家蚕品种金秋及其杂交亲本的蛋白质表达谱分析

 【目的】探讨家蚕杂交育成品种及其亲本蛋白水平的差异,从蛋白水平分析育成品种的基因结构,为阐明杂交育种成败的分子机理创造条件。【方法】采用蛋白质组研究技术,分析杂交亲本及其育成品种的丝腺、血淋巴和中肠的蛋白质表达谱。【结果】3种组织器官中育成品种金秋与两个亲本的匹配蛋白斑点比例只达到70%左右,剩余30%左右是各个品种的特异蛋白斑点;在匹配蛋白斑点中,还有9%～24%的蛋白表现上调和下调。这些特异蛋白可能是两个亲本的基因在杂交育成品种中产生了互作而形成的新蛋白,也可能是对相同的蛋白进行了不同的修饰而获得的修饰蛋白。【结论】新品种的育成,除了汇集亲本的优良基因外,还有赖于基因互作产生的新功能蛋白的作用。     

蜕皮前后家蚕幼虫血淋巴的蛋白质组学分析

 【目的】对家蚕幼虫血淋巴在蜕皮前后的蛋白质变化进行研究,发现参与蜕皮过程的蛋白质,为深入研究家蚕幼虫的蜕皮过程提供新的思路,也为研究其它昆虫的蜕皮过程提供启示。【方法】应用以双向电泳（2-DE）进行蛋白质分离、以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行蛋白质鉴定的蛋白质组学方法对家蚕幼虫血淋巴在蜕皮前后的蛋白质变化进行研究。【结果】经过蜕皮过程后,家蚕幼虫血淋巴中蛋白质的数量、种类和部分蛋白质的表达量发生了明显的变化：4眠蚕血淋巴中有10个明显的特异蛋白点,5龄起蚕血淋巴中2个明显的特异蛋白点,还有2个蛋白点的表达量发生了明显的上调或下调。经过质谱鉴定,以上14个蛋白点中 有9个具有可信结果,其中4种蛋白被过去的试验证明与蜕皮过程有关,其它5种蛋白质是新发现的与蜕皮过程有关的蛋白质。【结论】化学感应蛋白9、储存蛋白2、抗胰蛋白酶原、酚氧化酶原亚基1和亲环蛋白A、KIF27类蛋白、天蚕素原、副肌球蛋白、神经原钙结合蛋白以及另外5种未被鉴定的蛋白质可能参与了家蚕幼虫的蜕皮过程。     

对虾寄生纤毛虫（蟹栖拟阿脑虫）的实验室培养结果与分析

用三种不同的培养基(对虾血淋巴、对虾组织捣碎液以及煮沸冷却海水)、三种不同浓度(1％、2％、5％)的对虾血淋巴以及三种不同温度(8℃、12℃、25℃)培养和研究了一种能侵入对虾体内并引起对虾大批死亡的寄生纤毛虫——蟹栖拟阿脑虫。其结果是,在血淋巴及组织液中,纤毛虫繁殖非常迅速,短时间内即可达高峰(大于10~5个/ml)。其繁殖速度与温度成正比。在8℃时,繁殖到高峰期需5～6天,12℃时,需3～4天,而25℃时仅需1天。纤毛虫的繁殖密度与对虾血淋巴浓度成正相关关系。     

Effects of dissolved oxygen on hemolymph parameters of freshwater giant prawn, Macrobrachium rosenbergii (de Man)

Profiles of changes in physiological parameters of freshwater giant prawns, Macrobrachium rosenbergii, exposed to various dissolved oxygen (DO) levels of 7.75, 4.75, 2.75, and 1.75 mg l⁻¹ are reported. The parameters involved in osmoregulation and oxygen transport were monitored for a 6-day period. Notable depressions in hemolymph osmolality, Na⁺, K⁺, and Cl⁻ contents were observed within 24 h after exposure to hypoxia at 2.75 and 1.75 mg O₂ l⁻¹, and thereafter remained at rather steady levels, which were significantly lower than those under normoxic conditions (4.75–7.75 mg O₂ l⁻¹). The extent of depression of osmotic-related constituents, hemolymph osmolality and Cl⁻ in particular, increased with decreased DO.

Oxyhemocyanin constituted 65.46–65.84% of total hemolymph proteins under the various DO levels examined; both hemolymph oxyhemocyanin and proteins showed notable elevations 24 h after exposure to hypoxic conditions, and reached the highest and constant level by 48 h after exposure. The compensatory responses of prawns to reduced O₂ were manifested by increased O₂ uptake through augmentation of hemocyanin, which results in enhancement of oxygen binding capacity of the hemolymph. In the same period, a significant surge of the respiratory products, PCO₂ and HCO₃⁻, was also demonstrated 6 h after exposure to hypoxic conditions which resulted in hemolymph alkalosis. These processes likely resulted in an increase in water influx and consequent declines in hemolymph osmolality and ion composition. Furthermore, hyperventilation and respiratory alkalosis, indicated by increased oxyhemocyanin and pH, respectively, were found to be predominant responses of M. rosenbergii to hypoxic stress.     

烟粉虱血细胞对白僵菌的防御反应

为了探讨烟粉虱（Bemisia tabaci）血淋巴对白僵菌（Beauveria bassiana）的防御机制,利用吉姆萨染色法在光学显微镜下观察烟粉虱3 龄若虫血细胞感染白僵菌后的免疫反应。结果表明：白僵菌的入侵可导致烟粉虱血细胞数量发生改变。体表接种36 h 后,虫体内出现芽生孢子,血细胞数量开始增加,芽生孢子被吸附到浆血细胞表面;接种60 h 后菌丝段吸附到粒血细胞表面;接种96 h 后粒血细胞表面吸附大量菌丝段,此时昆虫体色已经呈现感染症状,说明真菌已经打破了烟粉虱的防御体系,烟粉虱幼虫血淋巴对白僵菌有短时间抑制。     

氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽含量的变化

家蚕血淋巴中含有一定量的谷胱甘肽(GSH)，它随着蚕体的生长发育呈现一定规律的变化，5龄前期较高，中期下降，到后期又迅速升高。同时，在一定程度的氟化物中毒以后，GSH含量也呈同样的变化趋势，但其含量比正常蚕少。因此，家蚕血淋巴中GSH含量的变化，可以作为了解家蚕氟中毒的一种依据。     

Degradation of the neolignan, burchellin in the hemolymph of the bloodsucking insect Rhodnius prolixus

The neolignan, burchellin, a natural compound that reduces urine excretion in larvae of the bloodsucking bug, Rhodnius prolixus, a vector of Chagas' disease, is rapidly degraded in the hemolymph of the insect. The main product that accumulates in this tissue has been shown to be piperonyl alcohol. Other catabolites have been identified by GC-MS analysis.     

不同提取方法对东亚飞蝗酚氧化酶活性的测定与比较

[目的]研究东亚飞蝗酚氧化酶活性及动态变化。[方法]通过不同抽提方法制备虫体体液和淋巴液,测定不同位点酚氧化酶活性及动态变化。[结果]血淋巴中酚氧化酶活性显著高于虫体体液中酚氧化酶活性,且雌虫酶活性显著高于雄虫;虫体体液内酚氧化酶活性随着体外放置时间的延长而显著增强;成虫血淋巴内酚氧化酶活性随着时间的延长而显著增强。[结论]酚氧化酶一部分存在于东亚飞蝗组织和细胞中参与虫体发育和构建,一部分存在于血淋巴中参与免疫防御作用。酚氧化酶稳定性非常强,是昆虫宽泛适应能力和强大免疫能力的有效保障。     

不同光照周期对脊尾白虾生长、性腺发育以及血淋巴生化成分的影响

为探讨不同光照周期对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)生长、性腺发育以及血淋巴生化成分的影响,本研究挑选体质量为(0.71±0.05) g、体长为(3.62±0.28) cm的脊尾白虾,在水温23~25℃、盐度22~24、pH 7.8~8.1、光照强度为1000 lx的养殖条件下,测定其在5种光照周期(全光照L、16L︰8D、12L︰12D、8L︰16D、全黑暗D,L表示光照时长,D表示黑暗时长)下的生长、性腺发育以及血淋巴生化成分等相关指标。结果显示,在存活率方面,全黑暗组最高[(86.67±5.77)%],其次为12L︰12D组[(83.33±8.82)%],再次为8L︰16D组[(80.00±3.33)%],3组之间无显著差异(P>0.05);在特定生长率方面,8L︰16D组的特定生长率为(2.49±0.20)%/d,显著高于全黑暗组(P<0.05);在蜕壳率方面,8L︰16D组蜕壳率最高,为(6.96±0.50)次/(尾·d)。性腺指数随光照时间的缩短逐渐增大,在光照时间为8L时达到最高值[(2.37±0.04)%],显著高于其他组(P<0.05);8L︰16D组卵巢成熟率为(42.93±4.57)%,显著高于全黑暗组(P<0.05);8L︰16D组卵巢相对长度在实验第30天时显著高于其他组(P<0.05)。8L︰16D组血淋巴蛋白质和胆固醇浓度显著高于全光照组、16L︰8D组和全黑暗组(P<0.05),与12L︰12D组无显著差异(P>0.05);8L︰16D组葡萄糖浓度显著高于全光照组和全黑暗组(P<0.05),与16L︰8D组和12L︰12D组差异不显著(P>0.05);8L︰16D组甘油三酯浓度显著高于其他组(P<0.05)。研究表明,不同光照周期对脊尾白虾生长、性腺发育以及血淋巴生化成分均产生不同程度的影响,8L︰16D是脊尾白虾亲虾促熟和工厂化养殖较为适宜的光照周期。     

蜜蜂血淋巴中的K^＋和Na^＋含量测定

以意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica)为实验材料，应用755B型分光光度计，测定了蜜蜂幼虫、刚出房的工蜂、哺育工蜂及采集蜂的血淋巴中K^ 和Na^ 含量，结果表明：不同发育阶段的蜜蜂血淋巴中所含K^ 和Na^ 含量有所差异。