Lrpp、Lrplp2）和淀粉合成相关基因（Lrgbss、Lrsbe1、Lrsbe2、LrsbeII、LrsbeIII）在根状茎形成后期表达量高，表达丰度均为初期的3倍以上，而其他基因变化相对较小。半定量RT-PCR结果进一步证明上述数字基因差异表达谱结果的可靠性，同时也表明Lrplp8和Lrgbss的表达与根状茎膨大具有高度相关性。由此认为，上述10个贮藏蛋白合成相关基因和5个淀粉合成相关基因，尤其Lrplp8和Lrgbss，对莲藕根状茎的膨大起到重要作用。     

莲藕可溶性淀粉合成酶基因LrSSS的克隆与表达特性分析

以莲藕品种‘美人红’叶片为试材,利用RACE结合RT-PCR技术克隆得到全长4 080 bp的莲藕可溶性淀粉合成酶基因（LrSSS）cDNA序列（GenBank登录号：KP201636）,其中开放阅读框3 696 bp,编码1 231个氨基酸;该序列与甜瓜、葡萄SSS基因编码氨基酸序列同源性较高,分别达79%、69%。LrSSS 所编码的氨基酸序列包含3个典型的碳水化合物结合结构域（CBM_25）和1个淀粉合成酶催化域（Glyco_transf_5）。LrSSS 表达分析表明,莲藕根状茎膨大具3节段时,在终止叶叶片中的表达量最高,其次为后把叶叶片,终止叶叶柄表达量最少;在根状茎膨大至4节段时,LrSSS在第1、2节段根状茎中表达量较高,在第3、4节段根状茎中表达量较低,表明在第1、2节段根状茎形态基本建成后LrSSS在调控产物转化为淀粉过程中可能起到重要作用。     

激素和叶面剪除对莲藕实生苗不定根形成及POD活性的影响

利用不同浓度的生长素(IAA)、生长素运输抑制剂(TIBA)、乙烯利、乙烯利合成前体抑制剂(1-MCP)及叶片剪除处理莲藕实生苗,研究生长素、乙烯利和叶面剪除处理对莲藕实生苗不定根形成和过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明,15、75、125μmol/L IAA均能促进莲藕实生苗不定根的形成,而175μmol/L IAA具有显著的抑制作用;利用5、10、15μmol/L TIBA处理实生苗后,不定根形成的时间延迟,其中15μmol/L TIBA的抑制效果显著;200、300 mg/L乙烯利显著促进莲藕实生苗不定根形成,而100 mg/L乙烯利的促进效果不显著;200、300 mg/L 1-MCP能够显著抑制实生苗前期不定根的数量和发生率;与对照相比,叶片水面以上剪除处理能够显著促进实生苗不定根的形成,而水面以下剪除处理对不定根的形成具有显著的抑制作用。经过乙烯利和生长素处理后,实生苗POD活性在24 h内呈现先升高后降低的趋势,水面以上剪除处理植株POD活性在处理后3 d内显著低于水面以下剪除处理的植株。综上所述,乙烯利、生长素和叶面剪除处理均显著影响莲藕实生苗不定根的形成,本研究为莲藕实生苗生产及育种工作提供了坚实的理论基础。     

黄瓜cs-acs1g基因克隆及不同时空表达的研究

 在cs-acs1g基因克隆的基础上进一步研究了此基因不同发育阶段表达状况, 结果表明: 没有经过生长素处理, cs-acs1g基因在苗期1～5片叶中不表达, 与利用乙烯利、赤霉素等处理的材料效果相同,使用一定浓度生长素处理之后, 此基因在两叶期开始表达, 并且随着处理的次数增加而增加; cs-acs1g基因在黄瓜不同部位表达状况不同, 在根尖、茎尖生长点表达强, 在果实和腋芽中表达很弱。因此, 黄瓜cs-acs1g基因存在不同时空表达的差异。     

大棚早熟莲藕—夏黄瓜—水芹水旱轮作栽培技术

随着我国设施蔬菜栽培面积的迅速扩大,设施内连作及过量施用化肥,已出现严重的土壤次生盐渍化、病虫害重发等连作障碍问题[1-3].人们通过土壤日光消毒、轮作换茬、无土栽培、嫁接换根等技术缓解了部分连作障碍的影响,但这些措施的实行均具有一定的局限性,难以真正解决设施连作障碍问题[4-6].     

利用EPR技术快速预测不同含水量杜仲种子的玻璃化转变温度

 【目的】本试验基于玻璃态理论，利用电子顺磁共振（Electron Paramagnetic Resonance，EPR）波谱技术快速预测杜仲种子的最适贮藏条件。【方法】以3-carboxy-proxyl（3-羧基-2，2，5，5-四甲基吡咯烷-1-氧）探针标记杜仲种胚，利用EPR技术扫描不同含水量种胚在不同温度下的EPR波谱，选用波谱参数2Azz的变化作为反映分子运动快慢的指标，以温度为横坐标，2Azz为纵坐标作图，得到温度-2Azz关系曲线，2Azz发生大幅度变化时所对应的温度就是玻璃化转变温度。【结果】含水量为4.4%、5.7%、8.6%、10.3%、11.6%杜仲种胚的玻璃化转变温度分别约为44℃、25℃、4℃、-31℃、-43℃。试验所得出的含水量-玻璃化转变温度曲线可以用来预测种子的最适贮藏条件。【结论】利用EPR技术测定杜仲种胚的玻璃化转变温度，通过含水量-玻璃化转变温度曲线可以较快捷准确地预测其种子最适贮藏条件。     

设施草莓与莲藕—水蕹菜轮作高效栽培模式

草莓设施长季节栽培效益较高，但生产上连作障碍问题严重。实行草莓与莲藕或与水蕹菜轮作，可有效减轻连作障碍，经济效益显著。     

蔬菜水旱轮作模式的研究应用进展

设施栽培是我国蔬菜的重要生产方式,对保障我国蔬菜供应起着举足轻重的作用,其栽培面积也由20世纪80年代末的6万hm2增长到21世纪初的368万hm22[1,2].同时,自主经营政策的落实、我国人口众多所形成的强大市场以及大量的农村富余劳动力,进一步为我国设施蔬菜产业的发展提供了条件[3].