| 牛分枝杆菌Mb0869c抑制外源性细胞凋亡的研究 |
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| 引用本文： | 梁秋韵,孟祥苗,杨可,黄蓓,宋厚辉,杨杨.牛分枝杆菌Mb0869c抑制外源性细胞凋亡的研究[J].中国预防兽医学报,2023(7):729-736. |
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| 作者姓名： | 梁秋韵 孟祥苗 杨可 黄蓓 宋厚辉 杨杨 |
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| 作者单位： | 浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(32272951)；;浙江省自然科学基金资助项目(LY21C180001)； |
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| 摘 要： | 为探究与人受体相互作用蛋白激酶1 (RIPK1)存在互作的牛分枝杆菌(M. bovis) Mb0869c蛋白对细胞凋亡的作用机制，本研究通过PCR从M. bovis DNA中扩增Mb0869c基因片段后构建重组质粒p MN437-Mb0869c并经PCR和测序鉴定正确后，利用电转化法将重组质粒电转入耻垢分枝杆菌(MS)中，并经western blot鉴定Mb0869c蛋白的表达情况。结果显示，重组菌株中出现约55 ku的特异性条带，表明获得了表达Mb0869c的重组菌MS＿Mb0869c。将MS＿Mb0869c株和对照菌株MS＿Vec分别感染人单核巨噬细胞(THP-1)，通过PI和AnnexinⅤ/FITC染色，经流式细胞仪检测细胞的凋亡情况，结果显示，MS＿Mb0869c感染细胞的凋亡率显著低于MS＿Vec感染组，这表明Mb0869c可以抑制MS诱导的细胞凋亡。将上述获得的Mb0869c基因片段克隆于p LVX-IRES-Puro-3×Flag中，构建的重组质粒经测序鉴定正确后，转染HEK293T细胞中，利用嘌呤霉素筛选表达Mb0869c的细胞并经western blot鉴定。结果显...
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| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 细胞凋亡 Mb0869c 受体相互作用蛋白激酶1 |
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