马铃薯野生种Solanum pinnatisectum离体再生体系的建立

为给马铃薯野生种的开发利用和遗传转化提供参考,以二倍体马铃薯野生种Solanum pinnatisectum 的茎、叶为材料,进行了离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织的最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+ 2,4-D 1.5 mg/L,诱导率分别达97.75%和100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 2.5 mg/L 和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA3 5.0 mg/L,不定芽分化率分别达75%和100%;生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,生根率达100%.     

基于比较转录组的水稻苗期耐冷相关基因BGIOSGA032296 TALEN基因组编辑技术构建

为了挖掘水稻苗期耐冷基因,基于比较转录组分析,参考公共数据库中的基因序列信息设计靶位点,对冷胁迫条件下东乡野生稻苗期下调表达耐冷相关基因BGIOSGA032296进行TALEN基因组编辑技术构建,克隆酶切鉴定和序列比对结果表明,BGIOSGA032296 TALEN敲除植物表达载体1301TALEN-032296构建成功,利用农杆菌介导法将TALEN敲除植物表达载体1301TALEN-032296转入水稻受体品种TP309,获得了17株转基因水稻植株,经潮霉素抗性标记基因和Fok I基因特异引物PCR检测,表明获得的转基因植株皆为携带1301TALEN-032296的阳性植株。该研究为水稻BGIOSGA032296基因后续耐冷表型鉴定奠定了前期基础。     

水稻光温敏核不育系不育基因的分子检测

对部分水稻光温敏核不育系及相关可育材料中的光温敏核不育基因p/tms12-1和温敏核不育基因tms5进行了检测。通过PCR-RFLP方法,在农垦58S、培矮64S和双8S中检测到光温敏核不育基因p/tms12-1,其SNP位点为G;而安农S-1、Y58S、株1S、农垦58、安农N携带p/tms12-1正常可育基因,其SNP位点为C;农垦58S×农垦58 F1代种子中同时存在C和G 2个SNP位点,测序分析表明,安农S-1、双8S、Y58S和株1S携带有温敏核不育基因tms5,培矮64S、安农N、农垦58和农垦58S不含tms5基因。说明双8S同时携带p/tms12-1和tms5不育基因。     

长寿花组培快繁体系的建立

以长寿花愈伤组织为外植体,研究了不同激素(6-BA和IBA)浓度配比对长寿花丛生芽诱导以及添加不同浓度NAA对其生根培养的影响。结果表明:长寿花丛生芽诱导增殖的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+IBA 0.4mg·L-1,诱导率为288.7%;最适生根诱导培养基为1/2MS+NAA 0.3mg·L-1,生根率为63.3%;长寿花生根组培苗成活率较高为97%。     

分子生物学技术在百合病毒病害检测中的应用

对百合病毒的分子生物学检测技术作了综合评述,主要有RT-PCR检测技术、核酸杂交技术、基因芯片技术等。目前,常用的分子生物学技术以RT-PCR为主,而基因芯片检测技术是近几年发展起来高效的检测手段并在植物病毒检测上有广泛的应用前景。     

水稻LOC_Os10g05490位点冷胁迫条件下表达分析及CRISPR/Cas9定向编辑

为探明LOC_Os10g05490位点冷胁迫条件下的表达特性和耐冷性功能,以耐冷东乡野生稻和冷敏感水稻93-11为试验材料进行了半定量分析,结果表明,LOC_Os10g05490在冷敏感水稻93-11冷处理前后表达丰度相当,而在耐冷东乡野生稻中冷处理后表达丰度下调,这一结果与前期转录组测序(RNA-seq)结果相符,进一步验证了该位点可能与水稻耐冷相关,随后利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术对LOC_Os10g05490编码区于同样具有较强耐冷性的粳稻品种台北309中实施定向基因敲除,并成功获得了26株转基因阳性植株。     

红掌组织培养技术研究

对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究.结果表明:同一成熟度的外植体,其叶柄愈伤组织诱导率明显优于叶片和花柄.诱导愈伤组织形成的培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;芽分化和增殖培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根与增殖同步.     

微型月季的组织培养技术研究

微型月季作为一种重要的微型花卉资源具有广阔的市场前景。通过对微型月季组织快繁的相关过程的初步研究,探索了规模化生产的可能性。结果表明：外植体材料的选取以顶芽为最好;离体芽诱导过程中,最适宜的培养基为MS＋6-BA0．50mg／L＋NAA0．20mg／L;从增殖倍数、芽生长情况等综合因素来看,MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L培养基最适宜微型月季继代增殖培养。     

东乡野生稻MYB转录因子LOC_Os01g62410-DX苗期低温诱导荧光定量表达分析及克隆

为了阐明东乡野生稻中MYB转录因子基因 LOC_Os01g62410-DX在低温胁迫条件下的功能作用机制,依据课题组前期的转录组分析数据,以东乡野生稻和籼稻品种"93-11"为材料,通过实时荧光定量PCR分析该基因位点在冷胁迫条件下的表达模式。并参考公共数据库中测序水稻品种日本晴对应位点的序列信息设计引物,利用RT-PCR技术,从东乡野生稻中扩增获得 LOC_Os01g62410-DX基因的全长cDNA,构建该基因的过表达载体。序列分析结果表明, LOC_Os01g62410-DX基因的cDNA全长为1 500 bp,共编码499个氨基酸,蛋白质分子质量为55.04 ku,理论等电点(pI)为7.62。在线分析软件预测 LOC_Os01g62410-DX氨基酸序列N端包含2个高度保守结构域SANT,表明该基因属于R2R3类MYB转录因子。系统进化分析结果表明 LOC_Os01g62410-DX与水稻Osmyb3和 Osmyb4编码的蛋白位于邻近分支上,亲缘关系最近。进一步利用农杆菌介导转基因方法,获得转入 LOC_Os01g62410-DX基因的37株阳性转基因植株,为深入研究东乡野生稻 LOC_Os01g62410-DX基因在低温胁迫条件下的作用机制奠定材料基础。     

一季晚粳稻曲病防治药剂筛选试验

万载县粳稻稻曲病发生轻重,一般与品种和抽穗期天气有关,选择最佳的防治时期和确定最佳的施药次数,是防治稻曲病的关键。试验结果表明,一季晚粳采用5%纹曲星1 200m L/hm2、用水量750kg防治稻曲病效果较好,最佳时期为抽穗前5~7d和始穗至抽穗期各施一次药,防效可达72.47%。