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【目的】利用朊蛋白双基因敲除(PRNP-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体,并对其特性进行分析。【方法】构建山羊朊蛋白(PrP)原核表达载体,转入大肠杆菌并诱导表达,纯化获得羊PrP;将获得的PrP免疫PRNP-/-山羊,制备朊蛋白特异性的多克隆抗体;并对获得的朊蛋白多克隆抗体进行ELISA及Western-blot检测。【结果】获得了大量的朊蛋白特异性抗血清,间接ELASA检测抗血清中朊蛋白多克隆抗体的效价为25600;Western-blot检测显示所制备抗体不仅可以识别鼠、牛、羊脑组织内源性朊蛋白,而且能识别鼠脑组织内朊病毒。【结论】PRNP-/-转基因山羊可用于制备大量高亲和力朊蛋白多克隆抗体,获得的抗体可用于多种动物朊蛋白及朊病毒类疾病的检测。 相似文献
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传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs)是由朊病毒引起的人和多种哺乳动物以神经退行性变化为主要特征的一种慢性消耗性传染病,也称作朊病毒病;其是由体内正常细胞表面的PrPC转变成PrPSc蛋白所导致。但PrPSc主要在脑内表达,在其他组织表达量很低,因此快捷准确的诊断方法对于该病有重要意义。作者重点介绍以朊病毒的致病特点为依据建立的检测方法,便于对该疾病的早期诊断、预防以及食品安全检测提供帮助,保障畜牧业的有序发展以及人类的健康。 相似文献
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很多证据表明朊病毒疾病的病原是一种特殊的传染性蛋白质,这种蛋白质缺乏核酸。致病性朊蛋白PrP^sc是以机体正常表达的糖蛋白PrP^c为模板通过构型改变而形成的。作为朊病毒疾病的中心事件-PrP^c向PrP^sc的转变,很多研究已经建立了体外转化的方法,但是否有除PrP^c外的其它细胞因子参与到PrP^sc的形成中,仍然不清楚。我们利用改良的蛋白质循环增殖的方法建立了在体外将PrP^c转化成酶抗性PrP^sc类似物(PrPres)的生化方法。 相似文献
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牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy,BSE)又称疯牛病,是由朊病毒蛋白引起的海绵状脑组织病变,它的主要特征是缓慢地破坏哺乳动物的中枢神经系统。综述了疯牛病的病原体、流行病学特点、发病原因、临床症状等,以期为该病的防控提供参考。 相似文献