1株猪源2009/H1N1流感病毒反向遗传系统的建立

为建立1株猪源2009/H1N1流感病毒A/swine/Heilongjiang/44/2009(HLJ44)的反向遗传系统,利用双向表达质粒p HW2000,分别构建了该病毒株8个基因节段的重组质粒,将其共转染于293T和MDCK混合培养的细胞,拯救出重组病毒R-HLJ44。测序结果表明,R-HLJ44与亲本病毒HLJ44的核苷酸序列完全一致;二者在细胞上具有相似的增殖特性;抗原性未发生变化;分别以106TCID50的剂量鼻腔感染BALB/c小鼠,结果显示R-HLJ44与亲本HLJ44在小鼠脏器中的复制滴度也基本一致。以上结果表明拯救的重组病毒保持了与亲本病毒一致的生物学特性。该病毒反向遗传系统的建立,为进一步研究H1N1亚型流感病毒的致病分子机制及新型疫苗研制等奠定了基础。     

内蒙古地区露地小果型西瓜简约化栽培技术

根据小果型西瓜的特征特性及内蒙古地区冷凉的气候条件,探索出适宜当地的不整枝、不打权的省工简约化小果型西瓜栽培技术。笔者结合当地气候条件、土壤养分、土壤酸碱度情况,从育苗、定植、田间管理、病虫害防治等方面介绍该技术,对当地小果型西瓜的推广有一定的参考价值。     

腹腔镜肾部分切除与肾切除对小型猪肝肾功能的影响

本试验旨在比较腹腔镜下肾部分切除与肾切除对小型猪肝肾功能的影响,评估手术的安全性与可行性,为两种手术方法的应用提供科学依据。试验以10头广西巴马小型猪为研究对象,随机分为腹腔镜肾部分切除术组(LPN组)与腹腔镜肾切除术组(LRN组),分别于术前、术后即刻、术后1d、2d、3d、5d、7d、14d采取前腔静脉血,检测肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST),肾功能指标β2微球蛋白(β2-MG)、肾损伤分子-1(KIM-1)、胱抑素C(CYS-C),比较其差异性。结果显示,两组手术均成功完成,肝、肾功能指标均呈先升高后降低趋势,与试验前相比差异极显著(P0.01)。LPN组术后肝功能指标高于LRN组,差异极显著(P0.01);LPN组术后肾功能指标略高于LRN组,无显著性差异(P0.05),LPN组肾功能指标恢复至术前水平更快速。结果表明,LPN较LRN在短期内会造成更严重的肝肾损伤,但更有利于肾功能恢复,临床上应依据不同情况进行选择。     

马铃薯AP2/ERF转录因子的克隆及植物表达载体构建

AP2/ERF基因家族转录因子普遍存在于植物中,参与植物体内的各种生物学过程,包括植物的生长发育、生物和非生物胁迫响应等。前期转录组测序的结果发现马铃薯‘加湘1号’一个AP2/ERF家族基因(PGSC0003DMG400012154)在接种晚疫病菌(Phytophthora infestans)24 h后被显著激活。从接种P.infestans 24 h的‘加湘1号’的总RNA中通过RT-PCR获得了该基因CDS序列为885 bp,BLAST分析显示该基因编码一个295个氨基酸残基的蛋白,并且含有1个AP2/ERF结构域,是AP2/ERF转录因子家族中的ERF亚家族的一员。本研究将该基因与XcmⅠ酶切的表达载体pCXSN连接,转化大肠杆菌,通过测序挑选插入正确克隆酶切验证,并成功转化农杆菌。本研究结果为进一步研究该基因的功能提供了帮助。     

河南省猪肺炎支原体感染的流行情况调查

为了对河南省猪肺炎支原体的流行情况进行调查,试验从发生呼吸道疾病的肺中分离鉴定猪肺炎支原体,对疑似猪肺炎支原体的肺组织样品通过液体培养传代、固体培养基培养、吉姆萨染色镜检,PCR扩增,并进行测序比对。结果表明,2017年1—12月从河南省猪场发生呼吸困难的猪的实变的肺脏共采集148份,共分离25株猪肺炎支原体,分离率达16.89%。结果说明猪肺炎支原体在河南省发生呼吸道疾病的猪场中感染率较高。     

浅谈生物素与猪蹄裂的关系

猪场中的漏粪板(条)做工不精细、栏舍结构、地面不精细等引起猪只蹄部损伤,此外猪场使用劣质鱼粉、脂类过氧化物、广谱抗菌药物等容易导致生物素缺乏症。特别是近年来随着高生产性能种猪的普及,由于体重增加,营养需求更多,一旦生物素缺乏,猪场裂蹄比例更高。文章介绍了生物素的功能及其缺乏症,分析了猪场发生蹄裂的常见因素,并对裂蹄提供了一系列防治方法。     

交通枢纽型地铁口共享单车空间分布特点

交通枢纽型地铁站出口,单车流具有单向流动性,需要人工辅助将目的地单车运回出发点。但由于目的地换乘公交班次稳定,人流稳定,因此区域内整体单车数量不需增加。     

白屈菜CmFAD2基因的克隆及植物转化载体构建

通过对白屈菜低温应答过程的转录组分析发现膜脂不饱和化相关基因的表达在一定过程中发生变化,脂肪酸去饱和酶基因FAD2在随温度的变化趋势为正"V"型,且表达量变化显著。利用NCBI等在线软件对序列进行相关生物学信息分析,并对白屈菜FAD家族成员FAD2基因的完整开放阅读框(ORF)进行克隆,并命名为CmFAD2。选用克隆载体pMD-19-T,转化大肠杆菌DH5α,测序验证序列正确性及完整性。将目的基因与植物表达载体pRI-201-AN连接构建重组DNA pRI-201-AN-Cm FAD2,电击法转化农杆菌LBA4404,利用菌液PCR法验证成功。该基因可作为药用植物抗寒品种创制的候选基因。     

近段时间猪场病毒性腹泻案例分享与总结

非洲猪瘟的侵袭导致很多猪场母猪来源偏杂,容易诱发猪病。虽然猪场非常重视生物安全,但是仍然造成局部地区性流行。笔者分享了工作中接触的典型的案例,供读者参考,希望对读者有所启发。从2018年8月国内发生非洲猪瘟以来,由于疫情原因造成很多母猪淘汰,不少猪场由于引种困难,采购大量三元母猪,或者来源广泛的二元种猪,造成不少猪场防控非洲猪瘟、猪蓝耳病、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪伪狂犬病压力大大增加。