大鼠表皮干细胞的分离及鉴定

在试验中采用组织块法分离培养大鼠表皮干细胞,观察所培养的细胞形态,免疫组织化学方法检测CK15、P63、α6-integrin表达情况并用α6-integrin标记表皮干细胞经流式细胞仪检测其标记率,同时对1~6代表皮干细胞在不同培养时间计数。结果表明,采用组织块法能分离得到大鼠表皮干细胞,且获得的细胞生长良好;干细胞标记物CK15、α6-integrin、P63呈阳性。经流式细胞仪检测得知,黏附细胞被α6-integrin标记的几率为80%,而未黏附细胞被α6-integrin标记的几率仅为2%,二者相差较大。     

不同属种肉类对大鼠血清生化指标与抗氧化能力的影响

探讨了不同属种肉类对大鼠血清生化指标和抗氧化机能的影响。试验选取体重约177 g的雄性SD大鼠90只,随机分为3组即狗肉组、羊肉组、鸭肉组,分别将日粮中的主要蛋白源替换为狗肉、羊肉、鸭肉(CP 31%)。试验期为4周。结果表明:饲喂狗肉和羊肉能显著提高大鼠生长性能,且前者使得大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)活性极显著升高(P<0.01);而饲喂鸭肉使得大鼠血清丙氨酸转移酶(ALT)活性显著升高(P<0.05),天冬氨酸转移酶(AST)、血清尿素氮(BUN)活性极显著升高(P<0.01)。不同属种的肉之间,鸭肉组肝脏和肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均极显著升高(P<0.01)。结果提示:饲喂狗肉和羊肉能促进机体蛋白质合成,有利于蛋白质沉积;饲喂鸭肉则具有增强机体抗氧化的能力。     

大鼠胫前肌和比目鱼肌生后增龄的分析

骨骼肌是一个非均质组织,存在功能多样性是由于肌球蛋白存在多种亚型。肌球蛋白是热休克蛋白,由2个重链(MHC)和4个轻链(MLC)组成。肌球蛋白头部重链在N-末端包含大量球状的水解     

不同"肝郁"大鼠模型生殖激素及卵泡发育的研究

目的:通过对几种"肝郁"大鼠模型生殖激素及卵泡发育的比较研究,探讨适合"肝郁与不孕关系研究"的动物模型.方法:选择有性周期的正常雌性SD大鼠为实验动物,分为正常对照组、带枷组、夹尾组、捆绑组、慢性应激组,现察各组大鼠一般情况,比较各级卵泡数、黄体数,卵巢血管数目、子宫内膜厚度及血清E2、P、T、PRL的含量.结果:与正常对照组比较,带枷组及夹尾组大鼠体质量无明显差异,捆绑组及慢性应激组大鼠体质量增长迟缓;带枷组、捆绑组及慢性应激组的窦前卵泡数明显减少,各模型组的窦状卵泡数均明显减少,带枷组、夹尾组及捆绑组的成熟卵泡数明显减少,各模型组的黄体数无明显差异;各模型组卵巢血管数明显减少、子宫内膜厚度明显降低;带枷组及捆绑组血清PRL明显增多、E2明显降低,而夹尾组及慢性应激组血清PRL、E2无明显差异;各模型组血清P、T无明显差异.结论:采用颈部带枷单笼喂养所致的"肝郁"模型,可能是更适合"肝郁与不孕关系研究"的动物模型.     

血管活性肠肽在动情周期大鼠子宫中的分布

采用免疫组化SP法,观察血管活性肠肽(VIP)免疫反应阳性物质在SD大鼠动情周期子宫中的分布情况和变化规律。结果表明,在内膜层中,VIP免疫阳性产物定位于子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞、基质细胞和血管内皮细胞中。在肌层中,VIP免疫阳性产物主要位于VIP样阳性神经纤维中。VIP免疫阳性产物相对表达量的t检验表明:子宫内膜VIP在动情后期表达量较发情前期极显著减少(P0.01);与动情前期相比,子宫肌层VIP在动情期的表达量显著减少(P0.05),在动情后期的表达量极显著减少(P0.01)。但是在动情间期VIP的表达量较动情后期又极显著回升(P0.01)。VIP在动情周期大鼠子宫中表达分布存在一定规律性,可能与其免疫调节和腺体分泌等功能有关。     

松针挥发油对乌头碱诱发大鼠心律失常的影响

为了测定松针挥发油对乌头碱诱发大鼠心律失常的影响,采用静脉注射乌头碱复制大鼠心律失常的动物模型,观察灌胃给药松针挥发油对抗乌头碱诱发大鼠心律失常的作用。结果发现,松针挥发油的低、中、高剂量可显著延迟VP(室性早博)和VT(室性心动过速)的出现(与阴性对照组对比P0.01、P0.05),而以中剂量效果最好(与阴性对照组对比P0.01)。阳性对照组普罗帕酮对VT(室性心动过速)和VF(心室纤颤)的出现具显著延迟作用(与阴性对照组对比P0.01),但对VP的出现与阴性对照组相比却无显著差别(P0.05)。说明松针挥发油对药物诱发的心律失常具对抗作用。     

大鼠胰腺间充质干细胞的分离鉴定及体外诱导成脂和成骨研究

从新生大鼠胰腺中分离出间充质干细胞(MSCs),研究其分化潜能,为胰腺疾病的干细胞移植治疗探寻新的细胞来源。无菌条件取出新生3 d的大鼠胰腺,通过Ⅴ型胶原酶消化获得细胞,常规培养传代、贴壁筛选法纯化细胞、吉姆萨染色观察细胞形态、流式细胞仪测定表面标志CD34和CD44;用成骨、成脂诱导剂鉴定其分化潜能。结果显示,纯化细胞在成骨诱导剂作用下被诱导成成骨细胞,在成脂诱导剂作用下被诱导成脂肪细胞。证明所纯化的细胞为尚未分化的基质细胞,而不是组织的成体细胞,它具有多向分化潜能。     

SD大鼠睾丸支持细胞的分离、培养、纯化及鉴定

为进一步简化、优化SD大鼠睾丸支持细胞的体外培养条件及鉴定方法,采用三酶两步消化法和差异贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞,并用HE染色、油红染色、Feulgen染色及透射电镜扫描其超微结构予以鉴定。结果表明：平均0．10g睾丸组织可获得2．5×10^6个支持细胞,细胞存活率90％以上,体外培养5h后开始贴壁,96h后细胞生长速率下降,其对数生长期为3—7d,整个体外生长周期约为10～15d。对获得的纯化细胞进行鉴定,发现其形态结构及超微结构与支持细胞的形态特征一致。可见,采用三酶两步消化法和差异贴壁法,可达到分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞的目的。     

生长素及其mRNA在大鼠性腺中的分布

【目的】阐明生长素(Ghrelin)及其mRNA在大鼠卵巢和睾丸中的分布。【方法】取成年SD大鼠的睾丸和卵巢,制成石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法,分别检测Ghrelin和Ghrelin mRNA在大鼠性腺组织中的定位。【结果】雄性大鼠睾丸间质细胞、支持细胞、初级精母细胞、次级精母细胞中均有Ghrelin分布,而精原细胞、精子细胞、肌样细胞中均无Ghrelin分布;Ghrelin mRNA的分布规律与Ghrelin一致。在雌性大鼠卵巢中,Ghrelin主要分布在黄体细胞、卵巢门间质细胞、卵母细胞上;Ghrelin mRNA在黄体细胞、卵巢门间质细胞、原始卵泡、初级卵泡的颗粒层细胞、次级卵泡的卵泡膜层细胞和颗粒层细胞中均有分布。【结论】Ghrelin及其mRNA在大鼠性腺中均有分布,可能对大鼠性腺的发育及其功能有一定的调控作用。     

神经肽Y在动情周期大鼠子宫中的分布

【目的】研究神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)免疫反应阳性物质在大鼠动情周期子宫中的分布情况及其变化规律。【方法】采用阴道涂片法鉴定发情周期,选取情期正常的20只雌性大鼠,均分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,处死各组大鼠,取子宫制作石蜡切片,经免疫组织化学SP法染色后,观察NPY在大鼠动情周期子宫中的分布及变化规律。【结果】在内膜层,大多数NPY免疫阳性产物位于细胞中,小部分位于点状和细丝状纤维中。在肌层,NPY免疫阳性产物主要位于NPY纤维中。NPY免疫阳性产物相对表达量的t检验结果表明,子宫内膜NPY在动情期和动情间期的表达较动情前期显著减少(P0.05),较动情后期极显著减少(P0.01);子宫肌层NPY在动情后期的表达较动情期显著回升(P0.05),在动情间期的表达较动情后期极显著减少(P0.01)。【结论】NPY在不同生理时期大鼠子宫中的表达分布存在一定规律性,可能与其生理调节功能有关。