大豆新品种长农26选育报告

大豆新品种长农26是长春市农业科学院大豆研究所选育成功的大豆新品种,2008～2009年区域试验平均产量2 422.9 kg·hm-2,比对照品种白农10增产8.0%,2009年生产试验平均产量2 298.8 kg·hm-2,比对照白农10增产4.6%。该品种2010年1月通过吉林省农作物品种审定委员会审定,为中早熟品种,其主要特点是秆强、抗倒,较耐密植,丰产性、稳产性好,籽粒外观品质优良。     

转双价抗虫基因Bt-pta玉米植株的获得

以7922、8902、4112、340和853为受体材料,研究不同基因型的愈伤组织诱导与再生芽苗的关系,其中7922芽苗率为76.4%;8902、4112、340芽苗率分别为8.2%、12.7%和0%和11.8%,结果显示7922主要以体胚发生为主,芽苗率高,是遗传转化的良好受体材料。且胚性愈伤组织随着继代次数的增加变异率随之增加,应尽量减少继代次数以提高转化率。研究进一步利用PDS-100型基因枪将包含抗除草剂基因(bar)、苏云金杆菌毒蛋白基因(cryIA(a))和半夏凝集素基因(Pinelliaternataagglu-tinin,PTA)的聚合载体p3300-bt-pta导入7922的胚性愈伤组织,经PPT(3mg/L)筛选,获得抗性愈伤组织和再生植株。从获得的28株再生植株中筛选获得22株具有除草剂抗性的植株,PCR分析表明有7株同时含有Bt、PTA、Bar三个基因,共整合的频率为31.8%,结果表明将多价抗性基因同时导入玉米获得多抗的转基因玉米材料是可行的,这为通过转基因聚合育种培育创造同时抗鳞翅目害虫和同翅目害虫的玉米品种奠定了基础。     

抗除草剂转基因玉米育种筛选方法的建立

本试验建立了一个以除草剂抗性为选择标记的玉米(Zea mays L.)转基因育种中的早期世代批量快速筛选技术.通过对玉米自交系铁7922、吉8902、丹340、PA91以及转Bar基因PA91玉米PA91TBA523在营养钵中浸灌250mg/L、500mg/L、1 000mg/L、1 500mg/L不同浓度的Basta除草剂的萌发试验,确立了不能正常生长的临界浓度:铁7922在250 mg/L的除草剂中无法生长,吉8902在500 mg/L的除草剂中无法生长;转基因材料PA91TBA523在除草剂达到1 500 mg/L仍与不浸灌除草剂的对照无明显差异.利用此方法对花粉管通道法转化获得的转基因T0植株的种子进行鉴定和筛选,从T0植株种子(T1)获得阳性植株6株,3株获得种子,对获得的种子(T2)再做除草剂筛选,抗性植株PCR检测均表现阳性.对以往的转基因T3做批量规模筛选,可以淘汰大量(70%)非转基因和表达不强的株系或个体,减少了田间种植工作量,提高了育种效率.     

农杆菌介导的玉米合子基因转化

本研究建立了农杆菌介导的玉米合子转化方法。用农杆菌介导合子转化方法,以含有bar基因的标准双元载体PTF102和含有bar基因和双价抗虫基因Cry1A（a）或Cry1A（c）、PTA（半夏凝集素）的载体p3300-Bt-pta转化玉米自交系吉8902、丹340、吉4112、吉853、铁7922及PA91,直接从受体植株得到转化种子,用除草剂PPT筛选和PCR鉴定,获得转基因植株及后代。实验分析了2002年、2003年和2004年的3批转化操作的结实率、转化率及转基因的遗传情况：经农杆菌侵染的雌穗平均结实率为39％,合子转化频率达1％以上,转基因可以遗传下去。农杆菌介导玉米合子转化方法可以重复获得成功,表明我们成功建立起一个新的不依赖组织培养的玉米转基因技术体系。     

转基因抗虫玉米Bt毒蛋白的时空表达分析

对2个转Bt基因玉米抗虫系株系进行Bt毒蛋白表达量的分析测定。结果显示,转基因株系中的毒蛋白可以在其后代稳定的遗传和表达,毒蛋白的表达为组成性表达,在玉米的各个发育时期和植株的各个部位均有表达,但其表达的量有显著差异,毒蛋白表达量随着植株的生长而减少,比较植株的各个器官,叶片毒蛋白含量最高,茎次之,根、种子和花丝中的毒蛋白含量较少。     

农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究

以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体,利用农杆菌介导法转化Bt(CryIA.)基因,研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂(Basta)抗性筛选结果评估转化率,表明继代培养3￣5d的愈伤组织适于转化,其中以继代5d的7922愈伤组织转化率最高,为46.6%;不同基因型对农杆菌转化率存在差异,H99的抗性愈伤组织率为34.57%,7922为26.27%、340为21.36%、78599和921抗性愈伤组织率仅为8.02%和6.78%。基因型间差异显著;浸染培养基中加入(AS100￣200mg/L)抗性愈伤转化率明显提高;菌液浓度OD6000.5￣0.6、侵染时间5￣10min、共培养时间3d最佳。     

50%杀草特2号乳油防治大豆田杂草药效的研究

经不同自然生态区的田间小区药效试验、安全性测定及测产结果表明 :50 %杀草特 2号乳油对大豆田一年生单、双子叶杂草总防效达 90 % ,对作物安全 ,持效期为 70～ 80d ,一次施用可控制作物整个生育期间杂草的危害 ,增产 3 3%～ 2 2 1%。     

分子标记结合田间观察快速鉴定外源DNA导入玉米的变异后代

本研究通过花粉管通道导入技术将甜高粱总DNA导入优良玉米自交系4112和8902中,并应用RAPD标记技术从导入后代中筛选出变异后代。从306个RAPD引物中筛选出79个引物对供受体及导入后代进行鉴定,其中10个随机引物在供、受体和导入后代间有多态性。对D1和D2代进行田间茎秆糖分调查,并对D2代室内考种,发现糖分含量和穗长、穗重、轴粗、穗粒重等穗部性状都发生了明显变异。结合分子鉴定结果,最终获得了一批变异材料。     

转GFM CrylA基因玉米自交系及其杂交种的抗螟性鉴定

对获得的6个转GFM CrylA基因玉米（Zea mays）株系的T5代PCR分析证明,转基因株系是稳定遗传的。以此抗虫系为亲本与常规自交系配制了四密25^Bt、通单24^Bt和吉单209^Bt3个杂交种。转基因自交系和杂交种的抗螟性鉴定结果表明：转基因系间抗虫性差异极显著,同一转基因系单株间也存在差异。抗螟性强的4个株系比受体对照平均蛀孔数减少70％、茎秆虫孔隧道长度减少80％、存活的虫体长度减少70％,差异显著,达到了高抗水平。对6个转基因抗虫系进ELISA检测,毒蛋白表达量平均占总蛋白0．16％,最高的达0．19％。杂交组合四密25^Bt、通单24^Bt和吉单209n群体内平均虫孔隧道长度与常规杂交种对照相比,分别减少39．97％、36．2％和53．83％,平均减少43．36％,抗虫性明显提高。农艺性状鉴定结果显示,转基因系配制的杂交种与对照在株高、穗长、穗行数、行粒数和百粒重上无显著差异。研究认为,Bt基因可用于玉米的抗螟性改良,为转基因抗虫玉米自交系能够直接用于玉米杂交种改良提供了依据。     

NaCl胁迫对转CHB101基因玉米幼苗生长的影响

以转CHB101基因及非转基因玉米自交系为试验材料,采用Hoagland营养液水培方法,研究在不同浓度的NaCl胁迫下,转CHB101基因玉米及非转基因玉米幼苗生长状况及生理指标差异。结果表明:转基因玉米自交系幼苗的生长状况优于对照。随着NaCl胁迫浓度的增加,转基因玉米自交系幼苗的根长、地上及地下部分含水量、根系脱氢酶活力、叶绿素含量都高于非转基因系幼苗,并且变化幅度较小;高盐胁迫下,转基因玉米幼苗的丙二醛含量变化幅度小于非转基因,脯氨酸含量、可溶性糖含量高于非转基因。以上结果说明导入的CHB101基因增强了玉米的耐盐性。