引种紫锥菊中松果菊苷含量的分析测定

采集云南省蒙自市引种栽培的紫锥菊,以其根、茎、叶和头状花序为试材,采用高效液相色谱(HPLC)方法研究了松果菊苷的定量分析方法,并对建立的分析技术进行方法学考察,运用该定量分析技术对紫锥菊中不同部位的松果菊苷含量进行测定。结果表明:松果菊苷含量在0.021～0.321μg范围内与峰面积之间呈良好的线性关系,平均加标回收率为93.24%,RSD值为1.28%;紫锥菊不同部位松果菊苷含量在0.075%～0.221%范围内,且叶、头状花序中松果菊苷含量显著高于根和茎中含量。建立的松果菊苷测定分析方法定性定量准确、可靠、重现性好,可用于紫锥菊药材中松果菊苷的质量评价;云南省蒙自市引种栽培生产的紫锥菊药材中松果菊苷含量较高,优于国外原产地及国内报道的引种栽培区。     

冶力关林区紫果云杉天然林种群结构特征

紫果云杉为我国特有树种,以冶力关林区的紫果云杉天然种群为对象,通过样地调查和数据统计,绘制种群结构图,编制静态生命表,分析存活曲线,运用数量化分析法研究种群动态,并用时间序列模型对种群数量动态进行预测,以揭示本区域紫果云杉的生存现状,为该物种的保护和经营提供理论依据。结果表明,紫果云杉幼苗占种群个体总数的21.05％,Ⅱ龄级时,个体数量迅速减少,幼苗死亡率达到80.40％,出现瓶颈现象,种群结构近似于纺锤型。总体来看,紫果云杉种群幼苗数量优势不明显,种群更接近于稳定型,种群存活曲线符合Deevey-Ⅱ型;未来2、4、6、8个龄级后,种群个体数量呈增长趋势,但增长性低,增长潜力小,并对外界干扰较敏感;竞争、自疏作用造成幼苗、幼树存活率偏低是影响紫果云杉种群自然更新关键因素,幼苗的分布状况也影响着种群的发展。散生的种群在自身比例较低的混交林中始终处于劣势地位,不利于种群增长。因此,须采取人工措施使种群形成规模,促进种群增长。     

Detection of somaclonal variation in micro-propagated Echinacea purpurea using AFLP marker

This study used amplified fragment length polymorphism (AFLP) analysis to assess genetic fidelity between primary regenerants of Echinacea purpurea derived from leaf organogenesis and their donor plants. A total of 40 regenerants and 5 donors (T6-28-0, T3-23-0, T5-9-0, T2-15-0 and D7-4-0) were subjected to AFLP analysis using eight primer pairs. The results indicated that a total of 3805 scorable fragments were observed, of which 301 (9.40%) were polymorphic among the tested regenerants and donors probed with eight primer pairs. The percentage of polymorphic fragments within five donor groups averaged from 1.6% to 20.6%. Jaccard's similarity coefficients among regenerants and donors averaged from 0.9508 to 0.9935. However, only two regenerants (T2-15-2 and T2-15-3) had Jaccard's similarity coefficient value of 1 as comparing to their donor, thus they were true-to-type to their donor T2-15-0. It appears that AFLP is a sensitive and reliable molecular marker to detect possible somaclonal variation in micro-propagation system of E. purpurea. In vitro culture-induced somaclonal variation occurs in primary regenerants of E. purpurea derived from leaf organogenesis, though some of regenerants have genetic similarity greater than 0.99 in comparison with their donors.     

内生真菌对盐胁迫下紫花针茅种子萌发和幼苗生长的研究

紫花针茅是青海湖流域盐渍化危害严重的高寒草地优势禾草之一，天然草地中紫花针茅保持较高的内生真菌侵染率，内生真菌侵染能提高禾草耐盐能力，然而有关盐胁迫下，内生真菌提高紫花针茅种子萌发和幼苗生长的研究鲜有报道。以带菌（E+）和不带菌（E-）的紫花针茅种子为研究对象，研究不同浓度的单盐（NaCl、Na₂SO₄、Na₂CO₃、NaHCO₃）和复合盐（NaCl+Na₂CO₃）胁迫对E+和E-种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明：随盐浓度增加，紫花针茅种子发芽率、发芽势和发芽指数不断降低，而内生真菌的存在抑制了其下降趋势；幼苗和胚根生长抑制强度随盐浓度增加，且种子萌发相对盐害率也持续增加。Na₂CO₃和Na₂SO₄对紫花针茅种子萌发和幼苗生长产生的盐害较强。由此可见，内生真菌侵染是紫花针茅适应青海湖流域盐渍化土壤且成为高寒草原优势禾草的原因之一，这将为利用内生真菌-紫花针茅共生体进行盐碱地改良和耐盐禾草种质创新奠定了理论基础。     

紫锥菊根中菊苣酸提取工艺及对氧化应激肠道细胞的保护作用研究

【目的】优化紫锥菊根中菊苣酸提取工艺，并测定菊苣酸在肠道细胞中的抗氧化效果。【方法】试验选用有机溶剂乙醇作为紫锥菊根粉末（80目）提取溶剂，对提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、提取次数以及原料与溶剂的比例等因素进行分析，得到每个因素下菊苣酸得率和该因素的对应曲线，再在单因素基础上，选择溶剂浓度（30%、40%、50%）、提取温度（60、70、80 ℃）、提取时间（1、2、3 h）和料液比（1∶12、1∶15、1∶18）4个因素3个水平设计正交试验。用不同浓度H₂O₂（100、200、400、600、800、1 000 μmol/L）处理人结肠腺癌细胞（Caco-2）与猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）建立氧化应激模型。分别使用不同浓度菊苣酸（0、100、200、400、600、800、1 000 μmol/L）处理氧化应激前后的细胞24 h，应用MTT法，分别测定菊苣酸对两种肠道细胞氧化应激的保护和缓解效果。【结果】菊苣酸最佳提取条件为：50%浓度的乙醇在70 ℃下采用1∶18的料液比，超声辅助提取2 h，得率为1.89 mg/g。细胞抗氧化试验结果显示，菊苣酸对Caco-2和IPEC-J2两种肠道细胞氧化应激均具有保护和缓解效果，对Caco-2细胞的保护作用和缓解作用的半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为172.6和207.5 μmol/L，对IPEC-J2细胞的保护作用和缓解作用的IC₅₀值分别为133.1和196.5 μmol/L。【结论】试验得到了紫锥菊根粉中菊苣酸的最佳提取方案，为工业化高效提取菊苣酸提供了参考；同时菊苣酸对氧化应激的肠道细胞具有很好的保护作用，经计算其保护作用的IC₅₀值较缓解效果更小，进一步证明了菊苣酸具有成为肠道抗氧化剂的潜力。