草地贪夜蛾RACK1基因生物信息学及表达分析

蛋白激酶C受体l(Receptor for Activated C Kinase 1,RACKl)是WD40家族的成员，其作为稳定蛋白激酶C(Protein Kinases C,PKC)的受体，参与了多种生理活动。课题组前期从转录组数据中筛选获得了草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）的RACK1序列，该研究通过生物信息软件对SfRACK1进行生物信息学分析，并以氨基酸序列为基础与其他昆虫的RACK1进行同源性比较；同时分析RACK1在草地贪夜蛾不同发育阶段不同组织以及NPV刺激后不同时间段的表达模式，探究草地贪夜蛾RACK1的功能以及该基因是否应答NPV刺激。结果表明：草地贪夜蛾RACK1的ORF序列长度为960 bp，可编码319个氨基酸，包含有7个重复的WD40结构域，预测其分子量和等电点分别为35.9 kDa和8.07,未发现信号肽和跨膜结构；多重序列比对及进化树分析表明，SfRACK1与棉铃虫、小菜蛾等鳞翅目昆虫亲缘关系较近；组织表达及时空表达结果表明，SfRACK1基因在脂肪体及成虫期具有较高的表达水平，而在表皮和卵中的表达量较低；当草地贪夜蛾受到NPV侵...     

牛分枝杆菌Mb0869c抑制外源性细胞凋亡的研究

为探究与人受体相互作用蛋白激酶1 (RIPK1)存在互作的牛分枝杆菌(M. bovis) Mb0869c蛋白对细胞凋亡的作用机制，本研究通过PCR从M. bovis DNA中扩增Mb0869c基因片段后构建重组质粒p MN437-Mb0869c并经PCR和测序鉴定正确后，利用电转化法将重组质粒电转入耻垢分枝杆菌(MS)中，并经western blot鉴定Mb0869c蛋白的表达情况。结果显示，重组菌株中出现约55 ku的特异性条带，表明获得了表达Mb0869c的重组菌MS＿Mb0869c。将MS＿Mb0869c株和对照菌株MS＿Vec分别感染人单核巨噬细胞(THP-1)，通过PI和AnnexinⅤ/FITC染色，经流式细胞仪检测细胞的凋亡情况，结果显示，MS＿Mb0869c感染细胞的凋亡率显著低于MS＿Vec感染组，这表明Mb0869c可以抑制MS诱导的细胞凋亡。将上述获得的Mb0869c基因片段克隆于p LVX-IRES-Puro-3×Flag中，构建的重组质粒经测序鉴定正确后，转染HEK293T细胞中，利用嘌呤霉素筛选表达Mb0869c的细胞并经western blot鉴定。结果显...     

植物SnRK2基因家族的研究进展

蔗糖非酵解型蛋白激酶2(SnRK2)是一类在植物中普遍存在的蛋白激酶，属于Ser/Thr类蛋白激酶，在多种信号转导中均能发挥作用。为了研究SnRK2蛋白激酶在植物抗逆中的作用，分析了SnRK2基因家族的特点及研究历程，归纳了SnRK2基因在调控植物叶片气孔孔径，响应干旱胁迫、盐胁迫以及响应种子萌发和发育等方面的功能，指出SnRK2基因在多种信号转导中均能发挥作用，可以有效提高植物的抗逆能力。SnRK2基因在种子萌发和发育过程中具有重要意义，本研究为今后SnRK2分子机理研究和植物品种培育提供了参考依据。     

柠檬苦素通过激活AMPK减轻高脂饲料诱导的小鼠肾损伤

旨在研究柠檬苦素(Limonin, LM)对高脂饲料诱导的小鼠肾损伤的保护作用。选用体重21～23 g雄性C57BL/6小鼠25只，随机分为5组(n=5):对照组、LM组、高脂组、高脂+低剂量LM组(60 mg·(kg·d)^-1)和高脂+高剂量LM组(120 mg·(kg·d)^-1)。12周后称量各组小鼠体重；使用自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN);使用试剂盒检测肾组织TG、TC;通过苏木精-伊红(HE)、糖原(PAS)染色观察肾组织病理组织学变化；通过免疫组织化学检测肾中脂肪酸合成酶(FAS)、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白含量；通过蛋白免疫印迹检测AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化的AMPK(P-AMPK)、FAS、SREBP1、ATGL、HSL及肾损伤分子1(KIM1)的表达；通过分子对接检验LM、阿卡地新(AICA Riboside, AICAR)以及多索吗啡...     

MAPK在植物响应逆境胁迫中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）是一类高度保守的丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）蛋白激酶，广泛存在于真核生物中级联反应途径。植物MAPK具有相对保守的11个亚结构域，均为Ser/Thr蛋白激酶发挥其催化作用所必需的元件，其表达受活性氧、一氧化氮、激素等调控。MAPK可磷酸化多种底物，包括转录因子、蛋白激酶和细胞骨架相关蛋白等，在调控植物响应逆境（盐分、干旱、极端温度、重金属等）胁迫中起重要作用。本研究对植物MAPK家族的发现、分类与结构、调控机制及其响应各种非生物胁迫等方面的研究成果加以综述，并对未来研究方向进行展望，以期为农作物抗逆性遗传改良提供理论依据和基因资源。