Cox．A16型手足口病乳鼠动物模型的建立及免疫、病理特征

为建立Cox．A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox．A16病毒株经蚀斑纯化，乳鼠驯化，最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox．A16毒株，命名为TS10／08（GenBankAccessionNO．JX068829，Cox．A16-TS）。Cox．A16-TS感染11日龄C57BL／6J乳鼠后，观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、组织病理损伤等病毒、免疫、病理指标。结果表明，Cox．A16-TS毒株感染11日龄C57BL／6J乳鼠，其病毒毒力为50LD50／mL，感染后不同时期肌肉病毒载量均高于其他组织中，至4d达到高峰，后不断下降。至感染后6d发病达高峰时做病理检测，相对于脑组织，肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润，引起更严重的炎性分子升高。血清中MCP-1，MIP-1alpha，MIP-1beta和CSF3动态变化，并在不同时间形成峰值。本试验初步建立了Cox．A16型手足口病乳鼠动物模型，为药物筛选、疫苗研发和免疫机理研究奠定了基础。     

壳聚糖黏膜佐剂促进黏膜免疫的研究进展

近年来通过黏膜部位释放抗原物质的新型免疫方法受到了越来越多的关注,其中鼻腔免疫被认为是最有前景的给药途径,佐剂可以提高或优化对通过黏膜或系统途径接种抗原的免疫应答,新的黏膜佐剂和传递系统是疫苗领域的研究热点,本文就纳米载体-壳聚糖作为特殊的黏膜免疫佐剂和PEG交联壳聚糖季铵盐智能水凝胶体系作为新型的鼻腔免疫传递系统作一...     

呼吸道合胞病毒F蛋白表位与Balb/c小鼠血清白蛋白融合表达及其纯化

为了更深入的研究呼吸道合胞病毒F蛋白优势表位的抗原性,采用生物信息学技术,预测呼吸道合胞病毒F蛋白的抗原表位,选取F205～223与F255～278两个小片段表位作为候选研究对象,构建了编码F蛋白两个表位与Balb/c小鼠白蛋白结构域Ⅰ的融合基因,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中融合表达,表达蛋白采用金属亲和层析法纯化,Western blot检测.结果显示,通过大肠埃希菌原核表达的融合蛋白以包涵体的形式表达,采用尿素变性,亲和层析法纯化后可以获得高纯度的融合蛋白.     

Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达

以Ⅱ亚单纯疱疹毒-2333株(HSV-2)的基因组DNA为模板扩增编码HSV-2糖蛋白D(glyco-protein D)基因,与载体pFastBacⅠ连接,转化E.coilDH5α感受态细胞,经PCR及测序鉴定正确。将pFastBacⅠ-gD重组质粒转座至DH10Bac获得重组穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白,经对表达条件进行优化,SDS-PAGE和Western blot鉴定,成功表达HSV-2 gD蛋白,为下一步的工作奠定了基础。