MDRV P10基因的克隆、分析及蛋白质结构预测

参考Gen Bank中番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)S4基因序列,设计合成一对非结构蛋白P10基因的特异性引物,以MDRV-YB株病毒RNA为模板进行RT-PCR扩增,并将目的基因克隆到PGEM-T载体,提取质粒测序.对测序结果进行遗传进化树分析和生物信息学软件预测、分析蛋白质结构和功能.结果表明,MDRV-YB株病毒的P10蛋白基因开放阅读框(ORF)全长为288 bp,编码95个氨基酸.核苷酸比对结果表明,与标准株法国MDRV-89026株同源性为95%,而与ARV-S1133株氨基酸同源性仅为21.9%.运用Prot Param tool软件对番鸭呼肠孤病毒的P10蛋白分析结果表明,该蛋白分子质量为10.7 ku,不稳定系数为52.37,不存在信号肽和糖基化位点,有4个丝氨酸和1个络氨酸的磷酸化位点.此外,MDRV的P10蛋白为疏水性蛋白,但不存在跨膜区,这与禽呼肠孤病毒(Avian reo virus,ARV)的P10蛋白具有较大差异.二级结构分析表明,MDRV-YB株的P10蛋白与ARV-S1133株P10蛋白相比,α-螺旋和无规则卷曲减少,β-折叠则增加.因此,MDRV-YB株的非结构蛋白P10不仅在基因水平上发生了较大的变异,而且在蛋白质性质与结构上也发生了较大的变异,其与该病毒毒力的增强可能存在一定的关系.     

番鸭小鹅瘟的诊治与综合防治

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的一种急性或亚急性败血性传染病,引起急性死亡,传染快、发病率高、死亡率高,严重下痢,其特征性病理变化为出血性、纤维素性、渗出性坏死性肠炎.     

一例番鸭霍乱的诊治

该文报道了一例白羽番鸭霍乱，通过临床观察、剖检和实验室检查进行确诊，提出了治疗方案，得到了有效控制。但同群同饲的莆田黑鸭零发病。     

发酵脐橙粕对番鸭肠道形态结构、肠黏膜免疫功能和微生物多样性的影响

【目的】通过研究发酵脐橙粕对番鸭肠道形态结构、肠黏膜免疫功能和微生物多样性的影响,探究发酵脐橙粕用于番鸭节粮养殖的可行性。【方法】选取健康、体重为(267.33±9.50)g的180只16日龄番鸭,随机分成2组(每组公母各半),每组6个重复,每个重复15只,对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂含有100 g/kg发酵脐橙粕的基础饲粮,预饲期7 d,正式试验期48 d。试验结束后,采集番鸭十二指肠组织样品和盲肠内容物。通过HE染色法和免疫组化法检测十二指肠肠道形态学指标和肠黏膜免疫功能指标;采用高通量测序技术对盲肠内容物的微生物16S rDNA进行测序,分析盲肠微生物多样性变化情况。【结果】①与对照组相比,100 g/kg发酵脐橙粕可极显著提高番鸭十二指肠的绒毛高度(P＜0.01),显著提高绒毛表面积和上皮内淋巴细胞阳性率(P＜0.05)。②显著物种差异分析结果显示,与对照组相比,饲喂100 g/kg发酵脐橙粕饲粮极显著抑制了番鸭盲肠脱铁杆菌门、厌氧菌科和无胆甾原体等有害菌丰度(P＜0.01),极显著提高了黄杆菌属、螺杆菌属和巨单胞菌属等有益菌的丰度(P＜0.01);功能预测分析结果显示,与对照组相比,饲喂100 g/kg发酵脐橙粕饲粮能够显著抑制盲肠微生物KEGG代谢通路中萜类化合物和聚酮类化合物的代谢(P＜0.05)。【结论】饲喂含有100 g/kg发酵脐橙粕饲粮不仅能有效改善番鸭肠道形态结构,增强肠道黏膜免疫功能,还具有调节肠道微生物多样性和代谢的作用。     

黑羽番鸭10周龄血液生化指标及屠宰性能相关性分析

笔者对18只10周龄母黑羽番鸭的血液生化指标以及其屠宰性能相关关系进行了研究,得出丙氨酸氨基转氨酶（ALT）与全净膛率以及胸肉率呈显著负相关关系,与肝率呈显著正相关关系,与腺肌胃率呈极显著正相关关系;碱性磷酸酶（ALP）与半净膛率、全净膛率以及胸肉率呈极显著负相关关系（P<0.01）,与腺肌胃率呈极显著正相关关系;超氧化物歧化酶（SOD）与屠宰率呈显著正相关关系,与全净膛率呈极显著正相关关系,与腺肌胃率呈显著负相关关系;白蛋白（ALB）与活体重呈极显著正相关关系,与屠宰率呈显著正相关关系;高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与屠宰率呈极显著正相关关系,与胸肉率呈显著正相关关系,与腺肌胃率呈显著负相关关系;低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）与胸肉率呈显著正相关关系,与腺肌胃率呈显著负相关关系。所以,可以通过对ALT、ALP、SOD、ALB、HDL-C、LDL-C进行标记,从而选育产肉率高的黑羽番鸭。     

重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗对麻鸭和番鸭免疫效果观察

为评价重组禽流感病毒三价灭活疫苗（H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 Re-2株）对麻鸭和番鸭的免疫特性,优化商品麻鸭和番鸭养殖场禽流感免疫程序,开展了麻鸭、番鸭现场免疫试验。以推荐的免疫程序和剂量分组免疫21日龄麻鸭和番鸭,免疫后定期采血测定抗体效价。结果显示：一免组麻鸭在35、49、63日龄产生的H5N1（Re-11、Re-12株）和H7N9 Re-2株HI抗体效价均低于5.70log2,抗体合格率为73%~89%;二免组麻鸭针对三种抗原的抗体滴度均大于6.00log2,抗体合格率均大于86%。一免组番鸭在35日龄的H5N1（Re-11、Re-12株）和H7N9 Re-2株HI抗体效价和合格率分别为5.54log2和90%,5.61log2和90%,5.63log2和90%;49日龄分别上升至6.01log2和100%,6.07log2和100%,6.15log2和100%;63日龄分别为5.66log2和100%,5.79log2和100%,5.81log2和100%;二免组番鸭在35~63日龄时,各毒株抗体滴度都较高,抗体效价均高于6.40log2,抗体合格率均为100%。对照组麻鸭与番鸭在35、49、63日龄抗体合格率均较低。结果表明,二次免疫可增强免疫保护效果。本研究为广大养殖户制定水禽高致病性禽流感免疫程序提供了数据支撑。     

SLC12A9、GNG2基因在正常与啄羽番鸭不同组织中的表达差异分析

为探究基因溶质载体家族12成员9(SLC12A9)、G蛋白Y2亚基(GNG2)在正常番鸭(不具有啄羽行为)表达量最高的组织及是否与番鸭啄羽行为相关,本研究共选取27只番鸭,分为9组,每组3个重复,其中选取正常番鸭3组,采集心、肝、脾、肺、肾、胰、肌胃、腺胃、大脑、小脑、视丘11个组织,进行实时荧光定量PCR分析其在各组织表达量差异性。结果显示:在mRNA表达量数值上,SLC12A9基因在番鸭心脏组织中的mRNA表达量最高,极显著高于其他组织,在肌胃中的mRNA表达量最低(P<0.01);GNG2基因在番鸭小脑组织中的mRNA表达量最高,其次是视丘,小脑与视丘组织均极显著高于其他组织,在肌胃中的mRNA表达量最低(P<0.01)。另外选取啄羽与正常番鸭各3组采集大脑组织,进行实时荧光定量PCR,分析基因SLC12A9、GNG2在正常番鸭与啄羽番鸭大脑组织的表达差异,结果表示:SLC12A9、GNG2基因在正常番鸭与啄羽番鸭的大脑组织均有表达,在mRNA表达量数值上,SLC12A9基因在正常番鸭的第3组mRNA表达量最高,极显著高于其他组,GNG2基因在啄羽第3组具有最高mRN...     

白羽番鸭ApoVLDL-Ⅱ基因内含子1的克隆及其多态与生长、肉质和脂肪性状的关联分析

以10周龄白羽番鸭为材料,对ApoVLDL-II基因内含子1进行克隆和SSCP检测,并分析其多态与生长、肉质和脂肪性状的关系。结果表明:白羽番鸭ApoVLDL-II基因内含子1序列全长1 362 bp,与家鸭和鸡的同源性分别为93.6%和69.2%;经SSCP分析,仅A4位点检测到多态,共3种基因型,序列比对发现在770 bp碱基之后插入/缺失1个AAAATCTTGTTTA序列和803 bp处发生A→G突变,该位点属中度多态,并偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.05);关联分析显示,CC基因型个体的pH和胸肌水分显著低于DD基因型的(P<0.05),肌内脂肪(IMF)、血清甘油三酯(TG)和血清胆碱酯酶(ChE)则显著高于DD型的(P<0.05),CD基因型个体的胸肌水分显著低于DD基因型的(P<0.05),其他性状各基因型间的差异均不显著(P>0.05)。由此推测,白羽番鸭ApoVLDL-II基因内含子1的多态可能对肉质和脂肪代谢有着重要影响,CC基因型可能是脂肪沉积的有利基因型。     

番鸭细小病毒病防制技术

(一)病原和流行该病的病原是细小病毒,主要存在于病鸭的肝脏、胰腺、脾脏和成年鸭带毒者中。该病一年四季都可发生,但以秋、冬、春季发病最多,自然情况下主要感染3周龄以内的雏番鸭并致发病、流行。成年鸭可染毒,但不会发病,成为带毒源。病鸭、带毒成年鸭和孵化场等是主要的传染源。该病多呈地方性流行,病程2～5天。(二)病症出壳2天以内的雏番鸭常为最急性型发病,多没有先期症状,病鸭突然衰竭、倒地、两脚乱划,头颈向一侧扭曲,很快死亡。     

番鸭精液测定及人工授精技术研究

传统养鸭公母鸭配比正常,且鸭大多放牧于水塘、湖泊,适合于自然交配,因此鸭的种蛋受精率高。20世纪80年代前,鸭人工授精在生产中应用很少。但随着养殖规模的日益扩大,一方面公鸭留种数量增多,饲养公鸭的负担增加;另一方面,规模饲养大多以圈养结合运动场的方式,没有水塘、