番茄ShARPC5抗白粉病功能分析

【目的】白粉病（powdery mildew）是番茄生产上的重要病害,严重影响番茄的产量。番茄基因组测序工作的完成为抗病基因挖掘提供了重要的信息资源。ARP2/3（actin-related protein 2 and 3）复合体是肌动蛋白微丝骨架动力学的主要调控因子,能够参与包括响应外界胁迫等多种细胞学过程。本研究通过对番茄ARPC5（actin-related protein C5）进行克隆和抗病功能验证,为番茄基因组信息完善、抗病机制解析和分子育种等方面打下基础。【方法】从番茄LA1777（Solanum habrochaites）cDNA中PCR扩增ShARPC5,使用DNAMAN 6.0进行多序列比对;MEGA 6.0构建系统发育树;应用在线工具ProtComp v. 9.0进行亚细胞定位预测。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）比较接种白粉菌（Oidium neolycopersici,On-Lz）后高感品种Moneymaker（MM）和高抗品种LA1777中番茄ARPC5的表达特征,分析白粉菌侵染与ARPC5表达的相关性。应用病毒诱导的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）技术进一步验证该基因在番茄中的抗病功能,观察沉默株和野生型株系接种后表型变化,利用台盼蓝和DAB染色法检测植株产生过敏性坏死和H₂O₂的能力,并检测ShARPC5沉默后一些与植物抗病相关标记基因的表达变化。采用农杆菌浸花法遗传转化拟南芥过表达ShARPC5植株,观察转基因和野生型株系接种后表型变化,并统计单病斑分生孢子数。【结果】从番茄品种LA1777中克隆到ShARPC5,编码132个氨基酸残基,包含一个保守的P16-Arc结构域。与番茄MM-白粉菌亲和互作相比,非亲和互作的番茄品种LA1777在接种白粉菌后,ShARPC5显著上调表达,尤其在接种后18 h。在番茄上沉默ShARPC5能够增加植株对白粉菌On-Lz的敏感性,防卫反应基因PR1b1显著下调表达。组织学观察显示与对照植株相比,ShARPC5沉默植株接种后诱导产生过敏性坏死和活性氧减少。在烟草上瞬时过表达ShARPC5能够诱导产生坏死斑。相反,在拟南芥上过表达ShARPC5能够增加植物的抗病性。【结论】ShARPC5是番茄响应白粉菌侵染的重要基因,可减轻番茄白粉病的发病程度,在番茄抗白粉病机理研究方面具有较大的应用价值,可作为番茄抗白粉病分子育种的一个候选基因。     

苏里格南部地区山1段和盒8段骨架砂体平面展布特征及影响因素分析

对苏里格南部地区上古生界山1段和盒8段骨架砂体平面展布规律和影响因素进行了分忻。研究表明，山1段、盒8段砂体呈近北南向连片展布，且自北向南厚度变薄，从山1段到盒8上亚段骨架砂体在总体上向南推进；山1段分为6套骨架砂烙，盒8下亚段和盒8上亚段各分为4套骨架砂体，其中山1段骨架砂体呈条带状展布，盒8段骨架砂体呈辫状分布，且山1段骨架砂体厚度较盒8段薄；物源、古地貌、沉积相和水动力是影响骨架砂体展布的主要因素。     

花生种子特异启动子AHSSP1的克隆及功能分析

为丰富花生种子特异启动子资源,本研究利用PCR技术在花生基因组中克隆了种子贮藏蛋白基因PSC32的启动子AHSSP1,利用半定量RT-PCR检测了PSC32基因表达模式,借助NewPLACE在线分析了AHSSP1序列中存在的顺式作用元件,并构建了AHSSP1驱动GUS报告基因的表达载体,经农杆菌转化获得转基因拟南芥,经GUS组织化学染色鉴定了该启动子的功能。结果表明,PSC32基因957 bp长的启动子AHSSP1序列具备种子特异表达启动子特有的3个RY REPEAT元件。半定量RT-PCR分析发现,PSC32基因在花生成熟种子中表达,而在饱果成熟期根、茎、叶片、花、入土前的果针、成熟种子的果壳中均不表达。GUS组织化学染色发现,转基因拟南芥成熟种子以及萌发种子的子叶、下胚轴和胚根均能够被染上蓝色;长出真叶后,子叶和下胚轴仍能被染色,而根和真叶不能被染上蓝色;成年期转基因拟南芥的叶片也不能被染上蓝色。而野生型拟南芥整个生长时期均不能被染上蓝色。以上现象说明AHSSP1是一个种子特异启动子。本研究丰富了花生种子特异启动子的资源,对花生籽仁品质改良或以花生籽仁作为“生物反应器”的研究具有重要的应用价值。     

猪坏死性杆菌病防治技术

<正>猪坏死性杆菌病是由坏死杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。以皮肤皮下组织发生坏死并在内脏形成转移性坏死病灶为主要特征。坏死杆菌为多形的杆菌,革兰氏染色阴性,染色时因着色不匀犹如串珠状。本菌严格厌氧,至少产生两种毒素,即外毒素和内毒素。对理化因素抵抗力不强,在1%高锰酸钾、5%氢氧化钠、1%福尔马林或5%来苏儿中15分钟内可被杀     

中西医结合治疗鱼肠炎

鱼肠炎的病原体为肠型点状气单胞菌。菌体短杆状,两端圆形,大小为1.0~1.3mm×0.4~0.5mm,多数两个相连,极端单鞭毛,有动力,无芽孢,染色均匀,革兰氏阴性。一般认为是条件致病菌,可由鱼体受损或环境条件而诱发。1症状病鱼体色发黑,头部尤其乌黑,俗称“乌头瘟”。病鱼离群独游,反应迟钝,病情较重的,腹部膨大,两侧常有红斑,明显“蛀鳍”,肛门常红肿突出,呈紫红色,轻压腹部,有黄色粘液和血脓流出。剖开腹部,可见腹腔积液,肠壁充血发炎,肠管呈红色或紫红色,后部尤甚。剖开肠道,内无食物,肠道粘膜细胞往往溃烂脱落,并与血液混合成血脓,充塞于肠管中。肝脏亦常有红色点状淤血。俗称“烂肠瘟”。     

用荧光染色法检测BVDV最佳条件的探索

本实验对荧光染色法检测BVDV的最佳条件进行了摸索,包括MDBK细胞培养的密度、BVDV一抗和二抗浓度等因素对荧光染色效果的影响,获得BVDV染色一抗稀释度在1:150~1:200,二抗稀释度在1:200为最佳稀释比例,MDBK的细胞密度在104个/ml时制备的荧光染色片最优,可获得最佳观察效果,有利于判定实验结果.     

野鸭白痢病的诊断与防制治

近年来野鸭因味美、营养丰富而深受消费者欢迎,规模养殖也有较快发展,野鸭疾病发生也随之增加。镇江某野鸭场发生以气喘、拉白色稀粪为特征疾病,经剖检和实验室检查诊断为白痢病,情况总结如     

生活向导

三招识别染色花椒 染色花椒叫做“颜椒”，原料多是未成熟的小红花椒，因个头小，品质差，属于被淘汰的花椒。这种花椒红色鲜艳度不够，不法分子用“罗丹明B”对其染色后，再混入正品中销售，牟取暴利。识别有三招，用眼看：正品花椒色泽多为紫红或暗红，     

鸡传染性法氏囊病毒常用检测技术概述

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的一种主要危害雏鸡的免疫抑制性传染病。本病发病率高,发生本病的鸡场,常常出现新城疫、马立克氏病等疫苗接种的免疫失败,这种免疫抑制现象常使发病率和死亡率急剧上升。因此快速准确地检测鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）,对正确诊断、预防鸡传染性法氏囊病,降低养殖户的经济损失十分重要。本文将就鸡传染性法氏囊病病毒常用的检测技术进行分类介绍。