半番鸭及其母本AFLP标记与羽色性状相关分析

为分析AFLP标记与羽色性状的相关性,本研究在利用64对引物对黑、白羽半番鸭及其母本（闽农白鸭和莆田黒鸭）池DNA进行AFLP标记全面筛查,获得3个差异带(H1、H2和H3)的基础上,再次利用AFLP技术分别对上述4个群体的全部个体进行检测,进一步验证这3个AFLP标记是否为半番鸭白羽性状特有或与其相关。结果发现,H1、H2和H3这3个差异带在黑羽半番鸭和莆田黒鸭中均不表达;在白羽半番鸭中以H1的频率最高达89%,H3的频率最低只有52%;在闽农白鸭中H1的频率也达到81%。以此表明差异带H1可作为半番鸭白羽性状辅助选择的一个分子标记。     

逆流运动及葵花籽油替代鱼油对吉富罗非鱼生长和体成分的影响

选取初始体质量（73．81±9．02）g的雄性吉富罗非鱼（GIFFOreochromisniloticus）,分别投喂含100％鱼油（A）、50％葵花籽油＋50％鱼油（B）和100％葵花籽油（C）的饲料,每种饲料设置2个流速运动水平（0BL·s-1、1．5BL·s-1）（BL,体长）,共6个试验组合（0A、1．5A、0B、1．5B、0C、1．5C）,饲养42d后测定试验鱼生长和体成分变化。结果显示各组合吉富罗非鱼的成活率没有显著性差异（P〉0．05）。1．5B组合的特定生长率（4．96±0．02）％·d-1显著高于其他各组合（P〈0．05）。逆流运动后红肌和白肌蛋白质含量分别最高增加10．25％和7．74％（P〈0．05）。逆流运动对全鱼和肌肉多不饱和脂肪酸（PUFA）含量没有显著影响（P〉0．05）,但饲料B组和c组鱼体红肌PUFA含量显著高于A组（P〈0．05）,而B组和c组之间则没有显著差异（P〉0．05）。研究结果表明,葵花籽油替代鱼油对吉富罗非鱼的生长和体成分没有显著影响,而逆流运动能够显著提高肌肉蛋白质含量。     

半番鸭与番鸭精巢组织差异表达转录组测序分析

【目的】研究半番鸭与番鸭精巢组织转录组差异表达基因,为进一步阐明半番鸭不育的遗传机制奠定理论基础。【方法】利用转录组测序方法对半番鸭和番鸭的精巢组织进行研究,筛选其差异表达基因,并对其功能进行注释和荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,QRT-PCR)验证。【结果】测序共获得43.84Gb Clean Data,组装后共获得193 535条Unigene。DESeq分析发现3 597个基因在两个鸭品种间差异表达,其中上调基因1 194个和下调基因2 403个,包括与生殖功能相关的基因,如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、丝裂原活化蛋白激酶7(mitogen-activated protein kinase 7-like,partial,BMK)、生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2,GRB2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和肿瘤坏死因子受体超家族成员6(tumor necrosis factor receptor superfamily member 6,FAS)等。GO(gene Ontology)分析发现382个差异基因获得功能注释,其中97个基因涉及发育繁殖生物学过程。KEGG(kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析表明差异表达基因共富集到50条信号通路中,其中17个通路显著富集,包括丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(mitogen-activated protein kinase signaling pathway,MAPK)、甘油酯代谢(glycerolipid metabolism)以及钙信号途径(calcium signaling pathway)信号通路等,与生殖功能密切相关的有促性腺激素释放激素信号通路(gonadotropin releasing hormone(Gn RH)signaling pathway)和MAPK信号转导通路。经QRT-PCR验证,差异基因表达变化模式与转录组测序结果一致,测序结果可靠。【结论】在转录组水平上筛选出半番鸭和番鸭精巢组织差异表达基因,揭示了Gn RH和MAPK信号通路在鸭的生殖活动中发挥了重要作用,为进一步探索半番鸭生殖系统的分化机理提供可靠的参考依据。     

金定鸭FSHR基因第1～7外显子的克隆及SNP位点的筛查

动物的繁殖活动主要受内分泌生殖激素的调控,FSHR存在于卵泡颗粒细胞膜上,属于G蛋白偶联受体家族,对动物卵巢细胞的发育、成熟和排卵具有重要的作用。本研究以高产和低产金定鸭基因组为模板,通过PCR扩增、目的基因片段克隆和测序等方法,获取金定鸭FSHR基因1~7外显子序列,并对基因序列进行比对分析。结果显示,序列a包含第1外显子(185bp)的完整序列,第1内含子(145bp)的部分序列;序列b包含第2(75bp)、3外显子(75bp)、第2内含子(463bp)的完整序列,第1(40bp)、3内含子(47bp)的部分序列;序列c包含第4外显子(75bp)的完整序列,第3(180bp)、4内含子(55bp)的部分序列;序列d包含第5外显子(78bp)的完整序列,第4(232bp)、5内含子(56bp)的部分序列;序列e包含第6(69bp)、7外显子(75bp)、第6内含子(117bp)的完整序列,第5(133bp)、7内含子(146bp)的部分序列。根据基因序列特征,对获取的5段金定鸭FSHR基因序列进行扩增序列测序比对。结果发现:在外显子1第50bp处存在A/G突变;在外显子2第30bp处存在A/G突变;在外显子4第33bp处存在C/T突变;在外显子5第45bp处存在A/G突变,第19bp处可能存在A/T突变,33bp处可能存在C/T突变。金定鸭FSHR基因序列的克隆及SNP突变位点的发现可为后续开展FSHR基因的多态性与金定鸭产蛋性能的相关研究奠定一定的基础。     

德化黑鸡黑素皮质素受体1（MC1R）基因单核苷酸多态性分析

采用聚合酶链式反应及单链构象多态(PCR-SSCP)技术以及DNA直接测序的方法,对德化黑鸡MC1R基因编码区进行单核苷酸多态性(SNPs)分析。结果表明:引物P2扩增片段具有多态性,并表现为AA、AB和BB等3种基因型;经序列分析发现,BB型存在2个突变位点:分别在1094处(G-A)和1095处(T-C),其中在1095处的突变还导致氨基酸的改变(Cys-Arg)。由基因型分布情况表明,德化黑鸡C系(乌色)和D系(非乌色)均以AA型为主;BB型(含SNP)仅存在于C系中,而在D系中未发现,推测BB型可能是乌色性状特有或与乌色性状相关。     

半番鸭白羽性状AFLP标记的筛选与分离

采用EcoRⅠ/TaqⅠ系列的64对引物对半番鸭羽色性状进行AFLP标记筛查,结果表明：经重复试验,最终获得3个白羽性状特异片段,它们分别由引物组合E-AAG/T-AAC、E-AAG/T-AGT、E-AGC/T-AAT扩增得到。对这3个白羽性状特有的AFLP片段测序分析,其中引物组合E-AGC/T-AAT差异片段序列与鸡的WAG-9005基因全序列相似性为73%;引物组合E-AAG/T-AAC和引物组合E-AAG/T-AGT两个差异片段与数据库中相似性较低,推测可能是新的与半番鸭白羽性状相关的基因片段。     

半番鸭和北京鸭MC1R基因的克隆与序列分析

羽色是半番鸭一个重要的经济性状。黑素皮质素受体1 （melanocortin receptor 1,MC1R）基因是控制动物黑色素合成的重要基因。本研究根据鸡、鹌鹑、雪雁、孔雀等MC1R基因同源序列的保守区设计1对引物,以半番鸭、北京鸭总DNA 为模板,PCR扩增,克隆测序。结果,获得了2个长度为900bp 的基因片段, 并提交GenBank, 登录号分别为EU877265和EU877264。经比对,发现北京鸭与半番鸭核苷酸序列存在8个变异位点,其中位于184bp（T/A）、229bp（G/A）、364bp（A/G）、385bp（G/A）处的变异导致了氨基酸序列分别在第62位（C/S）、77位（E/K）、122位（T/A）和129位（V/I）发生突变。为进一步研究半番鸭羽色MC1R基因单核苷酸多态性（SNP）奠定了基础;通过BLAST进行相似性搜索,结果表明,鸭与黑雁MC1R基因的核苷酸序列同源性最高为98.4％,与其他家禽的同源性也保持在92.8％～98.2%之间。可见禽类的MC1R 基因编码区序列具有高度的保守性;系统进化分析表明,半番鸭、北京鸭与雪雁、黑雁、皇雁亲缘关系相近,从分子角度验证了它们在动物学分类上的地位。     

看乞丐成功营销,谈品牌运作之道

营销无处不在,关键在于如何准确定位消费者的需求,策划出差异化营销思路,让产品从同质化的竞争中脱颖而出。     

低聚壳聚糖对北京鸭生长性能和血清生化指标的影响

旨在研究低聚壳聚糖对北京鸭生长性能和血清生化指标的影响。选取180只1日龄北京鸭,公母各半,1~28日龄为预试期,29日龄挑选出体重相近的北京鸭72只,公母各半,采用单因素试验水平设计,随机分为2组,每组3个重复,每个重复12只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+40 mg/kg的低聚壳聚糖。试验期间测定生长性能指标;于49日龄、70日龄每组随机挑选16只北京鸭,公母各半,胫静脉采血,测定其血清生化指标。结果显示:(1)与对照组相比,低聚壳聚糖组公母各周龄的体重均差异不显著(P0.05),公母北京鸭的平均日增重分别提高5.28%、2.20%,但差异不显著(P0.05),平均日采食量、料重比有下降趋势(P0.05)。(2)49日龄北京鸭低聚壳聚糖组母鸭血清中白蛋白、球蛋白的含量显著高于对照组(P0.05),而母鸭血清中总胆固醇的含量显著低于对照组(P0.05);公、母鸭血清中乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶的含量均略高于对照组,但差异不显著(P0.05)。70日龄北京鸭低聚壳聚糖组母鸭血清中总蛋白、球蛋白的含量(极)显著高于对照组(P0.05,P0.01),而母鸭血清中的白球比显著低于对照组(P0.05),公、母鸭血清中的总胆固醇含量均显著低于对照组(P0.05);公、母鸭血清中的乳酸脱氢酶均极显著高于对照组(P0.01),血清中的谷草转氨酶、碱性磷酸酶略高于对照组,但差异不显著(P0.05)。由此提示,在基础日粮中添加低聚壳聚糖对北京鸭的生长性能、料重比等虽然无显著的影响,但可在一定程度上促进北京鸭的生长发育,提高其生产性能;可提高血清中的蛋白含量,降低血清尿素、尿酸、胆固醇的含量。     

低聚壳聚糖对北京鸭屠宰性能、血清抗氧化性能的影响

旨在研究低聚壳聚糖对北京鸭屠宰性能和血清抗氧化性能的影响。选取29日龄体重相近的北京鸭72只,公母各半,采用单因素试验水平设计,随机分为2组,每组3个重复,每个重复12只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+40 mg/kg的低聚壳聚糖。于49日龄对照组、试验组分别随机挑选6只北京鸭,70日龄每组随机挑选12只北京鸭,公母各半,进行屠宰,测定其屠宰性能、血清抗氧化性能。结果表明:低聚壳聚糖组70日龄北京鸭公、母血清SOD活性极显著高于对照组(P0.01);70日龄北京鸭公、母血清GSH-Px活性均有增加趋势,其中公鸭血清GSH-Px活性显著高于对照组(P0.05);70日龄北京鸭公、母血清T-AOC水平均略高于对照组(P0.05);70日龄北京鸭公、母血清MDA活性极显著低于对照组(P0.01)。结果提示,在基础日粮中添加低聚壳聚糖对北京鸭的屠宰性能无显著的影响,但可提高血清免疫水平和抗氧化能力,对70日龄北京鸭的免疫和抗氧化效果尤为显著。