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我市地处西北干旱、半干旱缺水地区,十年九旱,对水稻种植与发展来说,极为不利.随着西部开发脚步的加快,工农业用水矛盾将更加突出.因此,必须尽快在水稻生产中采用节水栽培技术,减少水资源浪费,缓解工农业用水矛盾,从而实现可持续发展. 相似文献
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本研究旨在探究音猬因子(Sonic hedgehog, SHH)与羊毛弯曲形成的关系及其调控机制。本研究通过培养原代绵羊角质形成细胞,构建过表达和沉默载体,利用细胞转染、免疫共沉淀、实时荧光定量PCR和Western blot等方法探究SHH与羊毛弯曲的关系,分析SHH是否通过早期生长应答基因2(early growth response 2, EGR2/Krox20)调控胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-like growth factor binding proteins 5, IGFBP5)来影响羊毛弯曲。结果显示,体外成功分离培养绵羊原代角质形成细胞,显微镜下呈“铺路石”样,免疫荧光鉴定结果呈阳性表达,CCK-8结果表明细胞生长曲线呈“S”型,符合细胞增殖趋势;过表达和沉默SHH后,羊毛弯曲相关基因KRT71、β-catenin和TCHH的表达量显著升高和降低;过表达Krox20后,羊毛弯曲相关基因的表达量显著升高;免疫共沉淀试验表明,在绵羊角质形成细胞中SHH可以与Krox20相互作用且正调控Krox20;实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,过表达... 相似文献
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毛囊是皮肤的附属器官之一。有研究表明外胚层发育不全基因(ectodysplasin A,EDA)是毛囊、牙齿和腺体等器官发育所必需的,EDA及其受体EDAR可以参与并调节毛囊不同时期的发育。[目的]探究EDA和EDAR对小鼠背部毛囊形成的作用。[方法]试验采用苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学方法,观察小鼠胚胎期第13~18天背部毛囊形成过程中组织结构特征以及EDA和EDAR蛋白在此期间的表达。[结果]HE染色试验结果显示不同天数胚胎小鼠背部毛囊结构有如下变化:细胞排列逐步紧密,层数逐渐增多;皮肤毛胚逐渐凸起,形成基板,并逐步发育成毛钉,进而形成未成熟毛囊。免疫组织化学试验结果显示EDA和EDAR蛋白在表层细胞、基底层、基板、毛芽、毛钉、未成熟毛囊和真皮中均有表达。[结论]EDA可能对毛囊形成的启动有促进作用,且可能促进毛钉的形成和未成熟毛囊的发育;EDAR则可能对表皮的分化有诱导作用,且可能对毛钉的形成和发育有促进作用。 相似文献
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羊毛是养羊业的主要产品之一,其是由皮肤内的附属器官毛囊发育而来,其中弯曲度是衡量其质量的重要指标之一。为了解NF-κB家族各亚基(NFκB1、NFκB2、RELA、RELB和REL)在不同品种绵羊背部皮肤中基因水平的表达差异,分析其在不同品种绵羊背部皮肤中与形成毛发性状差异相关的关键性基因,选取美利奴羊和晋中绵羊2个不同品种的绵羊作为研究对象,利用实时荧光定量PCR方法检测不同品种绵羊背部皮肤中NF-κB各亚基的表达水平。结果显示,NF-κB各亚基在美利奴羊和晋中绵羊背部皮肤中的相对表达量均有差异,除RELA外,其余各亚基mRNA的相对表达量美利奴羊均高于晋中绵羊;美利奴羊皮肤中,NFκB2 mRNA相对表达量最高,RELA mRNA次之;晋中绵羊皮肤中,RELA mRNA相对表达量最高,NFκB2 mRNA次之。结果揭示,NFκB2可能对于羊毛弯曲性状的形成具有促进作用,而RELA可能对于羊毛弯曲性状的形成具有抑制作用;NFκB2与RELA适当的相对表达水平可能对于毛发弯曲性状的形成起重要的调控作用。 相似文献
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通过调查近几十年以来康庄地区的气候变化规律及社会经济特征,以RS和G IS为手段,结合该区自然环境特点,提出康庄地区土地沙化评价指标体系,对延庆康庄地区土地沙化现状进行初步评价。结果显示,中度土地沙化、轻度土地沙化占土地沙化面积的82.4%,说明延庆康庄地区土地沙化总体程度较轻,今后应对该区重度土地沙化面积进行重点治理,对中轻度及潜在沙化面积进行监测保护,防止其进一步沙化。 相似文献
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为了研究音猬因子(sonic hedgehog, SHH)在不同品种绵羊背部皮肤中的表达差异,以探索SHH与羊毛弯曲形成的关系,选取美利奴羊和小尾寒羊作为研究对象,利用HE染色法观察2种绵羊背部皮肤的组织结构,采用免疫组织化学技术、实时荧光定量PCR和Western blot方法探究2种绵羊背部皮肤中SHH蛋白和基因水平的相对表达量差异。结果显示:HE染色显示美利奴羊与小尾寒羊背部皮肤毛囊的组织结构存在毛囊数量及弯曲程度等差异;免疫组织化学试验显示,SHH蛋白在美利奴羊和小尾寒羊背部皮肤中均有表达,在美利奴羊背部皮肤中的毛乳头、毛基质、内外根鞘、皮脂腺和表皮细胞中显著表达,在小尾寒羊背部皮肤中的毛基质、内外根鞘和皮脂腺中显著表达;光密度分析显示,美利奴羊背部皮肤组织中SHH蛋白的表达量显著高于小尾寒羊(P<0.001);实时荧光定量PCR显示,美利奴羊SHH mRNA相对表达水平显著高于小尾寒羊(P<0.01);Western blot显示,美利奴羊SHH蛋白相对表达水平显著高于小尾寒羊(P<0.01)。提示:羊毛弯曲的形成与其组织结构有关,并受SHH的调控。 相似文献
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【目的】研究miR-140-5p在前脂肪细胞(3T3-L1)成脂分化过程中的功能及其作用机制。【方法】待3T3-L1细胞汇合度达100%时诱导其成脂分化,收集分化第―1(诱导分化前1 d)、0、1、2、3、5、7天的细胞,用实时荧光定量PCR检测miR-140-5p相对表达量;将miR-140-5p mimics、NC转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化,油红O染色观察脂滴形成情况,实时荧光定量PCR检测成脂标志基因CAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、CAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)相对表达量;利用miRandn和TargetScan在线网站预测miR-140-5p的靶基因;通过对比序列差异分析P300/CBP相关因子(PCAF)的3'-UTR序列中与miR-140-5p的结合位点序列在小鼠、人等不同物种间的序列保守性。将miR-140-5p mimics、inhibitor、NC转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化,实时荧光定量PCR检测miR-140-5p、PCAF相对表达量,Western blotting检测PCAF蛋白水平;将PEGFP-N1-PCAF、PEGFP-N1转染3T3-L1细胞,油红O染色观察脂滴形成情况,实时荧光定量PCR检测PCAF、C/EBPδ、PPARγ基因相对表达量,Western blotting检测C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ蛋白表达水平。将3条PCAF siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3)、siRNA NC转染3T3-L1细胞,Western blotting法检测PCAF蛋白水平,筛选最佳PCAF siRNA。将最佳PCAF siRNA和siRNA NC转染3T3-L1细胞,油红O染色观察脂滴形成情况,实时荧光定量PCR检测PCAF、C/EBPβ、C/EBPδ与PPARγ基因相对表达量,Western blotting检测C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平。分别将miR-140-5p mimics、NC与PGL0-PCAF 3'-UTR载体和PGLO空载体共转染293T细胞,用双荧光素酶报告试验检测miR-140-5p与PCAF的靶向关系。【结果】在诱导3T3-L1细胞成脂分化过程中,与诱导分化前1 d相比,在细胞成脂分化第1、2天时miR-140-5p相对表达量极显著升高(P<0.01),在分化第3天时显著升高(P<0.05)。与NC组相比,miR-140-5p mimics组脂滴数量明显增加,miR-140-5p mimics组成脂标志基因C/EBPδ与PPARγ相对表达量均极显著升高(P<0.01)。靶基因预测结果表明,miR-140-5p与PCAF存在预期结合位点;保守性分析结果表明,靶基因PCAF结合位点序列在不同物种间具有高度保守性。与NC组相比,mimics组miR-140-5p和PCAF相对表达量均极显著升高(P<0.01),inhibitor组miR-140-5p极显著降低(P<0.01)、PCAF显著降低(P<0.05),PCAF蛋白表达量显著升高(P<0.05)。与PEGFP-N1组相比,PEGFP-N1-PCAF组脂滴数量增多,PCAF、PPARγ基因相对表达量和C/EBPβ、C/EBPδ蛋白水平极显著升高(P<0.01),PPARγ蛋白水平显著升高(P<0.05)。PCAF siRNA1、siRNA2与siRNA3均极显著抑制PCAF蛋白的表达(P<0.01),siRNA3的效果最显著,因此选择siRNA3进行后续试验。与NC组相比,PCAF siRNA3组3T3-L1细胞中脂滴数量较少,PCAF、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ基因相对表达量和C/EBPβ蛋白水平均极显著下降(P<0.01)。双荧光素酶报告试验结果显示,miR-140-5p与PCAF基因之间无靶标关系。【结论】内源性miR-140-5p在3T3-L1细胞分化过程中表达升高,miR-140-5p可能通过间接上调PCAF基因表达促进3T3-L1细胞成脂分化。 相似文献
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为了研究早期生长应答因子2(early growth response 2, EGR2/Krox20)与胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-like growth factor binding protein 5, IGFBP5)在美利奴羊和小尾寒羊体侧皮肤中表达差异及Krox20和IGFBP5基因之间的相关性,探索Krox20基因与羊毛弯曲的关系,试验选择南非美利奴羊与小尾寒羊各3只,采用免疫组织化学试验、实时荧光定量PCR扩增和Western-blot检测Krox20和IGFBP5基因及蛋白在两种羊体侧皮肤组织的表达情况;同时体外培养绵羊成纤维细胞,通过细胞转染技术以pEGFP-N1为载体过表达Krox20基因,分析其与IGFBP5基因的关系,对Krox20基因与羊毛弯曲的关系进行研究。结果表明:在美利奴羊和小尾寒羊体侧皮肤组织中,Krox20及IGFBP5蛋白在次级毛囊毛基质、内外根鞘、表皮、毛干、皮脂腺中均有较强的阳性表达,在毛乳头中表达较弱。经光密度分析,Krox20与IGFBP5蛋白在美利奴羊体侧皮肤组织中的相对表达量均极显著高于小尾寒羊(P<0.01),分别... 相似文献