建兰花叶病毒外壳蛋白基因序列分析及病毒检测

以建兰花叶病毒海南分离物ＲＮＡ为模板,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增其外壳蛋白基因,克隆并测序。测出此基因大小为６６６ｎｔ,核苷酸顺序与文献报负源性为８８．８％～９６．１％,推算同的氨基酸同源性为７５．６％～９１．０％,餐过同蛋白亚基氨基酸顺序差异主要在近Ｃ－端部分。另外,利用反转录－ＰＣＲ法检测香草兰上的建兰花叶病毒。     

鸡新城疫的防治

<正>鸡新城疫(ND)为目前我国发病率最高、损失最严重的第一传染病。尽管对新城疫的免疫都极为重视,科研部门进行了广泛深入的研究(疫苗研制、免疫程序、免疫方法、免疫监测、病     

口蹄疫荧光抗体的制备与应用

用猪抗口蹄疫病毒IgG制备荧光抗体,检测口蹄疫病毒感染BHK-21细胞中的病毒抗原,结果表明,该方法可以检出口蹄疫病毒感染BHK-21细胞中的病毒抗原,荧光抗体的工作浓度确定为1：40,且这种荧光能被FMDV阳性血清特异性地抑制。用制备的荧光抗体检测感染口蹄疫病毒CS株和LB株的BHK～21细胞抹片和飞片,结果均为阳性,空白对照均为阴性。对于低代次的分离毒,即使感染细胞产生明显的CPE,采用反向间接血凝试验也不能检出收获细胞液中的病毒抗原,本试验弥补了这一缺陷。采用直接荧光抗体法可确定病毒在感染细胞中增殖的位置,可作为兽医临床诊断方法之一。     

“青蟹双顺反子病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒”获国家发明专利授权

<正>由中国水产科学研究院南海水产研究所郭志勋、张迪、冯娟等发明的"青蟹双顺反子病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒"获国家发明专利授权,专利号为:ZL201210223292.6。该发明公开了一种青蟹双顺反子病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒,该引物组由如下四条引物组成:外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP。该发明涉及的引物组、检测方法和试剂盒均可高效高特异性地检测青蟹双顺反子病毒,引物组特异性强。检测方法检测成本低、耗时短、产率高,特异性高,且阴阳性结果显色差异显著,验证率高,更加明显可靠。试剂盒建立了一套经过优     

香蕉分化芽BBTV DAS-ELISA检测方法的建立和应用

为了解海南海口香蕉分化芽携带香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus, BBTV)的情况, 本研究建立了双抗夹心酶联免疫反应(DAS-ELISA)检测法, 对来自海南地区组培厂的香蕉分化芽进行检测。检测结果表明, 6个品种1 852个香蕉分化芽平均带毒率为2.1%, 其中‘皇帝蕉’为1.98%, ‘粤科1号’为2.07%, ‘广粉蕉’为1.98%, ‘大蕉’为6.25%, ‘218’为1.89%, ‘巴西蕉’为2.25%。为了进一步验证ELISA结果的可靠性, 随机选取12个阳性样品提取总DNA进行PCR鉴定。鉴定结果显示, 12个样品中11个检测出有BBTV, 表明DAS-ELISA方法的准确率较高, 与分子检测结果基本一致, 可以胜任日常香蕉组培苗BBTV的检测。     

血清学病毒检测方法在果树上的应用

该文阐述了常用于果树病毒检测的血清学病毒检测方法.对酶联免疫吸附测定法、斑点免疫测定法中的一些常用检测方法进行了详细说明;并概述了快速免疫滤纸显色法、病毒细菌协同凝聚法;列举了血清学检测方法在果树病毒检测中的应用实例.     

狂犬病病毒检测方法的研究进展

狂犬病病毒(RV)属弹状病毒科、狂犬病病毒属,病毒呈杆状,一端扁平,另一端钝圆,长180～250 nm,宽75 nm,基因组为12 kb的单股负链RNA,从3′端至5′端依次为N、NS、M、G、L 五个结构基因,分别编码五种结构蛋白,即核蛋白(N)、磷酸化蛋白(NS)、基质蛋白(M)、糖蛋白(G) 和转录酶蛋白(L).     

人参果脱毒培养与快速繁殖研究

利用组织培养技术对人参果进行脱毒培养和快速繁殖,并对人参果茎尖诱导、增殖分化进行探索.结果表明,本试验中3种培养基均能诱导出不定芽的产生,在B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L的增殖分化培养基上,获得质量较好的分化苗,转入生根培养,7 d后生根率达100%,生根苗经检测脱毒率达100%;移至大田成活率达95%以上,达到了试验目的,为今后工厂化育苗提供可能.     

双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒

根据马铃薯A病毒全基因序列和马铃薯卷叶病毒衣壳蛋白区序列分别设计PVA和PLRV的特异性引物,应用双重RT-PCR同步检测马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒,分别得到300bp和222bp大小的扩增片段.试验从反转录、PCR等方面对双重RT-PCR同步检测2种病毒进行了探索和优化.结果表明反转录反应中dNTPs浓度、2种病毒下游引物浓度比例以及PCR反应中Mg2+浓度对双重RT-PCR同时检测PVA和PLRV有较大的影响.     

桃树李矮缩病的RT-PCR检测

比较了4种桃叶片RNA提取方法,建立了RT-PCR桃李矮缩病检测体系。结果表明凯基TRIzol试剂法简便快捷,提取的RNA质量较好,可用于RT-PCR。RT-PCR最适反应体系为MgCl21.5 mmol/L,引物0.5μmol/L,模板1.0μg/50μL,退火温度为43℃。采集桃主产区北京、陕西、山东、河北、河南、新疆以及江苏的徐州、无锡、南京等地带叶芽的桃枝样品作为试材,利用RT-CR进行李矮缩病检测。结果显示,在北京大久保、山东春雪、陕西美引15#和江苏南京霞晖7号上发现PDV。