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61.
应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA 总被引:1,自引:0,他引:1
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴,取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴,绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明,本方法操作简单,结果可靠,稳定性高,适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。 相似文献
62.
63.
CHENXiu-hua LIUQiao-quan WuHsin-kan WANGZong-yang GuMing-hong 《水稻科学》2004,11(3):81-85
Two starch-branching enzyme (SBE) in rice, is known to be a key enzyme in amylopectin biosynthesis. The cDNA of two SBE(starch-branching enzyme) genes SheI and Shed encoding SBE Ⅰ and SBE Ⅲ (two major isoforms in rice) were cloned by an improved RT-PCR technique, from a template cDNA libray, derived from the total mRNAs extracted from the immature seeds of a japonica rice Wuyunjing 7. DNA sequence analysis showed that the size of the cloned SheI and Shed cDNAs were 2490 and 2481 bp long, respectively, including their entire coding sequences. Comparison analysis indicated that the nucleotide sequence of She3 was the same as that of shed (Genbank Accession No. D16201) as reported previously. There were only four base-pairs difference,which resulted in changes of two deduced amino acids between the cloned She1 cDNA and the reported she1 (Genbank Accession No. D11082). The cloned SheI and Shed cDNAs make it possible to improve rice starch quality through genetic engineering. 相似文献
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甘蔗持续生产综合管理的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
全世界的甘蔗种植者(下面简称为蔗农)(甘蔗:甘蔗属的种间杂种)面临不断的挑战:要求利用适宜环保的方法生产甘蔗,同时保证甘蔗产量和经济利益的持续增长。一种可以有效接受挑战的农业系统被称为作物综合管理系统。本文目的在于回顾近期一些有利于促进甘蔗综合管理系统应用的研究。农业方面的研究包括:轮作甘蔗的增产、地理信息系统、模型学、最佳施肥、传统育种方法和分子育种方法、病理学、昆虫学、除草方法。同时回顾蔗田与工厂的持续关系。本文认为:不同国家和地区的甘蔗种植者面临不同的挑战。然而,广泛地用来解决这些问题的研究方法是结合生产、经济效益、生态保护的作物综合管理系统。 相似文献
66.
猪生殖与呼吸综合征病毒广东株ORF3和ORF5基因的克隆与分析 总被引:2,自引:0,他引:2
采用RT-PCR方法扩增了猪生殖与呼吸综合征病毒广东株的糖蛋白基因ORF3、ORF5,并对其进行了克隆和序列分析。用Blast分析软件比较分析了其与VR-2332株以及流行的欧洲株之间的同源性,并对其编码氨基酸序列的分子质量、等电点、穿膜区、糖基化位点进行了分析。结果显示,PRRSV广东株ORF3与美洲株的同源性达90%,而与欧洲株只是在318~393bp、502~697bp之间有77%左右的同源性;ORF5与美洲株的同源性为88%,与欧洲株仅在133~209bp区间有77%左右的同源性。 相似文献
67.
夏播花生要高产 搞好播种是关键 总被引:1,自引:0,他引:1
《北京农业》2004,(6):35-36
1.轮作换茬种植可高产花生喜生茬、怕重茬.重茬花生一般表现为棵小、叶黄、早落叶、病虫多、果少而小.一些667米2产500千克的花生田多是在轮作五六年或未种植过豆科作物的肥沃土地上获得的.在重茬地上种植花生,即使增加肥料,也很难达到预期的产量.实践证明,轮作换茬是有效提高花生产量的措施之一. 相似文献
68.
采用样线与样方相结合的调查方法,根据点相关系数及X^2值连续性较正公式,测定了小兴安岭凉水自然保护区具有环境梯度的7个森林类型内主要蕨类植物的种间联结。结果表明:各林型均有其适生的蕨类类群,与该类群呈正联结的蕨类种其数量分布也多,反之刚少;具有环境梯度的不同林型序列,反映出蕨类植物适生生境的不同,据此,将本区主要蕨类植物分为4种生态类型。 相似文献
69.
参考 Genbank收录的 TGEV- Miller株的基因序列 ,自行设计合成 1对引物 (TGEVP5 /P6 ) ,对不同代次的 TGEV疫苗弱毒 STC3及种毒 、种毒 进行了 RT- PCR扩增 ,产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,均出现 1条大约 12 6 2 bp的目的条带 ,经 Eco R 酶切 ,都产生了 871bp和391bp左右的两个片段 ,与预期大小相符。将种毒 RT- PCR扩增目的条带回收纯化后克隆入PMD18- T载体中 ,转化宿主菌 DH5 α,挑选阳性克隆 (命名为 PTs) ,提取重组质粒 ,用 Hpa 、Eco R 对重组质粒进行酶切鉴定以及 PCR扩增 ,然后进行序列测定 ,并进行了序列分析 ,证实与国外标准毒株 Miller、Fs772 / 70、Purdue、TO14等有较高的同源性 相似文献
70.
旱农区草田轮作研究报告 总被引:5,自引:0,他引:5
历时8年,应用“等价产量”和“蛋白质产量”的概念,对旱农区紫花苜蓿、红豆草和百脉根介入粮田轮作的产出效益分析研究表明,豆科牧草对后作物有明显增产效果。三种牧草对后作的蛋白质产量增产幅度分别为148%—303%、170%—257%、155%—328%,等价产量增产幅度依次为17%—295%、73%—232%、119%—328%。豆科牧草轮作年限以3—5年为宜。 相似文献