电控发动机怠速控制模糊算法研究

开发了用于电控发动机怠速转速控制的模糊算法,并在发动机台架上进行了实验验证,实验结果证实了该算法的有效性。     

耐寒樟树的短根扦插快速繁殖技术研究

樟树是中国优良的观赏、行道树种,亦是重要的工业原料树种,但耐寒性樟树的缺乏限制了樟树在北方的推广.在樟树的黄淮地区北移多年研究中,选育出了能耐-16℃的耐寒樟树单株寒樟801.为了快速繁殖耐寒樟树寒樟801,用其侧根作为短根插穗进行了扦插试验,插穗粗度分别为2.0、1.5、1.0、0.5、0.3cm,长度分别为1.0、3.0、5.0 cm.结果表明,选取粗度在0.5 cm以上、长度5.0 cm的短根作为插穗进行扦插成活率较高,要求插穗上切口下方要有点状凸起,扦插深度以覆盖上切口为宜,时间以冬末春初最佳；若采用萘乙酸稀释液200 mg/L处理1h,可以促进短根插穗生根、提高成活率.扦插后的田间管理非常重要,要做到薄水勤浇、随时除草;当扦插苗高达20 cm时就要及时移栽.     

金鱼造血器官坏死病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

金鱼造血器官坏死病毒(Goldfish haematopoietic necrosis virus,GFHNV)是一种可感染金鱼等鲤科鱼类,并可导致其死亡的疱疹病毒。为了快速检测病原,本研究根据GFHNV的主要衣壳蛋白(Major captor protein,MCP)序列中的一段保守基因序列,设计引物和Taq Man探针,建立了GFHNV特异性的实时荧光定量PCR检测方法 ;并利用PCR反应扩增出的MCP基因,制备了p UC-GFHNV重组质粒作为阳性对照。经试验,该方法检测限最低可达10个拷贝数的目的基因,而且与锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、甲鱼虹彩病毒(Softshell turtle iridovirus,STIV)、流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haematopoietic necrosis,EHNV)、斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)以及白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)等5种水生动物病毒无交叉反应。该方法具有简便、快速、敏感、特异等优点,为该病的诊断与病原检测提供了一个重要手段。     

基于园林用途的园林树木分类

随着风景园林与国际上"Landscape"的接轨,大林学的范畴逐渐被人们所接受,基于园林用途的园林树木分类体系必须要不断完善以更好地指导园林树木的应用,通过总结基于园林应用的园林树木原有的十大应用形式;提出了15大应用形式,包括行道树、园路树、庭荫树、园景树、风景林、树林、防护林、水边绿化树木、绿篱及绿雕、地被植物、基础种植树木、垂直绿化树木、专类园树木、特殊环境绿化树木、盆栽及盆景观赏树木。阐述了各分类用途的概念、作用、选择要求、常见种类和养护管理。     

传染性造血器官坏死病病毒参考蛋白的研制

为规避活病毒作参考物质存在的生物安全风险,本研究利用毕赤酵母表达系统表达了传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的糖蛋白来制备参考蛋白,作为IHNV免疫学检测参考物质。本研究选用IHNV糖蛋白基因(IHNV-G)为目的基因,根据Gen Bank中IHNV全基因序列设计特异性引物,以IHNV-uk株病毒核酸为模板,通过RT-PCR获得糖蛋白基因片段,将其克隆至真核表达载体p PICZαA,转入毕赤酵母感受态细胞GS115中,使外源基因与酵母基因融合,通过1%甲醇诱导表达外源蛋白,SDS-PAGE分析显示获得可溶性表达蛋白,分子量大于70 ku。经Western Blot和ELISA分析,该表达产物可以被IHNV多抗特异性识别。0.1531 mg的重组蛋白与0.3125TCID50 IHNV在ELISA实验中反应原性相当,–20°C可稳定保存2个月,说明其在一定程度上可替代病毒作为参考物质。该研究为IHNV ELISA检测试剂盒的开发奠定基础。     

锦鲤疱疹病毒病病原检测能力验证结果分析

为了提高中国锦鲤疱疹病毒病(KHVD)病原检测的整体水平,加强相关实验室检测锦鲤疱疹病毒(KHV)的能力,2014—2016年开展了3次能力验证项目。能力验证样品为盲样,使用鲤鱼组织匀浆液,与包含了KHV TK基因片段和Sph基因片段的2种重组质粒溶液混合制成。对盲样进行了均匀性和稳定性检测。采用水产行业标准《鲤疱疹病毒检测方法 第1部分：锦鲤疱疹病毒》(SC/T 7212.1-2011)中,推荐使用的聚合酶链式反应(PCR)方法进行病毒检测,并对各参加单位锦鲤疱疹病毒的检测结果进行分析。2014年能力验证第一轮测试结果满意率为58%,第二轮满意率为96%;2015年能力验证第一轮测试结果满意率为77%,第二轮满意率为89%;2016年能力验证第一轮测试结果满意率为82.69%,第二轮满意率为92.73%。通过2014至2016年的能力验证活动,大多实验室具备了锦鲤疱疹病毒PCR检测能力和质量管理水平,可以承担锦鲤疱疹病毒的检测和监测工作。     

锦鲤疱疹病毒ORFl基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备

为了进行锦鲤疱疹病毒（Koi Herpesvirus Virus,KHV）诊断方法、疫苗研制和蛋白功能研究。通过选择基因保守性极强的ORFl基因作为研究对象,设计1对特异性引物进行PCR克隆。目的基因与表达载体PET构建重组质粒,将重组质粒转化大肠杆菌E．coliBL21（DE3）后诱导表达,再将成功表达的目的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。PCR产物经电泳显示,所扩增的基因长度774bp,与目的基因长度相符。蛋白表达产物经SDS．PAGE和Western-bolt检测,重组表达质粒K1-PET成功诱导表达,表达蛋白为37．3KD,为包涵体。免疫小鼠获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到1：27000。表明表达出的目的蛋白具有免疫原性,实验获得的表达蛋白和多抗血清为KHV的疫苗研制和免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

3个天然香豆素的合成及选择性清塘试验

用Wittig法合成了3个天然香豆素,试验条件为取代邻羟基苯甲醛10 mmol,三苯基膦20 mmol,氯乙酸乙酯22 mmol,反应温度80℃,时间1 h。这3个香豆素中,8-甲氧基香豆素和6-羟基香豆素具有潜在的选择性清塘应用价值。     

日本血吸虫蛋白质组学研究

蛋白质组学是研究一种细胞、组织或完整生物体在特定时空上全部蛋白质及其存在方式的学科。近年来,应用蛋白质组学技术开展了日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫蛋白质组,成虫性别差异和排泄分泌物蛋白质组,体被蛋白质组,与药物和诊断相关的蛋白质组等多方面的研究,增加了人们对日本血吸虫的生长发育、免疫逃避等机制的了解,为发掘血吸虫病疫苗、诊断和药物靶点提供了新的线索。