橘小实蝇谷氨酸脱羧酶的生化及分子特性

【目的】在测定橘小实蝇（Bactrocera dorsalis）γ-氨基丁酸（GABA）含量和谷氨酸脱羧酶（GAD）活性的基础上,克隆获得橘小实蝇GAD基因（BdGAD1）全长序列,进一步解析GABA、GAD以及BdGAD1在橘小实蝇各发育阶段、成虫不同体段以及经阿维菌素刺激后的表达模式,分析橘小实蝇GAD对阿维菌素作用的应激反应,为系统解析GABA介导的阿维菌素抗药性机制提供基础数据。【方法】采用高效液相色谱法测定橘小实蝇体内GABA含量,分析阿维菌素刺激对GABA含量的剂量和时间效应;以谷氨酸为底物,采用微量滴度酶标板法测定橘小实蝇经阿维菌素刺激后GAD活力的变化;通过同源序列比对的方法,从橘小实蝇转录组数据中筛选出1条GAD基因片段,利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得该基因的全长cDNA序列;应用生物信息学分析软件对该基因的开放阅读框、编码的氨基酸序列、分子量等信息进行预测,并基于最大似然法构建该基因与其他昆虫相关基因序列的系统发育树,明确其系统进化关系。此外,分别提取橘小实蝇各发育阶段和成虫不同体段的RNA,以表达稳定的α-Tubulin为内参基因,应用qPCR技术,解析BdGAD1在橘小实蝇各发育阶段（卵、幼虫、蛹和成虫）和成虫不同体段（头、胸、腹）以及经阿维菌素刺激后的表达模式。【结果】经阿维菌素刺激后,橘小实蝇体内GABA含量升高,且与阿维菌素剂量及处理时间呈正相关,暗示橘小实蝇可能通过调节GABA含量以抵御阿维菌素的毒害。同时,橘小实蝇体内GAD的比活力也随药剂剂量增加而升高。通过RACE扩增,获得了橘小实蝇BdGAD1的cDNA全序列,长度1 755 bp,开放阅读框1 197 bp,编码398个氨基酸,GenBank登录号为KC763804。基于最大似然法构建的系统发育树显示,该基因编码的蛋白质与冈比亚按蚊的GAD亲缘关系最近,序列一致性高达97%。qPCR分析结果表明,BdGAD1在幼虫期表达量最高,不同体段间相比较发现该基因在成虫腹部的表达量最高。经阿维菌素刺激后,BdGAD1表达水平上调。【结论】BdGAD1的表达具有发育阶段和体段特异性。阿维菌素能够刺激橘小实蝇体内BdGAD1表达水平上升,进而引起GAD活力增加促使虫体合成产生大量的GABA,这可能是橘小实蝇抵御阿维菌素毒害甚至产生抗药性的原因。     

紫茎泽兰入侵对弃耕荒地植物群落多样性的影响

在四川省德昌县弃耕荒地紫茎泽兰入侵区,开展植物群落的结构、物种组成及其多样性调查,并与紫茎泽兰种群结构特征进行了比较.结果表明:紫茎泽兰轻度发生区植物群落多样性指数年际变化不大,介于0.550 1~0.683 3之间;中度发生区多样性指数年际变化最大,介于0.333 5~0.639 3之间;重度发生区已经形成紫茎泽兰单优群落;轻度发生区紫茎泽兰的生长扩散速度较慢,种群多为零星丛状分布,1 a后密度从3株/m2增至8株/m2,盖度从5%扩大到10%;中度发生区紫茎泽兰密度从32株/m2增至次年的103株/m2,盖度从35%扩散至90%以上;重度发生区域的紫茎泽兰的盖度、密度以及株高等均已达到最大,同期伴生植物极少.     

紫茎泽兰生殖生长期叶片矿质营养元素动态变化研究

系统分析了紫茎泽兰叶片中N,P,K,Ca,Mg,Al,Mn共7种矿质营养元素在生殖生长时期含量的动态变化及其相关性。结果表明,紫茎泽兰在花芽分化期叶片中N,Mg,Al含量呈明显下降趋势,K,Mn含量呈上升趋势,P,Ca含量无明显变化;蕾期阶段和花期阶段,叶片中N,K含量呈下降趋势,Mg,Al,Mn含量呈上升趋势,P,Ca含量无明显变化;结实期阶段,叶片中N,P,Mg,Mn含量呈下降趋势,Al含量呈上升趋势,K,Ca含量无明显变化。元素Ca与P的含量变化呈显著正相关关系,而其他矿质元素之间的相关性均不显著。     

高大平房仓冬季通风防治储粮害虫

本文研究了高大平房仓采用冬季自然通风结合机械通风对储粮害虫的防治效果。结果表明，冬季通风对储粮害虫防治效果明显，其中对玉米象和谷蠹的防治效果较书虱好。对抗性品系的防治效果比敏感品系好，是一种安全高效的储粮害虫防治方法。     

朱砂叶螨抗甲氰菊酯品系选育及遗传分析

 从保留的室内相对敏感品系分出一个亚品系开始培育朱砂叶螨的甲氰菊酯抗药性品系。连续用药40代，抗性增长68.5倍。以此抗性品系（R）和相对敏感品系（S）杂交、回交，研究朱砂叶螨对甲氰菊酯的抗性遗传形式。正交（SR）和反交（RS）F1代的LC-P线介于S与R之间且偏向S方，显性度DSR和DRS分别为-0.83和-0.29，表明抗性由不完全隐性基因控制；两D值（DRS和DSR）95%置信限没有重叠，表明两个 D值（DSR和DRS）存在显著差异，也表明朱砂叶螨对甲氰菊酯的抗性遗传可能存在母体影响或核外效应；对F1杂合子与亲本的回交（SR♀×S♂和RS♀×R♂）F2代测定表明抗性由单基因控制。     

重庆市几种玉米钻心虫的发生及防治

近年来,重庆市的玉米钻心虫发生危害逐年加重,特别是春玉米,严重年份虫蛀率达６０～９０％,有些田块甚至１００％受害。据调查,该市仅玉米螟为害造成的春玉米减产达１０％,夏、秋玉米达２０～３０％。经过鉴定,在这一地区发生的玉米钻心虫主要有以下四种,即大螟（...     

自制植物源农药对柑桔大实蝇的毒力、化蛹及羽化的影响

测定了自制植物源农药对柑桔大实蝇不同虫态的毒力、化蛹及羽化的影响。结果表明:自制植物源农药对低龄幼虫的毒性最高,对老熟幼虫的毒性最低,LC50分别为130.358 4mg/L和25 163.230 0mg/L;自制植物源农药对柑桔大实蝇的化蛹和羽化都有一定程度影响,并且都以稀释25倍的影响最为明显,与毒力测定结果不完全一致,但化蛹和羽化的结果比较一致。     

几种植物精油对长角扁谷盗成虫的熏蒸作用

通过对红桔油、柠檬叶油、红河橙油、山苍子油、留兰香油、松节油、黄樟油、互叶白千层油、蓝桉叶油9种植物精油,在浓度为40μL/L及熏蒸时间为12、24、36、48、60h下,对长角扁谷盗成虫的熏蒸活性测定,结果表明蓝桉叶油、互叶白千层油、柠檬叶油、留兰香油及红桔油的熏杀效果较好,尤以蓝桉叶油的效果最佳。蓝桉叶油在浓度40μL/L,经12、24、36、48h和60h不同熏蒸时间,对长角扁谷盗的LC50分别为15.29,6.44,6.55,3.32、1.29μL/L;当蓝桉叶油熏蒸浓度为4、8、12μL/L时,其LT50分别为45.48、27.28、17.64h。     

朱砂叶螨对两种杀螨剂的抗性遗传力及风险评估

在室内抗性培育的基础上,应用数量遗传学中的域性状分析法研究了朱砂叶螨对甲氰菊酯和阿维菌素两种杀螨剂的抗性现实遗传力,并对两种药剂在不同杀死率下,朱砂叶螨抗性发展的速率进行了预测。结果表明,用甲氰菊酯、阿维菌素分别连续汰选16、18代后,朱砂叶螨对两者的抗性分别为28.61和4.36倍,抗性现实遗传力分别为0.2685和0.1385。在室内选择条件下,杀死率为50％～90％时,要获得10倍抗性,甲氰菊酯需要约13～6代,阿维菌素需要约28～13代。生物源农药阿维菌素的抗性风险明显低于菊酯类药剂甲氰菊酯。试验结果为朱砂叶螨抗性治理提供了理论依据。     

甲酸乙酯对米象乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的影响

报道了甲酸乙酯对米象[Sitophilus oryzae(Linnaeus)]乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)的活性影响,甲酸乙酯对米象表现出很高的毒力,25℃下熏蒸处理24 h的LC₅₀为28.65μL/L。亚致死剂量的甲酸乙酯可以使米象成虫体内AChE的比活力显著下降,用20μL/L的浓度处理24 h,AChE的比活力由15.684 nmol/mg.min下降至9.530 nmol/mg.min;酶动力学研究表明,甲酸乙酯可使米象成虫体内AChE的K_m值明显增加。对于羧酸酯酶,在活体条件下表现为先抑制后激活的规律,离体条件下则主要表现为抑制作用,且随着药剂浓度的增大抑制率也增大。