循环水系统中淡化养殖大黄鱼生长及卵巢发育的初步研究

研究了低盐度(盐度为5)条件下,室内循环水养殖8月龄大黄鱼随着年龄的增长与同龄正常海水(盐度为35)网箱养殖大黄鱼生长情况以及肥满度的变化。研究结果表明正常海水盐度网箱养殖中的大黄鱼体质量显著大于同期淡化循环水养殖条件下大黄鱼的体质量(P0.01),而在两种养殖模式下大黄鱼肥满度随着时间的变化上下波动,并且在繁殖季节大黄鱼的肥满度高于非繁殖季节。大黄鱼长期生长在盐度为5的海水中其卵巢可以发育成熟,但性腺指数低于正常海水中的大黄鱼的性腺指数,并且在成熟的大黄鱼卵巢中,淡化组的大黄鱼卵巢中成熟卵细胞所占比例明显低于正常海水组的大黄鱼。本实验为大黄鱼的淡化养殖和淡化养殖条件下的人工繁殖提供了理论依据。     

溴系阻燃剂(BFRs)的动物内分泌干扰(ED)研究

近年来,防火溴系阻燃剂(Brominated flame retardants,BFRs)是在聚合物和织物中应用最为广泛的阻燃剂之一,广泛应用于各种家用和工业产品。BFRs属持久性有机污染物,目前在环境中已普遍存在,已在国际上引起了广泛的关注。由于BFRs的使用量在逐年增大,在土壤、沉积物、大气和生物体中普遍检测出BFRs。BFRs对水生动物、鸟类、哺乳动物都存在不同程度的毒害作用,其分布的广泛性、难降解性和对人体健康的不确定性已引起人们的普遍关注。基于国外动物毒理学研究成果,文章综合论述了BFRs及其代谢化合物对不同动物的内分泌干扰活性,主要介绍了对甲状腺激素水平、雌激素水平、雄激素水平及对动物神经系统发育的影响,为评价BFRs对动物和人类的健康影响提供理论基础。     

拟穴青蟹Sp-Sox14基因在胚胎发育和性腺发育过程中的表达

为了解Sox14基因在拟穴青蟹胚胎发育和性腺发育过程中可能起到的调控作用,实验从青蟹性腺转录组数据库中得到全长为2558 bp的Sp-Sox14 c DNA序列,该序列编码一个包含427个氨基酸的蛋白,包含一个HMG-box。进化树分析表明,Sp-Sox14与其他节肢动物的Sox14亲缘关系较近。实时定量PCR结果显示,Sp-Sox14在成蟹雌雄各组织中均有不同程度的表达,其中在卵巢和雄蟹心脏中的表达量最高。在胚胎发育过程中,SpSox14在复眼色素形成期的表达量显著高于其他时期。在性腺不同发育阶段,Sp-Sox14在卵黄发生前期(O2)的表达量显著高于卵巢其他发育阶段;而在精巢发育过程中,其表达量在成熟精子期(T3)高于精母细胞期(T1)和精子细胞期(T2)。推测其参与卵巢的前期发育以及精子成熟等过程。整胚原位杂交结果显示,Sp-Sox14在青蟹胚胎复眼色素形成期阳性信号定位于头部以及鄂足附近,在近孵化期定位于复眼附近,幼体孵出期则在头部仍有少量信号,暗示其与青蟹神经器官的形成以及体节附肢的发生有关。     

饲料磷脂对已交配和未交配雌性三疣梭子蟹卵巢发育、组织学和卵黄蛋白原表达的影响

为探讨饲料磷脂对已交配和未交配雌性三疣梭子蟹卵巢发育、组织学结构和卵黄蛋白原基因表达的影响,本研究采用2×2双因子随机区组设计(日粮类型:0%和4%大豆卵磷脂;三疣梭子蟹交配处理:已交配和未交配),共4个处理组,以大豆卵磷脂0%和4%两种人工配合饲料分别投喂交配和未交配两组三疣梭子蟹雌蟹,进行了为期12周的饲养实验。结果显示,无论三疣梭子蟹是否交配,饲料中添加4%大豆卵磷脂可显著增加三疣梭子蟹的卵巢指数,提高血清中卵黄蛋白原、孕酮和雌二醇的浓度,增大卵母细胞直径;同时上调肝胰腺卵黄蛋白原m RNA相对表达量,但无显著性差异,肝胰腺指数呈现出和卵巢指数相反的趋势;交配后的三疣梭子蟹卵巢指数、肝胰腺卵黄蛋白原m RNA表达量显著高于未交配组。组织学观察显示,交配使得三疣梭子蟹卵母细胞沉积更丰富的卵黄颗粒,促进卵母细胞成熟,交配处理对肝胰腺指数和血清中卵黄蛋白原及孕酮的水平无显著性影响。此外,饲料磷脂水平和交配处理的交互作用显著影响了三疣梭子蟹血清中类固醇激素孕酮和雌二醇的浓度。本实验结果显示,饲料中大豆磷脂和交配处理均能促进雌性三疣梭子蟹的卵巢发育,交配处理对卵母细胞成熟的促进作用更为明显。     

Production of germ-line chimeras by the transfer of cryopreserved gonadal germ cells collected from 7- and 9-day-old chick embryos

Gonadal germ cells (GGC) were collected from the gonads of 7‐ or 9‐day‐old White Leghorn chick embryos and suspended in freezing medium containing 10% dimethylsulfoxide (DMSO). The cell suspension was frozen at ?1°C/min. until the temperature reached ?80°C. Then, the cells were immersed in liquid nitrogen at ?196°C and stored for 3–4 months. Approximately 50 frozen/thawed GGC were injected into the dorsal aorta of each 2‐day‐old Rhode Island Red (RIR) embryo, from which blood was drawn before germ‐cell injection. The injected embryos were incubated until they hatched and the chicks were raised until sexually mature. On reaching sexual maturity, a progeny test was performed by mating recipient chicks with normal RIR of the opposite sex. Progenies were obtained from male germ cell recipients that were injected with germ cells collected from 7‐ and 9‐day‐old embryos. The results demonstrated that frozen/thawed GGC collected from 7‐ or 9‐day‐old fertilized eggs can be used to produce male germ‐line chimeras.     

长牡蛎壳金选育群体性腺发育与营养成分的周年变化

为了评估长牡蛎(Crassostrea gigas)壳金选育群体的繁殖周期及营养价值,自2013年11月至2014年10月,对山东省刘公岛海区长牡蛎第三代壳金选育群体的性腺发育、营养成分(总蛋白、总脂肪、糖原)季节变化及其与环境因子的关系进行了研究,并比较了与普通养殖群体营养成分的差异。结果表明,长牡蛎壳金选育群体雌雄比例接近1︰1,性腺同步发育;配子发生开始于2月,全年只有1个产卵季节(6―8月),7月为两性配子排放高峰期。配子成熟及排放期间,水温处于较高水平,食物充足,可为性腺发育提供能量,也有利于幼体的存活和生长。卵母细胞直径从配子发生开始逐渐增大,并在产卵前达到最大值(36.88μm),产卵后则降低。营养成分分析表明,脂肪含量在性腺–内脏团中随配子发育积累储存,产卵后显著降低;糖原在性腺发育到4月时开始下降,为配子的发育提供能量;蛋白质在配子发育过程中大量合成,与繁殖活动存在密切联系。长牡蛎壳金选育群体外套膜的总蛋白含量显著高于普通养殖群体(P0.05),糖原和总脂肪含量显著低于普通养殖群体(P0.05),其他组织的一般营养成分未出现显著差异。研究表明,长牡蛎在壳金群体选育过程中营养成分已表现出分化,这为长牡蛎壳色选育提供了重要参考依据。     

黄金鲈与伊犁鲈杂交后代生长性能及杂交鲈性腺发育分析

研究了黄金鲈(Perca flavescens)雌鱼与伊犁鲈(Perca schrenki)雄鱼杂交后代的生长性能和性腺发育。结果显示:经过690 d的生长比较,杂交鲈体重为(446.94±32.14)g,黄金鲈体重为(314.16±31.20)g,伊犁鲈体重为(446.94±32.14)g;杂交鲈体重增长比黄金鲈快33.91%,二者体重有显著差异(P<0.05);杂交鲈体重增长比伊犁鲈低6.24%,杂交鲈与伊犁鲈体重无显著差异。二龄杂交鲈雌、雄性腺系数分别为(10.05±0.05)%和(1.64±0.01)%,显著低于黄金鲈雌、雄性腺系数(13.67±0.05)%和(3.60±0.01)%(P<0.05)。黄金鲈和伊犁鲈的杂交鲈繁殖期比黄金鲈推迟一年。     

人抑制素α亚基主动免疫对鸡卵泡发育和性腺激素及产蛋率的影响

用人工合成人抑制素α亚基（１－２６Ｇｌｙ．Ｔｙｒ）片段与ＫＬＨ连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高（Ｐ〈０．０５）,蛋重、卵巢上直径大于１０ｍｍ的卵泡数两组间无显著差异。经放免法测定,免疫组外周血雌二醇基础水平比对照组高,但孕酮没有显著性差异。     

外源激素对半滑舌鳎早期性腺发育及生长的影响

为探讨外源激素对半滑舌鳎性腺发育、体长增长及存活率的影响,用雌二醇和甲基睾酮分别处理半滑舌鳎幼鱼,各设200μg/L,400μg/L,500μg/L三个浓度进行浸浴处理,以乙醇处理作为阴性对照组,未做任何处理的作为空白对照组,统计各组存活率并在实验的不同时间段分别观察实验鱼的体长的变化;激素处理30 d后,每隔5 d每组取样5尾,通过组织学H.E染色观察各实验组幼鱼性腺的发育情况。结果表明,在甲基睾酮和雌二醇的诱导下,半滑舌鳎幼鱼的生长情况均受到一定程度的抑制,雌二醇在半滑舌鳎幼鱼发育早期对其卵巢发育具有一定的促进作用,而甲基睾酮则起到了抑制的作用。     

过表达FOXL2基因对鸡胚性腺分化的影响

试验旨在研究FOXL2基因对鸡胚性腺分化的影响。本试验分为试验1组、试验2组和空白对照组（鸡胚数量分别为260、100、20枚），试验组通过胚盘下腔注射的方法分别将pLV-FOXL2慢病毒重组质粒、pLV空质粒注入胚胎期第2天的鸡胚，空白对照组不做处理并与试验组一起孵化至出雏，利用CHD1基因遗传性别鉴定的方法对出雏的雏鸡进行性别检测，分析其性腺解剖学、组织学结构变化，并利用免疫组化的方法检测性腺FOXL2和CYP19A1蛋白表达量。结果显示，试验1组遗传性别为公的23只，遗传性别为母的18只，表型性别为公的21只，表型性别为母的18只，其中有2只表型性别不典型，左侧性腺发生变化，朝卵巢结构转变；试验2组遗传性别为公的9只，遗传性别为母的12只，表型性别与遗传性别一致。阳性PCR检测结果显示，试验1组获得阳性个体10个，阳性率为24.4%（10/41）；试验2组获得阳性个体8个，阳性率为38.1%（8/21）。性腺解剖学结果显示，阳性pLV-FOXL2雄性鸡胚左侧性腺体积明显大于右侧性腺，表现膨松状态；组织切片结果显示，雄性鸡胚性腺具有典型的卵巢皮质层和髓质层结构；阳性pLV-FOXL2雌性鸡胚性腺的发育无明显变化。免疫组化结果显示，FOXL2和CYP19A1蛋白在试验1组左右侧睾丸中的表达量与空白对照组母鸡卵巢中的表达量相似，显著高于试验2组（P<0.05）。以上结果表明，FOXL2基因可能促进鸡雄性性腺的性反转，在鸡性腺分化和发育过程中发挥着重要的作用。